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《陕西师范大学》 2002年
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中国蟋蟀总科昆虫RAPD分析研究

李恺  
【摘要】: RAPD(随机扩增多态性DNA)技术是二十世纪90年代发展起来的一项DNA分子多态性检测技术,它建立于聚合酶链式反应(PCR)技术基础之上,利用随机合成的寡聚核苷酸序列为引物(一般为10个bp),分别与DNA的两条单链结合,在DNA聚合酶的作用下,对基因组的特定区域进行PCR扩增,其电泳结果为不同大小和数目的DNA谱带即RAPD图谱,可反映基因组相应区域的DNA多态性。RAPD技术可在对物种没有任何分子生物学研究的情况下对其进行DNA多态性分析,有助于系统学研究中广泛进行物种间比较。大量的研究表明RAPD具有个体、群体、亚种、种等各水平的特异性,并且是按孟德尔方式遗传的,因而是一种优良的遗传标记。由于该技术高效、快速,对材料的要求不高,取材少、成本低,又无需分子生物学背景且操作简便,所以一出现就被昆虫学家所认可,并广泛的应用于分类学及系统发育研究。但是,目前的研究主要集中于一些与人类生活关系较为密切的种类(如蚊、蝇、蚜虫等),其它昆虫的研究相对较少。国内应用RAPD技术于昆虫系统学研究则更滞后。 蟋蟀隶属于昆虫纲(Insecta)直翅目(0rthoptera)长角亚目(Endifera)蟋蟀总科(Gfylloidea),是人类常见的昆虫类群之一。早在一千多年前,蟋蟀就因能发出动听的鸣声而引起人类的注意。目前,全世界已知约490多个属、3500多种,我国蟋蟀总科昆虫已知约64属、200多种。这类昆虫中,许多种类是著名的娱乐观赏昆虫,有些种类对农林业造成严重危害,与人类有着密切的关系。然而对蟋蟀的系统学研究还很不完善,传统的形态分类目前仍是其系统学研究的主要方法,而蟋蟀类昆虫近缘种现象较为普遍,在许多方面,学者的观点不一,争议也较大。近代新技术在蟋蟀系统学研究上应用的主要有发音和细胞学方法,分子系统学方面的研究较少。蟋蟀总科的分子系统学的研究也主要集中在个别种种内或种间mtDNA多态性方面及个别种同工酶的研究上,而利用RAPD技术进行蟋蟀基因组DNA多态性方面的研究在国内外更少,国外仅见Chu,J.等(1995)利用RAPD标记区分美国东部一杂交地带的蟋蟀的两个姐妹种,Allonemobius Fasciatus和A.socius,并于1998年使用RAPD和异型酶标 iC做出了这两种蟋蟀的基因连锁图;国内田英芳、郑哲民(2 0 of)首次将RAPD 技术运用于蟋蟀总科的分子系统学研究中,采用2种引物对7种蟋蟀进行了基 困组DNA多态性研究,并应用UPG问A法构建树状图,椎测系统发生关系.本项 研究在依据外部形态分类鉴定及前人工作的基础上,采用RAPD技术,通过对蟋 蟀总科7科26属57种蟋蟀基因组DNA的RAPD图谱的比较研究,在分子水平上 探讨这些类群的分类地位和亲缘关系,为丰富蟋蟀总科的分子系统学研究,并 为进一步完善蟋蟀总科的分类系统,揭示其系统发育及演化提供分子水平的依 据。本研究经用 5 4种随机引物对 5 7种蟋蟀的 RAPD扩增分析得出以下结论: 1)采用 RAPD技术,首次较系统地对中国蟋蟀总科 7科 2 6属共 5 7种蟋蟀 进行了系统学研究。在所试用的54种随机引物中筛选出可扩增出清晰可辨且稳 定的 RAPD图谱的引物分别为:蟋蟀科 9种、岭蟋科 9种、树蟋科 12种、结蟋 科12种、蛛蟋科13种、铁蟋科13种、貌蟋科13种。这其中有7种引物:SS、 583、5142、550、555、561、5379可通用于蟋蟀总科 7科不同种类的 RAPD扩增, 其中 S 8、SI4 2、S 8 3、S 5 5这 4种引物可用来鉴别蟋蟀的性别。 2)在提取蟋蟀总科昆虫的基因组DNA时,比较了CTAB法和蛋白酶K法两 种方法,结果显示蛋白酶【法更适用于蟋蟀总科昆虫的基因组则A的提取。 3)蟋蟀同种不同个体、不同性别的RAPD扩增聚类分析结果显示,同种的 不同性别先各自相聚,然后同一种的再聚在一起,这说明,同种不同性别和不 同个体之间存在不同程度的差异,但性别差异及个体差异均小于种间差异。 4)蟋蟀同种不同个体、不同性别的聚类分析结果显示,同种的不同性别各 自相聚且明确区分,说明所选用的弓】物与基因组DNA结合位点的染色体恰好位 于性染色体上,困而能把同种的不同性别清楚地区分开.由此,可以得出:只 要选用适当的引物,RAPD技术可被用来鉴别物种的性别。 5)RAPD是研究蟋蟀总科昆虫系统学的一种优良的分子标i己,在研究个体 间、属内种间乃至近缘属间的亲缘关系时都具有广泛的适用性,但对亲缘关系 较远的属其应用受到很大的限制;同时,RAPD技术能很好的解决蟋蟀总科许多 种类雌性难以区分的问题。 6)蟋蟀科油葫芦属、斗蟋属、棺头蟋属三个属的属内聚类分析结果所呈现 的属内种间关系与传统方法所得的结果基本一致,且结果支持黄脸油葫芦、黑 卜 脸油葫芦为独主种的观点。另外,整个蟋蟀科12属的聚类分析结果显示,这i
【学位授予单位】:陕西师范大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:Q969.263.4

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前7条
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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中国硕士学位论文全文数据库 前5条
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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5 卞晓东;鱼卵、仔稚鱼形态生态学基础研究[D];中国海洋大学;2010年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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4 万珊;柑橘粉虱对柑橘叶片挥发物的行为反应及其遗传分化研究[D];华中农业大学;2010年
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6 汲生芝;家蚕新基因Bm29的表达分析及亚细胞定位研究[D];浙江理工大学;2010年
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【同被引文献】
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1 林存銮,李素真,王延鹏,滑端超;山东省常见蟋蟀鸣叫习性与鉴别[J];山东农业科学;1994年02期
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中国博士学位论文全文数据库 前7条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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3 刘波;稻蝗及其近缘属部分种RAPD多态性及中华稻蝗种群遗传多态性研究[D];陕西师范大学;2000年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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7 李钢;历史时期中国蝗灾记录特征及其环境意义集成研究[D];兰州大学;2008年
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国期刊全文数据库 前10条
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3 马骏超;;福建蜂类概述[J];蜜蜂杂志;1987年02期
4 禹娜;赵梅英;陈立侨;李恺;;基于18S rDNA序列研究腺介虫亚目系统5发育关系[J];华东师范大学学报(自然科学版);2005年04期
5 黄丁勇;林荣澄;牛文涛;王建佳;;西南印度洋深海热液区铠甲虾初探[J];海洋通报;2011年01期
6 洪友崇;;准襀翅目(昆虫纲)的新属种[J];古生物学报;1983年03期
7 袁锋;张雅林;;《中国木虱志》(上、下卷)[J];昆虫分类学报;2011年02期
8 王慧芙;张晓玫;张可池;;福建省叶螨调查初报,附一新种记述(螨目:叶螨总科)[J];武夷科学;1985年05期
9 周开亚,周明镇,赵仲如;在亚洲首次发现的第三纪鱀豚化石[J];南京师大学报(自然科学版);1984年04期
10 邹萍;高建荣;马恩沛;;上海地区食用菌蒲螨研究(蜱螨亚纲:蒲螨总科,矮蒲螨总科)[J];上海交通大学学报(农业科学版);1988年03期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 姚云志;任东;;蝽次目昆虫的系统发育与起源演化[A];中国古生物学会第十次全国会员代表大会暨第25届学术年会——纪念中国古生物学会成立80周年论文摘要集[C];2009年
2 蕭采瑜;;半翅目异翅亚目的系统分类[A];中国昆虫学会1962年学术讨论会会刊[C];1962年
3 黄川腾;黄峥;李荣喜;郭兴玉;罗塔;王晓玲;崔大方;;植物区系地理成分分析对指导园林绿化的实际意义—以华南农业大学校园园林植物绿化为例[A];广东省植物学会第十九期学术研讨会论文集[C];2010年
4 董超;李新正;寇琦;;中国海域铠甲虾科(Galatheidae)和柱螯虾科(Chirostylidae)分类学和动物地理学研究(甲壳动物亚门:软甲纲:十足目:铠甲虾总科)[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
5 王博;张海春;;中生代裂尾甲科的功能形态及演化(昆虫纲:鞘翅目)[A];中国古生物学会第十次全国会员代表大会暨第25届学术年会——纪念中国古生物学会成立80周年论文摘要集[C];2009年
6 骆有庆;黄竞芳;;植食性瘿蜂天敌的初步研究[A];全国生物防治学术讨论会论文集[C];1991年
7 陈少华;邓健;朱春潮;邹节新;汪雁;石林波;张小燕;周宪民;;中国大陆特有Sinopotamon淡水蟹类的地理分布初探[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
8 黄丁勇;林荣澄;牛文涛;王建佳;;西南印度洋深海热液区铠甲虾初探[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
9 温廷桓;;革螨须转节上新发现的一种感觉器(初报)[A];中国昆虫学会1962年学术讨论会会刊[C];1962年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 韦天晃 邓文奎;安龙360口小水池灌溉农田[N];黔西南日报;2010年
2 通讯员于媚记者王春;南航科研经费连续两年超亿元[N];科技日报;2002年
3 徐鸿儒;默默耕耘 硕果累累[N];中国海洋报;2008年
4 许国权;春季警惕香樟红蜘蛛为害[N];中国花卉报;2009年
5 通讯员 潘国林;普坪88户农民获危房改造补助[N];黔西南日报;2009年
6 记者 李红;经济增长作用越来越依赖科学和创新[N];科技日报;2000年
7 实习记者 张云海;高中学业水平考试开考[N];和田日报(汉);2010年
8 韦天晃;安龙“叫停”一起不达标惠民工程[N];黔西南日报;2011年
9 本报记者 阎鹏 张刚 车涛;揭秘天价藏獒的背后[N];发展导报;2011年
10 特约记者 张蕾红 通讯员 陈光耀;土地估价师考试人数创新高[N];中国国土资源报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 蒋维;中国海长脚蟹总科(甲壳动物亚门:十足目)分类和地理分布特点[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2009年
2 寇琦;长臂虾总科(甲壳动物亚门:十足目:真虾下目)分子系统学研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2013年
3 张红利;4种直翅目蝗虫全线粒体基因组测序及直翅目线粒体基因组比较与系统分析[D];陕西师范大学;2013年
4 远洋;九种异齿亚纲贝类线粒体基因组研究[D];中国海洋大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 毛开云;中国蟹类胸孔亚派的分子系统学研究[D];华东师范大学;2010年
2 刘春芳;中国近海蚶总科(Arcoidea)贝类的系统发育及泥蚶(Tegillarca granosa)不同群体遗传多样性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2014年
3 王剑峰;中国草螽科Conocephalidae系统学研究(直翅目:螽斯总科)[D];河北大学;2005年
4 原帅;围胸总目、短尾次目(甲壳动物亚门)DNA条形码研究[D];山西师范大学;2012年
5 张苏炯;中国眼蕈蚊科10属分类研究(双翅目:眼蕈蚊科)[D];浙江农林大学;2010年
6 郭江莉;中国东部地区蜚蠊目昆虫分类研究[D];华东师范大学;2012年
7 孙栋;中国蝎目分类与资源状况(螯肢亚门:蛛形纲)[D];河北大学;2010年
8 熊伟;部分雀形目鸟类的CoⅠ和Cytb基因序列测定及其系统发育研究[D];四川农业大学;2010年
9 张树乾;北京猛禽寄生线虫的分类学研究(线虫纲:旋尾目)[D];河北师范大学;2012年
10 王仁诚;中国近海常见水母类和(虫戎)类的DNA条形码分析及系统发生研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
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