玉竹活性成分与品质分析
【摘要】:
以玉竹Polygonatum odoratum (Mill.) Druce为研究材料,开展了不同产区中药玉竹有效成分玉竹多糖的分离提取和比较分析,玉竹多糖体外抗氧化研究;分析测定了玉竹总皂苷、薯蓣皂苷元的含量;探讨了中药材玉竹的资源品质。此外,还对玉竹开展了良种试管快速繁殖研究,主要研究结果如下。
玉竹多糖比较分析与抗氧化研究:采用热水浸提法、Sevag法除蛋白质、乙醇沉淀获得玉竹多糖,用苯酚-硫酸比色法测得多糖含量,并对10个产区玉竹多糖含量进行比较分析。分析结果表明,不同产地玉竹药材中多糖含量有差异,江西产玉竹多糖含量最高,达11.89%;河北玉竹多糖含量最低,仅为6.37%。不同产地玉竹多糖含量顺序为:江西四川湖南黑龙江内蒙古陕西安徽广西山西河北。
采用体外化学体系,研究玉竹多糖对超氧阴离子(O2-?)、羟自由基(?OH)、1,1-二苯基-2苦苯肼自由基(DPPH?)和过氧化氢(H2O2)的清除能力。结果表明,玉竹多糖对超氧阴离子(O2-?)和过氧化氢(H2O2)有显著的体外抗氧化作用,对羟自由基(?OH)和1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH?)有一定的清除活性。
玉竹总皂苷和薯蓣皂苷元的研究:分光光度法为测定总皂苷的主要手段,并建立了测定玉竹薯蓣皂苷元的HPLC方法,色谱柱:C18(3.9*150mm);流动相:甲醇-水(88∶12);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:210nm;进样量:10.0μl。在此色谱条件下,薯蓣皂苷元与其他组分有较好的分离度。分析结果表明,四川产地玉竹的总皂苷含量最高,为3.63%;黑龙江产地玉竹的总皂苷含量最低,为1.65%。不同产地玉竹总皂苷含量顺序为:四川河北湖南内蒙古广西山西安徽江西陕西黑龙江。而薯蓣皂苷元含量较低,仅有0.031%-0.053%。
玉竹组织培养与快繁研究:以玉竹根状茎、叶片和茎段为外植体,于附加不同激素配比的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨组织培养与快繁的条件。筛选出根状茎外植体有较高的诱导率和增殖倍数,其愈伤组织、不定芽和不定根的诱导、分化培养基分别为MS+BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1),MS+BA 2.0 mg·L~(-1) +IBA 0.5 mg·L~(-1),MS+BA 3.0 mg·L~(-1)+ NAA 0.1 mg·L~(-1)和1/2MS+NAA 3.0-5.0 mg·L~(-1)。
通过研究,建立了玉竹多糖体外抗氧化体系;建立了测定玉竹薯蓣皂苷元的HPLC方法;确立了玉竹离体快繁的培养条件。玉竹多糖是药材玉竹的主要活性成分,比较分析结果显示,不同产区的玉竹多糖含量差异明显,可以作为玉竹品质评价主要指标。不同产区的玉竹总皂苷含量也有明显差异,但因薯蓣皂苷元含量较低,不易被检测。
【关键词】:玉竹 多糖 抗氧化作用 总皂苷 比较分析 组织培养 【学位授予单位】:陕西理工学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R284.1
【目录】:
- 摘要3-5
- Abstract5-10
- 第1章 绪论10-25
- 1.1 玉竹的研究进展10-15
- 1.1.1 中药玉竹概况10
- 1.1.2 形态特征与鉴定10-12
- 1.1.3 栽培技术与采收加工12
- 1.1.4 化学成分12-13
- 1.1.5 药理作用13-15
- 1.2 多糖的研究进展15-18
- 1.2.1 多糖概述15
- 1.2.2 多糖的提取与精制15-17
- 1.2.3 多糖抗氧化性17-18
- 1.3 皂苷和薯蓣皂苷元概述18-20
- 1.3.1 皂苷18-19
- 1.3.2 薯蓣皂苷元19-20
- 1.3.3 玉竹皂苷和薯蓣皂苷元的研究进展20
- 1.4 植物组织培养研究进展20-23
- 1.4.1 植物组织培养的发展简史20-21
- 1.4.2 植物组织培养的应用21-22
- 1.4.3 玉竹的组织培养研究现状22-23
- 1.5 研究意义23-25
- 第2章 玉竹多糖的分析研究25-38
- 2.1 材料与试剂25
- 2.1.1 材料25
- 2.1.2 试剂25
- 2.1.3 仪器与设备25
- 2.2 方法25-30
- 2.2.1 玉竹多糖的提取与精制25-26
- 2.2.2 玉竹多糖含量的测定26-28
- 2.2.3 玉竹多糖抗氧化性28-30
- 2.3 实验结果30-36
- 2.3.1 最大吸收波长的确定30
- 2.3.2 标准曲线30-31
- 2.3.3 换算因子31
- 2.3.4 重现性31-32
- 2.3.5 稳定性32
- 2.3.6 精密度32-33
- 2.3.7 加样回收率33
- 2.3.8 不同产地玉竹多糖含量的测定33-34
- 2.3.9 玉竹多糖体外抗氧化作用34-36
- 2.4 分析与讨论36-38
- 第3章 玉竹的总皂苷和薯蓣皂苷元含量测定38-48
- 3.1 材料与试剂38
- 3.1.1 材料38
- 3.1.2 试剂38
- 3.1.3 仪器与设备38
- 3.2 方法38-41
- 3.2.1 玉竹总皂苷和薯蓣皂苷元的制备38-39
- 3.2.2 玉竹总皂苷和薯蓣皂苷元含量的测定39-41
- 3.3 实验结果41-47
- 3.3.1 检测条件41-42
- 3.3.2 标准曲线42-43
- 3.3.3 重现性43-44
- 3.3.4 稳定性44-45
- 3.3.5 精密度45
- 3.3.6 加样回收率45-46
- 3.3.7 不同产地总皂苷和薯蓣皂苷元含量测定结果46-47
- 3.4 分析与讨论47-48
- 第4章 玉竹品质分析初探48-50
- 4.1 多糖活性成分与玉竹品质的分析48
- 4.2 薯蓣皂苷元与玉竹品质的分析48
- 4.3 不同产地生态因子与玉竹品质关系分析48-50
- 第5章 玉竹的组织培养与快速繁殖50-58
- 5.1 材料与方法50-52
- 5.1.1 材料与试剂50-51
- 5.1.2 方法51
- 5.1.3 结果调查与统计51-52
- 5.2 观察结果52-56
- 5.2.1 愈伤组织诱导培养52-53
- 5.2.2 增殖与分化培养53-54
- 5.2.3 生根培养与移栽54-56
- 5.3 结果分析56-58
- 结论58-60
- 参考文献60-66
- 攻读硕士学位期间学术成果66-68
- 致谢68
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