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《兰州大学》 2012年
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青藤碱对人肝癌细胞HepG2侵袭和转移能力的影响

何晶晶  
【摘要】:背景:青藤碱(SN)是一种从青风藤(Sinomenium acutum RehderE. H. Wilson)中提取的生物活性碱,已广泛应用于类风湿性关节炎的治疗,近年来,发现其在抑制肿瘤细胞增殖及凋亡方面发挥重要作用。本实验通过对人肝癌细胞HepG2侵袭转移能力的研究,以阐述青藤碱对抗肿瘤细胞侵袭和转移的可能机制。 目的:采用不同浓度的青藤碱(sinomenine, SN)以及0.1mmol/L的氟尿嘧啶(阳性对照)处理人肝癌细胞HepG2,从细胞增殖抑制率来研究青藤碱对人肝癌细胞HepG2的抑制作用。并利用transwell小室及Matrigel胶体外检测药物对细胞粘附、侵袭及迁移的影响。并通过检测不同浓度青藤碱作用后MMP-9, CD44, nm23-H1的变化,探讨青藤碱诱导HepG2细胞MMP-9, CD44, nm23-H1表达的作用,进一步探讨青藤碱对人肝癌细胞HepG2侵袭转移的可能机制。 方法:通过体外培养方法培养HepG2细胞,选用对数生长期的细胞,分别以0.125、0.25、0.5、0.625、1.25、2.5mmol/L的青藤碱以及0.1mmol/L的氟尿嘧啶(阳性对照)在体外处理HepG2细胞,采用MTT法检测药物对细胞增殖的影响,利用transwell小室及Matrigel胶体外检测药物对细胞的粘附、侵袭及迁移影响。Western blot方法检测MMP-9, CD44, nm23-H1的表达。 结果: (1)青藤碱作用HepG2细胞48h、72h后对细胞增殖存在一定的抑制作用。 (2)青藤碱可明显地抑制HepG2细胞与Matrigel胶的粘附、对人工基底膜的侵袭力和迁移力,且抑制作用均呈剂量依赖关系。 (3) Western blot检测结果显示青藤碱可以抑制HepG2细胞MMP-9, CD44的表达,并随作用浓度的加大,MMP-9, CD44的表达量减低;并发现以上指标在青藤碱小剂量时出现高表达;而nm23-H1的表达正好相反。 结论: (1)青藤碱具有直接抑制人肝癌细胞体外侵袭转移和增殖作用。 (2)青藤碱通过抑制细胞外基质在肝癌细胞侵袭转移发生发展中可能发挥着重要作用。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R735.7

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