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复方丹参滴丸联合卡马西平对红藻氨酸诱导的癫痫大鼠作用机制研究

韩姗姗  
【摘要】:目的考察复方丹参滴丸与卡马西平单用或合用对红藻氨酸诱导的癫痫大鼠癫痫发作的影响;通过Morris水迷宫实验考察对癫痫大鼠学习记忆能力的影响;通过尼氏染色法考察对癫痫大鼠海马神经元的影响;通过Western blot实验考察对癫痫大鼠海马中胶质细胞源性神经营养因子GDNF的表达和凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax水平的影响。方法1、将SD大鼠分为生理盐水对照组、模型组、复方丹参滴丸组、卡马西平组、复方丹参滴丸联合卡马西平组。除生理盐水组大鼠侧脑室注射生理盐水外,其余各组大鼠侧脑室注射红藻氨酸。术后生理盐水对照组和模型组大鼠每天灌胃给予等体积生理盐水,其他各组大鼠灌胃给予相应药物。每组再按时间分为3个亚组,即术后1d组、45d组、90d组。术后每天观察各组大鼠癫痫发作情况,记录发作级别和Ⅲ级以上自发性反复发作频次。2、随机选取45d和90d组的两个亚组的大鼠70只,每组7只,进行历时5d的Morris水迷宫实验,记录空间探索实验中穿越原平台的次数和在目标象限滞留时间百分比。3、随机选取1d组、45d组、90d组三个亚组的大鼠45只,每组3只,10%水合氯醛腹腔麻醉,断头取脑,尼氏染色法观察各组大鼠海马CA3区神经元损伤情况。4、随机选取1d组、45d组、90d组三个亚组的大鼠60只,每组4只,断头取脑,剥离海马体,通过Western blot检测各组大鼠海马中GDNF、Bcl-2、Bax的表达。结果1、与模型组相比,复方丹参滴丸组大鼠的发作级别和Ⅲ级以上自发性反复发作频次虽有所降低但差别均无统计学意义(P0.05),随着治疗时间的延长,卡马西平组大鼠发作级别、Ⅲ级以上自发性反复发作频次的降低均不再有无统计学意义(P0.05),联合组大鼠的发作级别、Ⅲ级以上自发性反复发作频次均有所降低,且差别有统计学意义(P0.05),结果表明,单用复方丹参滴丸不能有效控制大鼠的癫痫发作,单用卡马西平对大鼠癫痫发作的抑制作用随着治疗时间的延长而减弱,而联合治疗对大鼠癫痫发作控制良好。2、随着治疗时间的延长,与模型组相比,卡马西平组大鼠穿越原平台次数和目标象限滞留时间虽有所增加,但差异均无统计学意义(P0.05),复方丹参滴丸组穿越原平台次数增加(P0.01),目标象限滞留时间延长(P0.05),联合组大鼠穿越原平台次数和目标象限滞留时间有所增加,且差异均有统计学意义(P0.05),结果表明随着治疗时间的延长,卡马西平组大鼠学习记忆能力无明显改善,而复方丹参滴丸组与联合组大鼠学习记忆能力得到良好改善。3、随着治疗时间的延长,与模型组相比,卡马西平组、联合组大鼠海马CA3区神经元数目明显增多,差别均有统计学意义(P0.01),且联合组神经元数目明显多于卡马西平组(P0.01),而复方丹参滴丸组大鼠海马CA3区神经元数目的增多无统计学意义(P0.05)。结果表明,随着治疗时间的延长,单用复方丹参滴丸不再能明显改善大鼠海马CA3区神经元的损伤,而卡马西平组、联合组大鼠均有明显改善,且联合组较卡马西平组大鼠改善情况更为良好。4、随着治疗时间的延长,与模型组相比,复方丹参滴丸组、卡马西平组虽使癫痫大鼠海马中GDNF表达增强、Bcl-2/Bax的水平升高,但差异均无统计学意义(P0.05),而联合组大鼠海马中GDNF表达增强、Bcl-2/Bax的水平升高,差异始终有统计学意义(P0.05)。结果表明,随着治疗时间的延长可以明显促进大鼠海马中GDNF的表达,提高Bcl-2/Bax的水平,从而发挥修复和保护作用。结论复方丹参滴丸联合卡马西平长期用药较单用复方丹参滴丸或卡马西平可以更好地控制红藻氨酸致痫大鼠的癫痫发作情况,改善其学习记忆功能障碍,减轻其海马CA3区神经元的损伤,作用机制可能与增强其海马中GDNF的表达、提局Bcl-2/Bax的水平有关。


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