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《兰州大学》 2017年
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琼脂磁珠核酸信标配基HBsAg诊断试剂盒的研制

李东东  
【摘要】:建立羧基琼脂磁珠核酸信标配基HBsAg诊断试剂盒,提高乙肝疾病的早期诊断率,为疾病的治疗提供帮助。本实验以羧基琼脂磁珠为载体,以小鼠IgG的Fc核酸信标配基为检测分子以山羊抗人的乙肝多抗为捕捉体,以HBsAg为靶蛋白,形成磁珠-多抗-抗原-单抗-配基信标复合物,建立了双抗夹心免疫-PCR检测技术。结合全自动核酸提取仪,研制出试剂盒。免疫-PCR检测的结果显示,检测阈值为105~108拷贝数,蛋白浓度为10-3~10-6mg/mL有良好的线性关系,重复率为97%,具有实际检测意义。由此得出:双抗夹心免疫-PCR检测技术结合全自动核酸提取仪可以准确地检测靶标蛋白,比传统ELSIA的检测灵敏度高出103倍,说明基于琼脂磁珠的核酸信标配基双抗夹心免疫-PCR检测技术建立成功,琼脂糖核酸信标配基HBV诊断试剂盒建立成功。该试剂盒具有特异性强、灵敏度高、重复性好、人为误差小、机械化程度高等优点。因此,在临床上对乙肝病毒感染的早期诊断和治疗具有重要的意义。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R512.62

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