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《兰州大学》 2017年
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葛根素对糖尿病大鼠血清及视网膜中AGE-修饰蛋白影响的研究

张瑶  
【摘要】:研究目的:本研究通过分析葛根素对糖尿病大鼠血清及视网膜组织中AGE-修饰蛋白表达水平的影响,为临床上糖尿病视网膜病变的诊断和治疗探索新的分子生物学机制。研究方法:1.SPF级成年雄性SD大鼠150只,随机分为正常对照组1月、3月组(N1,N3)、DM 1月、3月组(D1,D3)、葛根素干预1月、3月组(P1,P3),每组25只。2.通过2%链脲佐菌素(STZ)予以大鼠腹腔注射,建立DM大鼠模型,55mg/kg。对照组给予同等剂量的柠檬酸缓冲液腹腔注射。注射后3天后,及1周后大鼠尾静脉分别取血,测定其空腹血糖,若两次均≥16.7mmol/L则视为DM造模成功。葛根素干预组大鼠予以葛根素(80mg/kg/d)灌胃。3.造模成功后,于相应时间点(灌胃开始1月、3月后)用10%水合氯醛麻醉大鼠,从心脏取血获得标本,低温下迅速分离视网膜组织,部分样品固定后在光镜及电镜下进行观察,其余标本-80℃低温保存。4.分离各组大鼠血清,自备视网膜匀浆,ELISA法分析各组大鼠视网膜及血清中AGE-修饰蛋白的总浓度。5.1-DE/Western分离各组大鼠视网膜及血清中AGE-修饰蛋白。Image Lab软件分析分组大鼠血清及视网膜中AGE-修饰蛋白表达水平,ANOVA比较各组大鼠视网膜及血清中AGE-修饰蛋白表达水平的差异,P0.05视为有显著性差异。研究结果:1.糖尿病组大鼠(D1,D3)、葛根素干预组大鼠(P1,P3)体重均显著低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05),D1组与D3组、P1组与P3组,及糖尿病组与葛根素干预组之间大鼠体重无统计学差异。2.糖尿病组大鼠(D1,D3)、葛根素干预组大鼠(P1,P3)血糖均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05),相同时间点时,糖尿病组血糖升高较葛根素干预组血糖更高(D1vs P1:27.90±1.79 vs 25.39±2.45;D3vs P3:30.33±1.69vs 25.54±2.00,P0.05)。D3组大鼠血糖水平显著高于其余各组(P0.05),P1与P3组间血糖水平无统计学差异。3.视网膜病理形态学改变:正常组大鼠(N1、N3)与D1组、P1组间无明显差异。D3组病变最