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《兰州大学》 2018年
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大鼠脊髓突触体内游离Ca~(2+)浓度及ATP含量、ATP酶活性检测的实验研究

刘一海  
【摘要】:目的:利用透视电镜观察大鼠脊髓突触体的形态,通过测定脊髓突触体内ATP含量、ATP酶活性并测定正常条件下和高钾刺激下脊髓突触体内游离Ca~(2+)浓度的变化,以检测所制备的脊髓突触体的生理活性,为研究和治疗脊髓相关疾病做准备。方法:制备大鼠脊髓突触体后,用紫外分光光度计(Ultraviolet spectrophotometer)检测突触体内ATP含量及ATP酶活性,用荧光分光光度计(Fluorescence spectrophotometer)及流式细胞仪(Flow cytometer FCM)检测突触体在静息状态和高钾刺激状态下大鼠脊髓突触体内游离Ca~(2+)的浓度。结果:1.电镜下大鼠脊髓突触体结构及形态完整;2.大鼠脊髓突触体内可检测到ATP及ATP酶活性,钠钾ATP酶活性较钙镁ATP酶活性高,两组相比,差异具有显著统计学意义(P0.01);3.用荧光分光光度计检测方法,在生理盐水组及氯化钾组均能检测到大鼠脊髓突触体内钙离子浓度,而且能分别检测到Fmin、Fmax及F值,大鼠脊髓突触体内钙离子浓度氯化钾组高于生理盐水组,两组相比,差异具有显著统计学意义(P0.01);用流式细胞仪检测方法,在生理盐水组及氯化钾组均能检测到荧光度值,氯化钾组荧光度值高于生理盐水组,两组相比,差异具有显著统计学意义(P0.01);两种方法在测得的不同条件下钙离子浓度变化具有一致性。结论:大鼠脊髓突触体内含有ATP、钠钾ATP酶及钙镁ATP酶,脊髓突触体在高钾刺激状态下钙离子发生内流,我们所制备的大鼠脊髓突触体结构完整且具有一定的生理活性。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R338

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