收藏本站
《兰州大学》 2019年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

α-突触核蛋白错误折叠、聚集以及与小分子抑制剂相互作用机制的分子模拟研究

刘雪伟  
【摘要】:帕金森病(Parkinson's disease,简称:PD)是仅次于阿尔茨海默病的神经退行性疾病。在年龄大于65岁的人群中,发病率高达2%。其主要的临床特征表现为:静止性震颤、姿势僵硬、运动迟缓等,晚期病例会出现痴呆和记忆力衰减的认知症状,严重影响着老年人的生活指数。多巴胺能神经元中以α-突触核蛋白为主要成分的路易小体以及路易神经炎的形成是其主要的病理标志。α-突触核蛋白的错误折叠与聚集形成淀粉样纤维是帕金森病的主要病理进程。由于其生化过程进行迅速且时间尺度小,实验研究很难揭示错误折叠与聚集这一病理学进程。而分子动力学模拟(Molecular Dynamics Simulation)则可以提供详细的结构动力学信息以研究蛋白质错误折叠与聚集及相关疾病的病理机制。在本论文中,我们应用分子动力学模拟研究α-突触核蛋白的错误折叠与聚集机制以及小分子抑制剂的抑制机理,为进一步阐明帕金森病的发病机制和新型合理药物设计提供理论支持。本论文第一章在帕金森病的发病机理、当前的诊断治疗策略,以及α-突触核蛋白结构和功能等方面进行了概述,同时介绍了α-突触核蛋白分子动力学模拟研究进展以及分子动力学模拟方法与原理。在其后的四个章节中,我们从不同结构层次探究了α-突触核蛋白的聚集机制以及相应小分子抑制剂的抑制机理。1)α-突触核蛋白的聚集延伸遵循模板诱导机制,即当聚集核seeds存在的条件下,α-突触核蛋白单体可以通过dock-lock的方式快速添加至seeds完成聚集延伸进一步形成纤维结构。肽段?-syn47-56是?-突触核蛋白的毒性核心,在α-突触核蛋白聚集折叠过程中起着关键作用,肽段的模板诱导研究可以揭示α-突触核蛋白错误折叠聚集分子机理。因此,我们进行了以α-突触核蛋白五聚体为模板,诱导肽段α-syn47-56错误折叠的常规分子动力学模拟研究。在第二章中,我们将肽段α-syn47-56分别置于α-突触核蛋白五聚体两侧,进行了400 ns的分子动力学模拟。研究发现,肽段α-syn47-56在五聚体两侧具有不同的延伸特性。在α-突触核蛋白五聚体左侧容易形成?-sheet结构完成模板诱导。而在右侧则不能形成?-sheet结构。此外,我们还发现α-突触核蛋白五聚体与单体间的氢键作用、静电相互作用以及范德华力在?-sheet延伸中起到重要作用。2)表达α-突触核蛋白的SNCA基因突变是引起家族性帕金森病的重要原因,实验研究表明E46K、H50Q突变可以促进?-突触核蛋白纤维化形成淀粉样斑块。然而其具体的分子机理仍未揭示。因此,我们针对α-突触核蛋白五聚体野生型及突变型E46K和H50Q的结构稳定性进行了500ns的加速分子动力学模拟研究。研究结果表明,突变型E46K显著改变了α-突触核蛋白五聚体的链间相互作用模式,溶剂化能在维持链间稳定性中起到重要作用。此外E46K突变可以很好的维持链间骨架氢键从而保持了边链的?-sheet二级结构,相对于野生型有序度增加。然而对于H50Q突变则表现为结合自由能混乱、有序度显著降低、链间骨架氢键近乎完全消失以及结构稳定性降低。因此,我们认为E46K突变与H50Q突变的致病机理不同。E46K突变可以改变链间相互作用及邻近残基的结构倾向性从而提高聚集体的稳定性。而H50Q突变的致病机理可能与?-突触核蛋白错误折叠聚集进程不相关。此外,肽段α-syn49-55的?-sheet二级结构稳定性在α-突触核蛋白聚集体整体结构稳定性中起到重要作用,这一关键折叠肽段的发现可以为针对α-突触核蛋白的新型治疗策略研发提供理论支持。3)α-突触核蛋白的聚集延伸形成淀粉样斑块是帕金森病的主要病理原因。?-突触核蛋白聚集分子机理的研究将为帕金森病的治疗提供理论依据。边界链解离是蛋白质错误折叠的逆过程,相对于α-突触核蛋白聚集进程,研究α-突触核蛋白边链解离过程所需的时间尺度小更容易研究。因此,第四章中,我们进行了α-突触核蛋白五聚体边链的解聚过程的拉伸分子动力学模拟研究。我们以α-突触核蛋白五聚体(残基44-97)为研究对象,研究其边链在一定拉力条件下的解离过程。研究发现,α-突触核蛋白解聚需要克服的主要相互作用是疏水相互作用。解离过程大概分为四步:1、肽段α-syn44-55的解离;2、肽段α-syn63-66的解离;3、肽段α-syn70-79的解离;4、肽段α-syn82-97的解离。其中,肽段α-syn63-66最难解离,因此该片段是解离的关键肽段,也是α-突触核蛋白聚集的关键肽段。4)通过小分子化合物抑制蛋白质低聚体形成和聚集是针对帕金森病的一种新型治疗策略。在这些抑制剂中,表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,简称:EGCG)是绿茶中富于生物活性的化合物,可以抑制一系列淀粉样多肽的纤维化,如α-突触核蛋白、Aβ以及胰岛淀粉样多肽(IAPP)等。为了探究EGCG抑制?-突触核蛋白聚集的分子机理,在第五章中,我们进行了关于EGCG对α-突触核蛋白纤维影响的分子动力学模拟研究。我们应用两种不同大小的α-突触核蛋白纤维包括α-突触核蛋白五聚体和α-突触核蛋白十聚体作为研究模型。结果表明,EGCG可以降低α-突触核蛋白纤维的结构稳定性并且将其有序结构转换为无序结构。此外,研究发现EGCG在α-突触核蛋白纤维界面上的三个可能的结合位点。经过详细的分析结合模式后,确定S1和S3位点是最可能的结合位点并且分别拥有不同解构机制。即EGCG结合于α-突触核蛋白纤维通过破坏β-sheet二级结构降低有序度和破坏分子内氢键改变希腊花环式结构。此外,EGCG主要通过疏水作用和氢键相互作用结合于α-突触核蛋白纤维。在结合过程中,残基ASP 98,LYS 96,GLU 61,LYS 58及THR64起到重要的作用。我们的工作所揭示的分子机制将有助于理解EGCG如何改变成熟纤维的结构并且为发现和设计α-突触核蛋白纤维的潜在抑制剂提供有价值的信息。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R742.5

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王飞;杜芸兰;卫立辛;李焰生;;抑制组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白寡聚体的影响[J];中国神经精神疾病杂志;2013年05期
2 赵江浩;赵斌;;细胞外α-突触核蛋白的特点及其与帕金森病的关系[J];医学理论与实践;2012年18期
3 刘延英;杨慧;;神经细胞凋亡机制的研究进展:α-突触核蛋白与线粒体[J];中国临床康复;2006年18期
4 杜芸兰,刘振国,陈生弟,李彪,陆国强;帕金森病模型鼠黑质α-突触核蛋白表达升高并集聚[J];中华神经科杂志;2005年06期
5 梁源,杨慧;线粒体、α-突触核蛋白在帕金森病发病机制中的作用[J];中国临床康复;2005年09期
6 李淑婷,陈彪;老年神经变性疾病蛋白基因研究:3种α-突触核蛋白提取纯化方法的比较[J];中国临床康复;2004年25期
7 杨笑;杜芸兰;白雪峰;朱德生;王飞;韩露;管阳太;;帕金森病细胞模型中分子伴侣介导自噬对α-突触核蛋白低聚体水平的影响[J];上海交通大学学报(医学版);2019年03期
8 任晓曦;赵云;韩玉坤;郑焱;杨慧;张建亮;;双分子荧光互补分析法检测α-突触核蛋白的聚集及在细胞间的传播[J];中国老年学杂志;2018年23期
9 李昆昆;李昱;;α-突触核蛋白与阿尔采末病[J];生理科学进展;2010年02期
10 张晨,李昕,李尧华,陈彪,于顺;制备与鉴定导致家族性帕金森病突变蛋白质的α-突触核蛋白聚合体[J];中国临床康复;2005年13期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杜芸兰;刘振国;陈生弟;陆国强;;百草枯诱导α-突触核蛋白聚集的在体实验研究[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
2 杜芸兰;刘振国;陈生弟;李彪;陆国强;;帕金森病小鼠模型α-突触核蛋白表达升高并集聚[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
3 杜芸兰;刘振国;陈生弟;陆国强;;百草枯诱导α-突触核蛋白聚集的在体实验研究[A];第七届全国老年医学学术会议暨海内外华人老年医学学术会议论文汇编[C];2004年
4 韩俊燕;张晨;李昕;李尧华;陈彪;于顺;;α-突触核蛋白寡聚中间体的制备以及分离与纯化[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年
5 郑稳稳;叶炎生;吴琼;张则婷;李从刚;;真核细胞中α-突触核蛋白的核磁共振研究[A];第十九届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2016年
6 于顺;刘光伟;殷娟娟;李昕;谢胜男;李尧华;杨慧;陈彪;;α-突触核蛋白在脑神经元线粒体中的定位及其对线粒体复合体Ⅰ活性的调控作用[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
7 李昕;王鹏;李尧华;何欣;于顺;;α-突触核蛋白对大鼠原代培养神经元突起的促生长作用[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
8 王岚;孙圣刚;曹学兵;张振涛;乔娴;刘红进;;格尔德霉素诱发热休克蛋白反应抑制α-突触核蛋白异常聚集和细胞毒性作用[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
9 芦林龙;;急性缺血性脑卒中患者外周血红细胞α-突触核蛋白寡聚体浓度的观察性研究[A];中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编(上)[C];2015年
10 闫冬莹;王璨;马卓;刘畅;邓宇;刘巍;徐斌;;锰诱导α-突触核蛋白寡聚化的分子机制研究[A];2018环境与健康学术会议--精准环境健康:跨学科合作的挑战论文汇编[C];2018年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 本报记者 杨雪;探寻治愈顽疾之路[N];科技日报;2013年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘雪伟;α-突触核蛋白错误折叠、聚集以及与小分子抑制剂相互作用机制的分子模拟研究[D];兰州大学;2019年
2 王亚丽;α-突触核蛋白的异常表达导致帕金森病的生物节律异常及其机制研究[D];苏州大学;2017年
3 马梦榕;α-突触核蛋白的合成及致病机理的研究[D];清华大学;2017年
4 马良;α-突触核蛋白病理性C端截短对其聚集性及毒性影响的研究[D];华中科技大学;2018年
5 李文伟;α-突触核蛋白参与MPTP诱导帕金森病模型的关键机制及苁蓉总苷干预作用的研究[D];复旦大学;2007年
6 陈蕾;α-突触核蛋白病SNCA基因A30P和A53T的突变筛查[D];天津医科大学;2009年
7 徐妍;α-突触核蛋白及其磷酸化在帕金森病中的作用研究[D];北京理工大学;2016年
8 胡丹;鱼藤酮诱导α-突触核蛋白聚集及其机制的研究[D];华中科技大学;2008年
9 韩超;外泌体在帕金森病发病机制中的研究[D];华中科技大学;2017年
10 杨鹏辉;bFGF在帕金森病模型中的神经保护作用及其机制研究[D];暨南大学;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 谢振华;帕金森病标志物磷酸化α-突触核蛋白在血浆外泌体中的定量分析研究[D];郑州大学;2019年
2 于洋;α-突触核蛋白纤维化的调控因素研究[D];河北大学;2019年
3 乔红花;Parkin在甲基苯丙胺诱导的α-突触核蛋白异常降解中的作用机制[D];南方医科大学;2018年
4 王甜甜;小鼠嗅球注射α-synuclein阳性包涵体形成并沿神经轴突播散的机制研究[D];郑州大学;2018年
5 牛西远;血浆及唾液中α-突触核蛋白作为帕金森病生物学标记物的研究[D];安徽医科大学;2018年
6 张旭;二苯乙烯苷对α-突触核蛋白过表达和聚集的影响及其作用机制[D];首都医科大学;2017年
7 李晓缓;7,8-二羟黄酮通过抑制α-突触核蛋白的表达及氧化应激改善帕金森病模型鼠的运动缺陷[D];重庆医科大学;2017年
8 赵英;唇腺活检检测α-突触核蛋白用于诊断早期帕金森病的临床研究[D];苏州大学;2017年
9 周丽敏;人工合成多肽降解α-突触核蛋白对帕金森病的治疗作用[D];重庆医科大学;2015年
10 郭新丽;铁和细胞外α-突触核蛋白影响体外培养的星形胶质细胞的作用研究[D];青岛大学;2017年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026