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《兰州大学》 2019年
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H_2S对H_2O_2和重离子辐照诱导人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

郭嘉  
【摘要】:背景:年龄相关性黄斑变性(AMD)是较为常见的眼科疾病,主要由于视网膜色素上皮细胞功能变性而引发的,其发病机制与氧化胁迫有着密切联系,因此常使用氧化损伤的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞作为模拟AMD的细胞模型。本研究采用H_2O_2诱导ARPE-19细胞产生氧化损伤和炎症反应,以此作为细胞氧化损伤模型。此外我们还采用重离子辐照处理ARPE-19细胞作为另一个细胞氧化损伤模型。H_2S作为气体信号分子,其抗氧化和抗炎症的功能一直是人们研究的焦点。通常使用H_2S供体以更精确地将H_2S气体分子输送到靶向目标,本研究中我们采用NaHS作为H_2S供体。目的:本研究旨在探究H_2S是否对H_2O_2和重离子辐照诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤具有保护作用。结果:⑴H_2O_2造成ARPE-19细胞存活率下降、细胞周期阻滞、细胞凋亡率和ROS水平上升,而H_2S能够保护细胞免受H_2O_2诱导的细胞损伤。此外H_2O_2诱导AMPK蛋白磷酸化水平上升,而H_2S可以抑制H_2O_2介导的AMPK磷酸化水平上升。H_2O_2明显诱导脂质过氧化物MDA产生,H_2S则可以降低细胞内MDA含量,并且上调抗氧化蛋白酶SOD和小分子抗氧化剂GSH的水平。此外H_2S抑制H_2O_2诱导的细胞内炎症因子TNF-α和IL-1分泌水平上升。⑵重离子辐照可以抑制ARPE-19细胞存活率,并且增加细胞凋亡、细胞内ROS水平以及相关炎症因子TNF-α和IL-1的分泌水平,而H_2S可以有效地改善重离子辐照对细胞存活率的抑制,减少细胞凋亡率,降低细胞内ROS水平和炎症因子TNF-α和IL-1的分泌水平。总之,我们使用两种不同的诱导条件(H_2O_2和重离子)建立人视网膜色素上皮细胞的氧化损伤模型,验证H_2S对人视网膜色素细胞的氧化损伤具有很好的保护作用,并对其保护效果进行初步的探究,此可以为预防与治疗AMD提供一定的基础理论依据。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R774.5

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