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《兰州大学》 2006年
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硫酸镍诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡及其对Bcl-2和Bax表达影响的实验研究

王丽娟  
【摘要】: 目的探讨硫酸镍(NiSO_4)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响并初步探讨其可能机制,为镍致雄性生殖毒性的防治提供理论依据。 方法选择健康性成熟Wistar雄性大鼠,随机分为4组:正常对照组(NS组)、NiSO_41.0、2.0、4.0mg/kg组,腹腔注射染毒,1次/d,连续30d。采用流式细胞术(FCM)、原位缺口末端标记法(TUNEL)和透射电镜观察大鼠睾丸生精细胞凋亡情况;免疫组化SABC法检测大鼠睾丸生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平;放射免疫法(RIA)检测血清雌二醇(E_2)水平;分光光度法检测睾丸组织中脂质过氧化物(LPO)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、抗-活性氧(anti-ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。 结果(1)流式细胞术检测发现,2.0、4.0mg/kg NiSO_4组大鼠睾丸生精细胞凋亡率升高,与对照组比较差异有统计学意义(p<0.05)。原位缺口末端标记法检测表明,2.0、4.0mg/kg NiSO_4组大鼠睾丸生精细胞凋亡增多(p<0.01),且凋亡细胞主要是生精早期与晚期阶段的精原细胞和精母细胞。透射电镜观察显示,染毒组大鼠精原细胞出现核固缩、边集、核膜凹陷等较为典型的凋亡细胞形态学改变。(2) 2.0、4.0mg/kg NiSO_4组大鼠睾丸生精细胞中Bcl-2阳性表达细胞数较对照组减少,而Bax阳性表达细胞数较对照组增多(p<0.05),且以生精早期和晚期阶段变化为主。2.0、4.0mg/kg NiSO_4组大鼠血清E_2水平降低,与对照组比较差异有统计学意义(p<0.01),而1.0mg/kg NiSO_4组上述指标无明显变化(p>0.05)。(3) NiSO_4可致大鼠睾丸组织中LPO含量升高,anti-ROS、T-AOC、GSH-Px活性降低,与对照组比较差异均具有统计学意义(p<0.05)。 结论硫酸镍可诱导大鼠睾丸生精早期与晚期阶段的精原细胞和精母细胞凋亡,从而影响其生殖功能。诱导凋亡的机制可能与硫酸镍所致的睾丸生精细胞Bcl-2蛋白表达下调和Bax蛋白表达上调、血清雌二醇水平降低、睾丸细胞氧化应激效应增强有关。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R114

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