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《兰州大学》 2006年
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PDGF-B反义寡核苷酸对大鼠肝星状细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

杨雅丽  
【摘要】:目的: 肝纤维化是一种严重危害人类健康的疾病,其共同的病理改变是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的过度沉积,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的表型激活是肝纤维化形成的关键,其中活化的HSC大量增殖和胶原的过度生成是导致ECM大量沉积的重要原因。所以,阻抑激活的HSC的增殖是治疗肝纤维化的重要途径。而PDGF-B又是刺激肝星状细胞增殖最强的有丝分裂原。本实验用大鼠肝星状细胞HSC-T_6为靶标,探讨PDGF-B反义寡核苷酸(ASODN)对大鼠HSC增殖、分泌内源性PDGF-B及Ⅰ型胶原分泌的影响。 方法: 我们合成了特异性的PDGF-B硫代磷酸ASODN及其对照错义寡核苷酸(MSODN),并将其加入至培养的HSC-T_6细胞中。采用台盼蓝染色计数法观察PDGF-B ASODN对HSC-T_6细胞生长的影响并绘制细胞生长曲线,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PDGF-B ASODN对HSC-T6细胞的增殖抑制作用,RT-PCR法检测HSC-T_6细胞PDGF-B mRNA和collagen-Ⅰ mRNA的表达,免疫细胞化学SABC法、流式细胞仪(FCM)检测HSC-T_6细胞内源性PDGF-B的表达水平,用ELISA法检测HSC-T_6细胞分泌的Ⅰ型胶原。 结果 (1)在2.5μmol/L~10μmol/L的PDGF-B ASODN作用下,HSC-T_6细胞生长受到明显抑制,具有浓度依赖性,此时台盼蓝染色显示细胞活力大于95%。而MSODN在相同浓度下未见生长抑制效应。但浓度为20μmol/L的ASODN或
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R575.2

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【参考文献】
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