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《兰州大学》 2009年
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不同方式后处理对大鼠缺血再灌注肾脏的影响

姚爱军  
【摘要】: 目的:建立成年大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型。探讨Fas,Caspase-3在成年大鼠肾脏缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞凋亡中的作用和机制;探讨不同方式缺血后处理对成年大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响;探讨两种剂量氯胺酮后处理对成年大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响。 方法:10周龄同批成年健康雄性Wistar大鼠(200±20克)36只,随机分6组,每组6只,即假手术(S)组、缺血再灌注(I/R)组、左下肢缺血后处理(P1)组、肾脏缺血后处理(P2)组、氯胺酮后处理a(K1)组、氯胺酮后处理b(K2)组。S组仅对左肾动脉进行游离,伤口用生理盐水纱布覆盖45min;I/R组采用无创动脉夹夹闭左肾动脉45min后松开,左肾再灌注6h制备I/R模型;P1组在左肾复灌前6min时左股动脉夹闭5min后开放;P2组在左肾缺血45min后灌注10s,停灌10s,反复6次;K1组和K2组在复灌前5min经尾静脉分别给与氯胺酮2mg/Kg和10mg/Kg。检测复灌6h时血清BUN(Cr),Cr(BUN)浓度;光镜下观察肾组织病理改变,原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测肾组织中凋亡细胞并计算凋亡指数(AI);免疫组化法检测肾组织Fas,Caspase-3表达,电镜下观察肾单位超微结构改变。使用SPSS10.0进行统计分析,P<0.05为差异有统计学意义。 结果:与S组比较,其他5组大鼠血清BUN、Cr浓度升高(P<0.01),肾组织病理改变明显,肾组织Fas、Caspase-3阳性指数和凋亡指数增加(P<0.01);与I/R组比较,其他4组大鼠血清BUN、Cr浓度降低(P<0.01),肾组织Fas、Caspase-3阳性指数和细胞凋亡指数减少(P<0.01)。与P1组比较,P2组大鼠血清BUN、Cr浓度降低(P<0.05),肾组织Fas、Caspase-3阳性指数和细胞凋亡指数减少(P<0.05)。与K1组比较,K2组大鼠血清BUN、Cr浓度降低(P<0.01),肾组织Fas、Caspase-3阳性指数和细胞凋亡指数减少(P<0.01)。 结论:肾脏缺血再灌注损伤可以启动胞外Fas凋亡通路,通过激活Caspase-3最终导致肾小管上皮细胞凋亡。两种方式缺血后处理可以抑制肾小管上皮细胞凋亡,减轻I/R损伤;肾脏缺血后处理效果更明显。两种剂量氯胺酮后处理都可以抑制肾小管上皮细胞凋亡,减轻I/R损伤,10mg/Kg比2mg/Kg效果更好。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R692

【参考文献】
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