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《兰州大学》 2010年
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健康妇女阴道乳杆菌的分离及鉴定

刘婷婷  
【摘要】: 目的从健康体检妇女生殖道中分离乳杆菌,为开发复方益生菌制剂提供新型菌株并为临床通过表达各种重组乳杆菌以治疗女性生殖系统疾病寻找理论依据做好前期准备工作。 方法采用传统方法鉴定乳杆菌,包括:革兰氏染色阳性、过氧化氢酶试验阴性、菌体形态为杆状的菌株可初步确定为乳杆菌;再通过生长温度试验(15℃,45℃)、运动性试验、硝酸盐还原试验、明胶液化试验、吲哚(靛基质)试验、硫化氢试验将疑似株菌鉴定为乳杆菌属;碳水化合物发酵产酸试验对乳杆菌进行种的鉴定。进一步筛选出产生过氧化氢的优势菌株,并运用16S rRNA序列分析方法,对其进行基因型鉴定。并对优势菌进行初步的性能鉴定试验,其中包括:生长试验、不同培养时间发酵液pH的变化情况、菌株对温度的敏感性试验、耐酸性菌株的初步筛选、乳杆菌体外拮抗试验、抗生素敏感实验、代谢产物的热稳定性试验。此外对优势菌株进行质粒的检测。 结果从18名体检女性阴道分泌物内分离纯化得到11株菌,检出率为61.1%。11株菌鉴定得到5种乳杆菌,分别为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)4株,格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri) 3株,詹氏乳杆菌(Lactobacillus j ensenii) 2株,卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivaius)各1株。通过试验得到1株产生过氧化氢的优势乳杆菌,并通过分子生物学技术得出该菌株与卷曲乳杆菌的同源性最高。 结论运用传统的细菌学分离方法与分子生物学对分离的菌株进行了鉴定。经过对优势菌株的初步测试,其具有良好的耐酸、耐高温及体外拮抗其它病原微生物的能力。且未见其质粒DNA存在。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R711.3

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【同被引文献】
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