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结球白菜抗逆基因遗传转化方法的研究

杨慧莹  
【摘要】: 结球白菜(Brassica campestris L.ssp.pekinensis)在亚洲特别是中国、日本和韩国是最重要的蔬菜。本研究以结球白菜4个纯合亲本及其杂交后代的带柄子叶为外植体,建立了高频率离体不定芽再生技术。解析控制植物不定芽离体再生能力的遗传因素。 采用农杆菌介导的离体转化技术,以甜菜碱合成酶基因BADH和抗旱基因转录调控因子KT383为目的基因,以结球白菜“北京80号”和“北京新2号”为试材进行了离体转化实验的研究。 采用农杆菌介导的原位转化技术,以苏云金芽孢杆菌(Bt)基因和蛋白酶抑制剂基因合成的双价抗虫基因Bt-PinⅡ为目的基因,以结球白菜纯合高代自交系:09-482;09-1070;09-1073;09-1074开展了花序浸蘸法转基因的研究。 以苏云金芽孢杆菌(Bt)基因和蛋白酶抑制剂基因合成的双价抗虫基因Bt-PinⅡ为目的基因,进行了超声波+真空渗入联合处理法转化萌动种子的实验。收获自交的种子,在苗期进行转基因植株筛选,大包头、北京80号、京夏王的后代未获的PCR阳性植株,北京新3号后代获得30株PCR阳性植株,初步结果表明,Bt-PinⅡ基因已经整合到结球白菜的基因组中。


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