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《甘肃农业大学》 2010年
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桃儿七种子成分分析和不同组织鬼臼毒素含量的比较研究

杜微  
【摘要】: 鬼臼毒素(podophyllotoxin, C22H22O8)属于木脂体类(lignans),主要存在于小檗科(Berberidaceae)多年生草本类群鬼臼亚科(Podophylloideae)八角莲属(Dysosma Woodson)、桃儿七属(Sinopodophyllum Ying)、山荷叶属(Diphylleia Michx)及足叶草属(Podophyllum L.)植物中,其中尤以桃儿七中鬼臼毒素含量最高。桃儿七生长缓慢,人工栽培困难,加之近年来药用市场对鬼臼毒素需求增加以及对其野生资源的过度开发与利用,导致桃儿七资源的匮乏与濒危,于1992年被列入《中国珍稀濒危植物名录》并被《中国植物红皮书》收录。本试验利用气相色谱-质谱技术(GC-MS)对桃儿七种子成分进行了分析,为探讨桃儿七种子中各化合物与其生理作用的关系奠定了一定的基础;此外,利用细胞工程技术方法进行工业化生产“鬼臼毒素”是被公认的一条保护、利用桃儿七这一稀缺资源的有效途径。因此,对比测定野生材料和组培材料中鬼臼毒素的含量,对于桃儿七组织培养中高“鬼臼毒素”培养系的筛选具有重要意义。 本试验以野生桃儿七种子和不同离体组织为材料,利用GC-MS技术对种子成分进行分析;利用超临界二氧化碳萃取技术(CO2-SFE)对其不同组织器官中的鬼臼毒素进行了提取分离和比较研究。取得如下研究结果。 1.桃儿七种子成分的GC-MS分析。选用乙酸乙酯、无水乙醇、乙醚、氯仿四种不同溶剂对桃儿七种子进行索式提取,并对其提取液进行气相色谱-质谱(GC-MS)联用分析,比较不同溶剂的提取效果及鉴定其中的有机化合物。结果表明,不同溶剂的提取效果依次为:乙醚氯仿无水乙醇乙酸乙酯;提取液中均含有的物质有:棕榈酸(Hexadecanoic acid),亚油酸((Z,Z)-9,12-Octadecadienoic acid),油酸(Oleic acid),其中含量最高的为亚油酸,其余的检出物质主要是烷烃及芳香族化合物。 2.超临界二氧化碳(CO2-SFE)技术萃取桃儿七中鬼臼毒素的工艺参数筛选及优化。研究了影响超临界二氧化碳萃取(CO2-SFE)桃儿七鬼臼毒素的萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO2流量等几个因素,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理的响应面法(RSM)进行优化;利用高效液相色谱法(HPLC)作为鬼臼毒素的检测方法。结果表明:SFE-CO2萃取桃儿七中鬼臼毒素的最佳工艺条件为:萃取压力38MPa,萃取温度50℃,萃取时间52min,在此条件下,鬼臼毒素提取率可达11.38%。 3.利用得到的最佳工艺条件对野生及组培桃儿七不同器官中的鬼臼毒素进行萃取,结果显示,不同材料、不同组织器官中鬼臼毒素含量差别明显,野生桃儿七根为41.36μg/g;茎叶为8.56μg/g;种子为24.25μg/g;组培60d的桃儿七根为6.17μg/g;茎叶为0.84μg/g。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S567.19

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