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《甘肃农业大学》 2010年
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牦牛肉产品的分子追溯研究

何建文  
【摘要】:为了建立牦牛、黄牛(包括瘤牛和普通牛)和水牛肉在线粒体和核基因水平上快速、准确的鉴定方法,用于牦牛肉产品的来源追溯和物种成分鉴别,以牦牛、黄牛、水牛肉和来源于10个不同厂家的牦牛肉产品作为研究材料,尝试并系统地比较了异硫氰酸胍法、酚-氯仿抽提法和试剂盒提取法提取DNA效果进行了比较分析,并采用Cyt b基因和三个特异性微卫星位点进行检测,主要获得以下研究结果: 1.通过定量分析、凝胶电泳和PCR片段大小梯度扩增等手段对利用异硫氰酸胍法、酚-氯仿抽提法和试剂盒提取法提取的基因组DNA的数量和质量进行了比较。研究认为异硫氰酸胍法操作简便、快速、廉价,能从牦牛肉产品中提取到高质量的基因组DNA。 2.在Cyt b基因(472 bp)区域发现牦牛、黄牛和水牛各自的特异性酶切位点:牦牛的酶切位点为GACGCNNNN/,酶切片段分别为220 bp和252 bp;普通牛的酶切位点为GGGCC/C,酶切片段分别为173 bp和299 bp;水牛的酶切位点为CCANNNN/NTGG,酶切片段分别为69 bp和403 bp,且没有交叉酶切现象,可用于混合牛肉产品的牛种来源的鉴别。 3.通过对10个厂家的30袋牦牛肉产品的135份样品进行Cyt b基因片段的测序检测,发现其中有68条牦牛序列,仅占50.4%;另外有51条黄牛序列和16条水牛序列,占到了49.6%。说明黄牛肉、水牛肉掺杂到牦牛肉产品中的现象十分严重。 4.通过研究发现,对于存在基因渗透的畜种,结合3个特异性微卫星位点检测的结果才能得到可靠的结论。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S823.85

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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10 谢江安;基于VHSE结构表征的蛋白酶体酶切位点预测及酶切特异性研究[D];重庆大学;2012年
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