收藏本站
《甘肃农业大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖转化和表达的研究

安惠惠  
【摘要】:匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera.L),为禾本科翦股颖属多年生细弱草本植物,是世界上最重要的冷季型草坪植物之一。是高尔夫球和保龄球果岭上应用最广的冷季型草坪草。又因其具有较强的耐寒性、耐旱性、耐荫性以及耐低度修剪,被广泛应于其他园林绿化中。 但匍匐翦股颖的抗病性能差,易受病虫害的威胁,尤其是真菌类病害,这对草坪的生产及经营带来了极大的损失。本研究运用农杆菌介导法,将有荧光标记的光谱抗病基因-溶菌酶基因转入匍匐翦股颖中,使之得以表达,以期提高匍匐翦股颖的抗病性能。 本研究在前期基础上进一步比较了匍匐翦股颖栽培品种Penn A-1和Penn A-4的再生能力,成功建立了这二个品种的植株再生体系并比较了其再生效果。进行了Penn A-1和Penn A-4的基因转化研究,成功获得了匍匐翦股颖转pBI121-Lyz-GFP基因的转基因植株。并对转化植株进行了荧光检测和PCR扩增测试,获得了匍匐翦股颖Penn A-1转化植株中存在目标基因片断的证据。 具体研究内容及结果如下: 1.进行了匍匐翦股颖Penn A-1和Penn A-4植株再生能力的比较,成功建立了较优良的植株再生体系。 以匍匐翦股颖成熟种子为外植体,进行愈伤组织诱导、分化及生根研究。结果表明:在MS培养基上,进行愈伤组织诱导时, 2 mg/L 2,4-D +0.1 mg/L 6-BA、4 mg/L 2,4-D +0.1 mg/L 6-BA分别为匍匐翦股颖Penn A-1和Penn A-4的最适激素组合,诱导率分别为36.4%和82.4%。MSO培养基在进行愈伤组织分化时具有出最佳效果,愈伤组织分化率分别为42.5%和67.5%。经研究比较Penn A-4的再生能力优于Penn A-1。 2.探索了匍匐翦股颖基因转化的适宜条件,优化了其基因转化体系,获得了Penn A-1和Penn A-4转化植株。 以21天为继代培养周期,以连续继代3-5次的匍匐翦股颖Penn A-1和Penn A-4的胚性愈伤组织为外植体,经携有pBI121-Lyz-GFP的农杆菌LBA4404菌株侵染,使双元基因Lyz-GFP导入到匍匐翦股颖Penn A-1和Penn A-4中。研究了影响匍匐翦股颖基因转化主要因素并确定了相应的适宜值:抑菌剂以300 mg/L的羧苄青霉素为宜;浸染时间为10-15 min;适宜的菌液浓度Penn A-1为OD600= 0.3~0.5,Penn A-4为OD600= 0.5~0.9;共培养3d可有效实现目的基因的整合。 3.经荧光检测和PCR扩增测试,成功获得了呈阳性Penn A-1转基因植株。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S688.4

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王小治;王爱礼;王守红;赵海涛;单玉华;钱晓晴;封克;;污泥蚓粪对匍匐翦股颖草生长的影响[J];农业环境科学学报;2011年08期
2 韩乾;;小草也爱“健康”水[J];青少年科技博览;2011年Z2期
3 王长粉;;园林植物在高尔夫球场不同区域的配置与选择[J];考试周刊;2011年56期
4 魏睿;许兴;麻冬梅;;草坪草转基因研究进展[J];农业科学研究;2011年02期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 王莘夫;;昆明地区高尔夫球场匍匐翦股颖草坪之建植[A];中国草学会草坪专业委员会第六届全国会员代表大会及第九次学术研讨会论文汇编[C];2004年
2 郭振飞;卢少云;;草坪草基因工程研究进展[A];中国青年农业科学学术年报[C];2002年
3 经秀勇;;浅谈公园绿地冷季型草坪草的景观效果评价及养护管理[A];2011北京园林绿化与生物多样性保护[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘永刚;匍匐翦股颖的特征及品种[N];中国绿色时报;2000年
2 重庆红鼎高尔夫球会 胡剑 田亚洲;重庆地区匍匐翦股颖越夏养护[N];中国花卉报;2009年
3 北京林业大学高尔夫教育与研究中心主任 韩烈保;不忍下杆的华彬高球场[N];中国花卉报;2008年
4 张稼;转基因草会不会破坏生物多样性[N];大众科技报;2006年
5 易楚;国际草坪生产者协会推选布瑞迪为年度创新人物[N];中国花卉报;2008年
6 北京林业大学高尔夫教育与研究中心主任 韩烈保;欧洲高球场“简单即美”[N];中国花卉报;2008年
7 北京林业大学高尔夫教育与研究中心主任 韩烈保;高球场植物的选择和配置[N];中国花卉报;2008年
8 厦门诚就高尔夫顾问管理有限公司 孙立举;我国南北方高球场建植与养护要点[N];中国花卉报;2009年
9 中国高尔夫协会场地管理委员会副主任 韩烈宝;植物选择与配置初探[N];中国花卉报;2007年
10 中国高尔夫协会场地管理委员会副主任 韩烈保;如诗如画的大连金石高球场[N];中国花卉报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 王胜;不同草坪草及其根层土壤特性对盐胁迫的响应[D];北京林业大学;2012年
2 韩凝;植物螯合肽及植物螯合肽合成酶在植物镉耐性和积累中的作用机制研究[D];浙江大学;2005年
3 李海霞;匍匐翦股颖褐斑病预测模型的建立与评价[D];北京林业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 安惠惠;农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖转化和表达的研究[D];甘肃农业大学;2011年
2 马祥;丁二醇对匍匐翦股颖抗病性的诱导及其作用机理的研究[D];甘肃农业大学;2011年
3 房立翠;铺地竹中化感物质的分布及影响因素研究[D];安徽农业大学;2010年
4 于得水;基于RAPD和SRAP标记的粤选系列匍匐翦股颖种质资源多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
5 王庭辉;Lyz-GFP双元基因在陇东苜蓿不同受体系统中的转化和表达的研究[D];甘肃农业大学;2012年
6 韩斌;溶菌酶-绿色荧光蛋白(Lyz-GFP)双元基因对苜蓿转化的研究[D];甘肃农业大学;2010年
7 蓝祖庆;常绿匍匐翦股颖新品系的坪用性及水淹胁迫生理效应研究[D];甘肃农业大学;2007年
8 吴翔;匍匐翦股颖高效再生体系的建立及农杆菌介导的溶菌酶-GFP基因的转化[D];甘肃农业大学;2009年
9 周胜;六种匍匐翦股颖新品系的坪用性及耐热性研究[D];甘肃农业大学;2008年
10 刘霞;野生匍匐翦股颖耐热特性及坪用价值研究[D];四川农业大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026