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《甘肃农业大学》 2018年
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小反刍兽疫病毒多肽抗原表位的筛选及初步应用

刘怀东  
【摘要】:小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbillivirus),病毒粒子包含有6种结构蛋白,分别是核衣壳蛋白N、基质蛋白M、融合蛋白F、血凝素蛋白H、磷酸蛋白P和大蛋白L。表位抗原生物信息含量丰富,对疫病的诊断及新型疫苗的研制均具有重要价值,目前PPRV的表位研究多集中在N蛋白及H蛋白。本试验利用多肽芯片技术,以PPRV Nigeria 75/1毒株为参考序列,选择PPRV N、M、H、F四种结构蛋白全基因序列,合成多肽片段,利用PPRV阴阳性血清进行抗原表位筛选,并对获得数据进行响应率相关性、稳定性、三模式等分析。本研究通过建立的多肽芯片技术,筛选得到39条候选表位多肽,分别为N1、N38、N39、N40、N41、N42、N45、N46、N47、N48、N49、N50、F9~F19、F40、F41、F42、F45、F46、F52、F53、F54、M1、M22、M23、M26、M27、M32、H1、H36、H37。使用R语言软件,对候选多肽进行排列组合优化,得到2组最优组合,与金标准(中和试验)比对,N1,N47,N48,N49,N50,F18,H36组合灵敏度、特异性、准确性均达到92%;N1,N41,F41,H37组合灵敏度、特异性、准确性分别达到80%、91%、86%,该组合为建立PPR多肽芯片抗体检测技术提供理论支撑。用VNT试验、c-ELISA试验及PPRV多肽芯片,对PPR血清抗体消长规律进行研究,得出N46、N47、N48、N49、F9、F10可为PPR疫苗免疫效果评价方法的建立提供技术支撑。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:S852.65

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