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《甘肃农业大学》 2018年
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感染金黄色葡萄球菌后小尾寒羊乳腺组织及外周血中TLRs和CK的表达

陈佳佳  
【摘要】:本实验以小尾寒羊为实验动物研究由金黄色葡萄球菌引起的乳房炎,探究TLRs和CK的表达及与乳房炎之间的关系。利用实时荧光定量PCR方法(FQ RT-PCR)检测TLRs基因在感染金黄色葡萄球菌后12 h、24 h、36 h、48 h和72 h的乳腺组织及外周血白细胞中的相对表达量;用Western-blot方法检测感染金黄色葡萄球菌12 h、24 h、36 h、48 h、72 h后,TLRs蛋白在小尾寒羊乳腺组织中的表达情况;用ELISA法检测血清中TNF-α、IFN-α、IL-1β、IL-16的浓度。结果表明:TLRs在感染后的乳腺组织及外周血白细胞中差异表达。感染后的外周血白细胞中,TLR8未表达,TLR2在12 h的表达量显著升高;TLR6、TLR7在48 h的表达量显著升高;TLR1、TLR3、TLR4的表达量均低于对照组;TLR9在12 h和24 h以及TLR5、10在12 h的表达量无差异,其余时间段的表达量低于对照组。感染后的乳腺组织中,除TLR8和TLR9无表达外,其它TLRs均表达。TLR2在各时段的表达量均高于对照组,在12 h、24 h和36 h的表达量显著升高;TLR7和TLR10在24 h、36 h的表达量显著升高;TLR4在24 h的表达量显著升高;TLR1、TLR6的表达无差异(P0.05)。TLR4蛋白在感染后的乳腺组织中均有表达,且在24 h的表达量显著升高。IFN-α在血清中的表达在24 h、36 h、48 h时与对照组相比显著升高。IL-1β在血清中的表达量在36 h达到最高,之后呈现逐渐下降的趋势。IL-16在血清中的24 h和36 h的表达量显著升高,24 h的时候达到最高,随之逐渐下降;与对照组相比,除72 h无差异外,其余时间段均显著升高。TNF-α的表达在36 h的时候达到最高。IL-1β和IL-16在感染金黄色葡萄球菌后的血清中的表达相对较高,整体呈现波动性的变化。TLR2/10与TNF-α、IFN-α、IL-1β、IL-16四种炎症细胞因子均呈显著正相关且TLR4/7与IFN-α、IL-16之间也呈现显著正相关。研究结果为进一步揭示绵羊金黄色葡萄球菌性乳房炎发病机理提供了基础资料。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:S858.26

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