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《甘肃农业大学》 2001年
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芽孢杆菌B_1、B_2抗菌物质产生条件、理化性质、抗菌机理及其防病研究

刘晓妹  
【摘要】: 拮抗菌的筛选及鉴定 自兰州、榆中、定西等地采集的174份标样中,共筛选至 对豌豆尖镰孢(Fusarium oxysporum f.sp. pisi.)有拮抗作用的细菌110株。从分离部 位看,根围和根表是筛选强拮抗菌的主要部位。从各拮抗菌抑菌圈直径及其所占比例 看,拮抗菌虽广泛分布于各种微生境,但具强抗菌效果的拮抗菌仅占10.9%。本试验 所选用的B_1分离自番茄根表土、8_2分离自辣椒根围土,经鉴定均属芽孢杆菌属(Bacillus spp.),种待定。 B_1和B_2产生抗菌物质的最适条件 初步研究表明:将B_1接种于40mL pH8.0的 D培养液中,27±1℃下光照培养72小时;将B_2接种于40mL pH6.0的D培养液中, 27±1℃全天振荡(100r/min)条件下光照培养48小时;将培养菌液离心、除菌, 即得强抗菌效果的两菌无菌液。 B_1和B_2无菌液抑菌效价及其抗菌谱 初步测定B_1、B_2抑菌效价均为1000倍, EC_(50)分别为30倍、50倍。两拮抗菌无菌液对同一种病原菌的抗菌效果基本一致。在 测试的13种病原真菌中,对5种病原菌的抑制率为93%~99%,占测试菌总株数 38.5%;对6种病原菌抑制率在70%以上,占46.2%;对豌豆茄镰孢的抑制率最低, 为32%。表明两菌株产生的抗菌物质抗菌谱广、且抗菌效果好。 B_1和B_2及其无菌液稳定与理化性质 两菌株经连续12次转管继代培养,其 抗菌效果保持相对稳定,在p=0.01水平上无显著差异。无菌液在70℃~100℃下处理 60分钟,抗菌活性基本不受影响,121℃处理30分钟,B_1、B_2抗菌活性明显下降, 但B_2的热稳定性优于B_1。两菌抗菌物质耐酸性强、且在偏酸性条件下热稳定性好。 B_1和B_2抗菌作用的显微特征 同、异步培养试验结果间接说明:拮抗菌与指 示菌之间存在定殖位点的竞争作用。经两菌无菌液处理后的病原菌由灰白色变为白 色,气生菌丝增多且纠结成团。镜检观察其抗菌表现主要是:导致孢子和菌丝畸形、 原生质凝聚,孢子不萌发或萌发异常,菌丝生长点产生大量泡囊、生长受阻,后期菌 丝断裂、泡囊破裂,原生质外泄。 B_1和B_2抗菌蛋白的提纯及其分子量的测定 595nm下比色测得B_1、B_2无菌液 中蛋白含量分为1795.53ug/mL和1345.93ug/mL,经70%硫酸铵饱和度分段盐析、 透析、Sephadex G-50柱纯化、PEG6000浓缩后分别纯化出一种抗菌蛋白,经SDS-PAGE 测得其分子量分别为103526.7 Da(B_1)和127554.1 Da(B_2)。 B;和 B。MeWM的小区翩 B;禾 B。菌原液、 掘侧子 屿用,而稀释10倍B;、娜20倍B。对豌豆种子萌髓促 进作用。小区防治试验结果表明,浸利斗灌根的抗病效果优于单一浸种。与空白对照 .相比,B;和B晨准u为36·e、54·5O,后者接近多菌灵的防效(62·4%人 财汐经两菌防治后,豌豆根系根毛多且粗,对根系生长具有明显的促进作用。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S482.292

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【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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【二级引证文献】
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中国重要报纸全文数据库 前10条
1 上官继东;大豆低聚糖如何产生抗菌物质[N];中国食品质量报;2003年
2 俊文;天然食品防腐剂的抗菌机理[N];中国食品质量报;2004年
3 刘春;抗菌谱越广的抗生素越好[N];农村医药报(汉);2006年
4 廖志林;新型抗肿瘤物质可直达瘤体深处[N];健康报;2007年
5 来德辉记者 尹晓华;华西教授抗癌论文轰动世界[N];四川日报;2007年
6 上海交通大学附属第六人民医院药剂科 陆瑶华 (主任药师);磺胺类药使用要注意[N];家庭医生报;2009年
7 杭州立欣生物技术有限公司 王欣博士;绿源素[N];中国畜牧报;2003年
8 ;青霉素类抗生素的应用(二)[N];农村医药报(汉);2007年
9 高茜;人体中的“奇妙良方”[N];上海中医药报;2007年
10 马慕良;创新带来活力[N];医药经济报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邓阳;Paenibacillus polymyxa JSa-9抗菌物质的结构鉴定及小麦生防应用研究[D];南京农业大学;2012年
2 马艳;辣椒疫病生防菌Penicillium striatisporum Pst10的筛选、抗菌物质分离纯化及分子标记[D];南京农业大学;2008年
3 乌云达来;广谱抗菌活性Lactobacillus acidophilus NX2-6的分离筛选及其抗菌物质的研究[D];南京农业大学;2009年
4 张琇;海洋芽孢杆菌S-12-86溶菌酶的发酵、纯化与生物活性的研究[D];中国海洋大学;2007年
5 林玲;内生芽孢杆菌及抗菌物质的鉴定和对作物黄萎病的防治效果[D];南京农业大学;2009年
6 方敦煌;防治烟草赤星病根际芽孢杆菌的筛选及其抗菌物质研究[D];福建农林大学;2007年
7 王芳;苦参内生拮抗细菌筛选及其抗菌物质纯化鉴定[D];沈阳农业大学;2009年
8 江木兰;油菜内生枯草芽孢杆菌BY-2的定殖生态、抗菌机制和防治菌核病的研究[D];华中农业大学;2007年
9 刘姝;海洋链霉菌GB-2的分离筛选及其抗菌物质的研究[D];南京农业大学;2007年
10 孙力军;植物内生菌Bacillus amyloliquefaciens ES-2的分离筛选及其抗菌物质的研究[D];南京农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘晓妹;芽孢杆菌B_1、B_2抗菌物质产生条件、理化性质、抗菌机理及其防病研究[D];甘肃农业大学;2001年
2 赵凯;番茄青枯病拮抗菌抗菌物质的研究[D];西南大学;2006年
3 李婷;中华稻蝗(Qxya chinensis)抗菌物质的分离及其部分性质[D];山西大学;2007年
4 李永才;苹果梨(Pyrus bretchneideri Rehd.)黑斑病潜伏侵染及其预先合成抗菌物质的变化和诱导[D];甘肃农业大学;2000年
5 姚岚;一株水稻纹枯病拮抗细菌及其抗菌物质的研究[D];浙江大学;2011年
6 贾广韬;多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)Cp-S316抗菌物质的提取、体外抑菌试验及毒性研究[D];山东农业大学;2005年
7 王葳;几株产抗菌物质芽孢杆菌的鉴定及其抗菌物质的初步分离[D];黑龙江大学;2006年
8 关小红;枯草芽孢杆菌Tpb55抗菌物质纯化及特性的初步研究[D];中国农业科学院;2008年
9 桂林;海洋微生物的拮抗菌筛选及一株抗酵母放线菌YT研究[D];安徽农业大学;2007年
10 王君;黄粉虫抗菌物质的提取、活性测定及应用研究[D];安徽农业大学;2011年
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