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《甘肃农业大学》 2003年
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猪带绦虫45W基因家族的克隆及A_3与B_2的表达和结构预测

郑亚东  
【摘要】: 利用反转录聚合酶链式反应(RT—PCR)从激活的猪带绦虫六钩蚴克隆到45W基因家族。通过测序及DNAstar软件分析证实,得到八个A型转录本、三个相应的B型转录本和四个其它B型转录本,以及一个C型转录本。在大肠杆菌中以融合蛋白(GST)的形式对经改造的A型转录本(A_3)和B型转录本(B_2)进行表达,SDS—PAGE证明,A_3呈可溶性表达,表达量较大,约占菌体可溶性蛋白的20%—30%;B_2的表达产物主要形成了包含体,用强变性剂(6M,尿素)处理再经SDS—PAGE,证明也得到了高效表达。免疫学分析(Western-blot)结果表明,二者均与囊虫患者的阳性血清不反应或反应很弱;B_2能与猪抗六钩蚴血清反应,说明B_2可能具有免疫活性。从预测的结果看,猪带绦虫45W蛋白可能是跨膜糖蛋白,跨膜区位于C末端,在它的结构中可能还存在FnⅢ组件。在45W蛋白的加工过程中,磷酸化修饰可能是一项重要内容。由此推测,45W的作用很复杂,它可能有调节基因的表达、维持正常的细胞形态等功能,并且不一定所有的45W相关基因都参与机体的免疫应答过程。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S852.7

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【参考文献】
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