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《甘肃农业大学》 2004年
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草坪草根际联合固氮菌筛选及其特性的初步研究

田宏  
【摘要】:本研究通过选用LB、NFM、CCM培养基,利用气相色谱仪(GC)对兰州、两安 两地多年生草坪草根际联合固氮菌进行分离、筛选和测定;选用PKO和梦金娜有机培 养基以及改良的CCM培养基,分别采用溶磷圈法和比色法,对联合固氮菌的溶磷性和 分泌植物生长激素特性进行初探。通过对各菌株形念学特征、需氧性、不同碳源利用和 部分生理生化反应等测定,得出以下结论: 1)从草坪草根际筛选联合固氮菌株30株,其中10株固氮酶活性较高,10株溶磷 能力较强,另外10株具有较强分泌植物生长激素能力。 2)分离的菌株大部分有固氮能力,但固氮酶活性相差较大,具有较高固氮酶活性 菌株相对较少。分离自西安草坪绿地草坪草根际菌株,固氮酶活性在37.78~180.20 nmol C2H4/h/ml之间,其中x4菌株活性最高,L9菌株固氮酶活性最低。X4、X1和L5的固 氮酶活性达到极显著水平,是制备菌肥的首选菌株。 3)分离的10株溶磷能力较强菌株,大部分能利用有机和无机磷,L17、X1 1和X20 菌株在溶解无机磷方面相对较强;L14和L18在溶解有机磷方面表现突出,各菌株的 D/d比值,大部分随着培养时问的延长,有增大趋势。 4)在分离的302个菌株中,51.66%菌株具有分泌植物生长激素能力,其中分泌植 物生长激素能力较强的菌株有15个,占总分离物的5.0%;表现一一般的菌株45个,占 14.9%。 5)草坪草根际不同部位固氮菌的数量有所差异,其顺序为:RSNRSRPHP,分 离到的菌株多数来自根表土壤(40%)与远根土壤(26.7%),来自根表的菌株占20%, 只有少数来自根内。分离到的10株溶磷菌和分泌植物生长激素菌株,其数量分布,根 表土壤和根表数量之和大于远根土壤和根内。 6)分离菌株大部分(90%)在LB、NFM和CCM三种培养基上生长迅速(尤其在LB 培养基上),而X4、X2和X30生长速度较慢(48或72h后才可观察到生长)。 7)草坪草根际联合固氮菌的10个菌株中,4个菌株呈现明显革兰氏阳性。溶磷菌 方面,革兰氏阳性菌株仪占溶磷菌株的10%,阴性菌株占90%。分泌植物/生长激素菌 株两者比例相等。 8)分离到的30个菌株在NFM培养基上培养后,pH范围存7.37~8.67之间。产碱 WP=4 菌株26个,其中13个来白兰州,占产碱菌株的50%;中性菌株4个,来自兰州和西安 的各2个。本研究没有分离到产酸菌株。 9)分离到的菌株几乎都可以在果糖、麦芽糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、葡糖糖、甘 露醇以及l/2甘露醇+l/2蔗糖取代蛋白胨制成的培养基上良好牛长,除了用木糖替代蛋白胨的培养基。X20和X22在所有替代培养基上均可旺盛生长。但大部分菌株在木糖 制备成的培养基上生长不良,少数菌株在乳糖上不生长或生长不良。 10)分离到的30个菌株中,大部分(90%)是好氧性菌株,而少数(10%)是兼性 厌氧性,本研究没有分离到厌氧菌株。其中47%的好氧性菌株来自兰州。 11)分布在兰州和西安两地草坪绿地草坪草根际联合固氮菌主要为Enterobacter、 Bacillus、Staphylococcus、Azotobacter、Pseudomonas、Clebsiella、Clostridium属。溶磷菌株主要是.Pseudomonas、Azotobactep、Azospirillum和Bacillus。联合固氮菌中具有分泌植物生长激素性能的菌株主要是Azospirillum、Brachybacterium、Pseudomonas三个属。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S688.4

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