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暗孢耳霉菌生物学特性及对甘蓝蚜致病机理的研究

臧建成  
【摘要】:本文对甘肃省部分地区的虫生真菌资源进行了初步调查,筛选出了对蚜虫有较强感染力的暗孢耳霉菌株,并对其生物学特性,杀蚜活性以及对甘蓝蚜组织病理学和化学农药相容性的研究。结果表明:  1.通过对甘肃省部分地区虫生真菌资源调查,共分离获得菌种8 种为新接霉属(Neozygites Witlaczil)、虫疠霉属(Pandora Humber)、暗孢耳霉(Conidiobolus obscurus)、根虫瘟(Zoophthora radicans)、山东虫瘴霉(F.shandongensis)、蝇干尸霉(T.cyrtoneurae Giard)、黑孢干尸霉(T.atrospermum Petch),虫瘴霉属。通过对蚜虫的致病力测定,获得了对蚜虫感染力较高的暗孢耳霉菌株和根虫瘟霉菌株,对蚜虫感染力分别为:40.32%和46% ,证实了在甘肃干旱条件下还存在一定的虫霉资源。  2. 暗孢耳霉(C.obscurus) 属于接合菌亚门( Zygomycota)、接合菌纲(Zygomycetes)、虫霉目(Entomophthoralos)、新月霉科(Ancylistaceae)、耳霉属(Conidiobolus spp),是蚜虫的专性寄生菌。利用PDA 和SEMA 培养基进行纯化培养,系统地研究了本实验室分离获得的暗孢耳霉菌株的生物学特性。结果表明:暗孢耳霉菌菌落生长的适温范围为20℃~30℃,高温和低温对该菌的生长均有抑制作用,而且高温表现的比低温更为明显一些。光照对暗孢耳霉的影响较大,全光照有利于该菌的生长。暗孢耳霉菌分生孢子萌发最适湿度为95%~100%、最适pH 值范围为9~10。紫外线对暗孢耳霉分生孢子有强烈杀伤作用,照射5min其萌发率为63%,照射20min 其萌发率仅为4%;照射时间越长,萌发率越低。  3.用孢子浴(spore shower)接种法测定暗孢耳霉对甘蓝蚜的侵染力。用7 个剂量(5.43~206.5 孢子/mm2)处理,每剂量接种71~143 头若蚜(L:D=12:12),逐日观察,7d 的累计死亡率最高达64%。经时间-剂量-死亡率模型(TDM)模拟分析得到时间和剂量效应参数。经观察第一天未见死蚜,这与块耳霉相比,暗孢耳霉只能通过孢子萌发和菌丝的侵染,在血腔内耗尽营养致死蚜虫,而不是通过菌株产生的毒素来杀蚜。  4.通过石蜡切片技术,研究了暗孢耳霉侵染甘蓝蚜的致病机理。暗孢耳霉侵染寄主过程是其与寄主甘蓝蚜相互作用的结果。在这个过程中,寄主组织病理变化伴随着体色及其他外部特征的变化而变化。接种后暗孢耳霉分生孢子在甘蓝蚜体壁上萌发出芽管侵入其体内,以原生质体形式利用寄主体内营养进行繁殖。当原生


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