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《甘肃农业大学》 2007年
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芸芥自交亲和基因的SSR标记及SSR引物在芸芥与白菜型油菜间的共用性分析

武军艳  
【摘要】: 本研究以芸芥自交亲和系(武云7511原种)与自交不亲和系(Bolish)及其F_2分离群体为材料进行SSR标记分析,初步确定与芸芥自交亲和基因连锁的分子标记;同时使用8个白菜型油菜品种和芸芥自交亲和与自交不亲和植株进行SSR引物共用性分析,结果表明: 1.构建的BC_1F_1、F_2群体的自交亲和性发生分离,出现自交亲和与自交不亲和植株。对F2群体亲和性分离数据的x2测验表明,所有F2调查群体亲和性分离符合单基因遗传3︰1的分离比,表明芸芥自交亲和基因可能受隐性单基因控制。 2.建立了适合本研究的芸芥基因组DNA最佳SSR反应体系,20ul体系组成包括:0.5ulDNA模板量、2.0ul 10×buffer、0.5ulTag聚合酶、2.0 ul dNTP、1.0 ul引物。优化反应程序为:94℃变性5min,35个循环:94℃变性50S,55℃复性50S,72℃延伸1 min,最后在72℃保温10 min。 3.通过分离群体分组分析法(BSA),利用亲本构成的自交亲和基因池和自交不亲和基因池进行亲和基因的SSR标记筛选。经过反复的筛选,在所用的29条引物中筛选出3条多态性引物,其在自交亲和与自交不亲和池中扩增出大小不同的DNA片段。利用这3对多态性引物在F_2群体368个单株中进行了SSR扩增及连锁分析,其中只有一对引物在F2群体中发生了分离扩增,其遗传图距为10.13cM。 4.利用29对油菜SSR引物对芸芥的自交亲和植株和自交不亲和植株及白菜型油菜的8个品种扩增比较,结果表明:在芸芥自交亲和与自交不亲和植株间扩增出的多态性的SSR引物有3对,在白菜型油菜中有9对引物检测出多态性;同一引物在芸芥与白菜型油菜间检测出的片段大小及片段数目差异性较大。白菜型油菜的扩增多态性比芸芥植株好。 本研究在芸芥自交亲和基因的SSR标记上取得了重要的进展,筛选获得了一个与自交亲和基因连锁的SSR标记。并且本文所报道的在不同属间作物共用SSR引物的思路和方法,为寻找物种间共同的分子标记提供了帮助。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S565.4

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