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《甘肃中医学院》 2014年
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基于“引经”理论探索麝香酮对外源性大鼠骨髓间充质干细胞在体内迁移的作用及其机制

姜徽  
【摘要】:目的:研究不同浓度麝香酮对外源性大鼠骨髓间充质干细胞(Bonemesenchymal stem cells,BMSCs)在骨缺损模型大鼠体内迁移能力的影响,观察其对模型大鼠骨缺损处单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein1,mcp-1)及其受体CCR2和基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4表达的影响;将中医引经理论与细胞学相结合,旨在探索中医引经理论与干细胞迁移学说之间的联系,为其迁移机制提供理论依据,从现代医学角度来论证中医引经理论并进一步阐释其内涵实质。 方法:采用贴壁筛选法体外培养大鼠BMSCs,通过细胞形态学观察、成脂成骨诱导、细胞表型鉴定等方法鉴定BMSCs。建立大鼠颅骨骨缺损模型,模型成功后回植体外培养的BMSCs。将模型大鼠按随机数字表法分为高、中、低及空白对照组四个浓度组,并按各组剂量灌服麝香酮,对照组灌服等量生理盐水;每天一次,连续灌服14天后处死大鼠取出造模部位颅骨,并脱钙、制作切片;采用免疫组化染色法观察骨缺损部位趋化因子SDF-1、MCP-1的表达;通过原位杂交技术观察与之相应的趋化因子受体CXCR4、CCR2表达的变化,在普通光学显微镜下观察、拍照记录,每个切片随机选取4个视野,所得照片用IPP6.0软件计算IOD值,进行统计学分析。 结果:经体外培养纯化的大鼠BMSCs呈均一的长梭形成纤维细胞样漩涡状盘旋排列、贴壁生长,细胞表型CD44、CD90表达阳性,CD45表达阴性,经诱导后可定向成脂、成骨分化;麝香酮能促进模型大鼠骨缺损处趋化因子SDF-1、MCP-1的表达,不同浓度组和空白组比较有统计学差异(P<0.01),以低浓度组效果最佳(P<0.05);麝香酮能促进模型大鼠骨缺损处相应趋化因子受体CXCR4、CCR2的表达,各给药浓度组和空白组比较有统计学差异(P<0.01),以低浓度组效果最佳(P<0.05)。 结论:麝香酮促进外源性BMSCs在模型大鼠体内向损伤处迁移的机制与其促进相关趋化因子SDF-1、MCP-1及相应趋化因子受体CXCR4、CCR2的表达关系密切,其可能是通过该途径促进BMSCs向骨缺损处迁移,从而发挥引经的作用。
【学位授予单位】:甘肃中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R285.5;R274.9

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