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《西北师范大学》 2003年
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毛细管电泳和高效液相色谱在中药分析中的应用

纳鹏君  
【摘要】: 提高分离能力和改进分离的选择性一直是分离科学中具有挑战性的研究工作,而高效液相色谱和高效毛细管电泳则是分离科学中最重要的两个工具。高效液相色谱由于具有较高的分离能力和很好的重现性,已成为生命科学、药物科学等领域不可缺少的分析手段。但是,近十年来,高效毛细管电泳以其分离效率高、分析速度快、所需样品少以及消耗低等优势,展示了其在分析领域中巨大的应用潜力,已成为高效液相色谱的有力补充和竞争对手。 本论文即选择高效毛细管电泳和高效液相色谱这两种旨在提高分离能力的工具,对中草药山豆根中的有效成分和乌拉尔甘草叶中的营养物质进行了优化分离。此外,将高效液相色谱也成功地应用于敦煌壁画的颜料分析。 本论文共由以下五章组成: 第一章 对高效毛细管电泳的理论、技术以及在中草药分析方面的最新应用进行了综述,共引用了142篇参考文献。 第二章以0.04M含50%甲醇的柠檬酸(PH=4.5)作为缓冲溶液,在电压为25kV、检测波长为208nm的条件下,用毛细管区带电泳(CZE)方式对山豆根中的有效成分进行了分离实验。在这种优化的条件下,其时间和峰面积的精密度分别为1.39%-2.14%及3.45%-6.13%,重现性良好。同时,对山豆根中的有效成分的迁移情况,分离度大小,加样回收率高低作了考察。在最佳的分离条件下,研究了以甲醇及氯仿两种不同的有机溶剂作提取液时,杂质峰对待测峰的干扰情况。 第三章 在电解质溶液为20mmol/L硼砂溶液、30mmol/L(十二烷基硫酸钠)SDS、甲醇40%、pH=9.35的条件下,以胶束电动色谱(MEKC)模式,对山豆根中的有效成分进行了分离实验。在这种优化的条件下,对山豆根中的有效成分进行了分离测定,其时间和峰面积的精密度分别为1.42%-2.55%及4.05%-5.64%,重现性 纳鹏君:高效毛细管电泳和高压液相色谱在中药分析中的应用 良好。同时,对硼砂溶液的浓度、SDS浓度、甲醇浓度、溶液pH值及电压大小 作了考察,优化了分离条件。同时,也分别研究了以甲醇和氯仿两种不同的有 机溶剂作提取液时,在优化的分离条件下,杂质峰对待测峰的干扰情况。 第四章在真空状态、氮气保护的条件下,以浓盐酸作为水解试剂,在110℃用气相水 解方式对乌拉尔甘草叶中的蛋白质进行了较为成功的水解。将水解得到的氨基 酸以邻苯二甲醛柱前荧光衍生、剃度洗脱的方法,对其中的14种氨基酸进行 了快速测定。其最低检测限为0.02一0.08 pg/L。同时,对各种氨基酸的回收率 作了分析。 第五章在真空状态、氮气保护的条件下,以浓盐酸作为水解试剂,在110℃用气相水 解方式对敦煌壁画胶结材料中的蛋白质进行了较为成功的水解。将水解得到的 氨基酸以邻苯二甲醛柱前荧光衍生、剃度洗脱的方法,对其中的15种氨基酸 进行了快速测定。其最低检测限为0.02一0.08 pg/L。并对各种氨基酸的回收率 作了分析。发现此方法具有很高的灵敏度、广泛的适用性以及良好的重现性。
【学位授予单位】:西北师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:TQ461

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