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《青海大学》 2017年
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新型春性甘蓝型油菜开花相关基因的筛选及表达模式研究

张生萍  
【摘要】:油菜是世界重要油料作物之一,也是我国重要的食用油来源,其在我国的种植面积和总产均居世界首位。而开花是影响油菜成熟期、产量及品质的重要因素。油菜开花相关基因的研究具有重要的理论价值和应用前景。本研究以特早熟春性甘蓝型油菜86号为研究材料,利用cDNA-AFLP技术筛选其苗期和蕾期差异表达的基因片段,克隆出差异表达基因的cDNA全长序列,并通过相对荧光定量PCR分析其在油菜不同时期不同组织的表达模式。主要研究结果如下:(1)cDNA-AFLP筛选分离出86号油菜苗期和蕾期差异表达的基因序列共64条,经BLAST比对,有54条序列均在油菜基因组序列中,其中的42条序列与拟南芥已知功能的基因序列相似度极高;另外12条序列虽在油菜基因组上,但其功能未知,也未在其它植物中分离出,是一些未知基因片段。(2)用RACE技术克隆出了未知基因片段中的84-23、85-25、128-1、107-23、171-1、174-1基因的3'端全长序列和128-1、107-23、167-12基因的5'端全长序列,并根据扩增出的5'和3'序列设计的全长引物克隆出了128-1和107-23的cDNA全长序列。其中克隆出的128-1基因cDNA全长为1071bp,序列分析发现,该基因与甘蓝型油菜中预测的基因XM_013850601.1只有1个碱基的同义突变。128-1基因编码349个氨基酸残基的蛋白,氨基酸同源比对发现该蛋白可能与TPR超家族蛋白合成有关。克隆出的107-23基因cDNA全长1345bp,与甘蓝型油菜中预测的XM_013752386.1基因编码区相似度很高,但在5'有1个碱基的突变,3'端有2个碱基的突变。107-23基因编码358个氨基酸残基的蛋白,氨基酸同源比对表明该蛋白可能是与开花相关的转录因子TCP2。(3)通过RT-qPCR分析差异表达基因128-1和107-23在86号油菜不同时期不同组织的表达情况,发现两基因在苗期、蕾期和花期各组织都有表达,其中128-1基因在花期花组织的表达量最高。本研究结果表明,新型春性甘蓝型油菜中筛选出的差异表达基因128-1和107-23可能与油菜开花基因有关,具体功能有待进一步转基因验证。
【学位授予单位】:青海大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S565.4;Q943.2

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