生物条形码信号放大技术检测食源性致病菌DNA的研究
【摘要】：本论文利用生物条形码放大技术,在原有技术基础上加以改进,通过构建基于生物条形码放大技术的DNA非标记电化学检测方法,实现对大肠杆菌DNA、沙门氏菌DNA和志贺氏菌DNA这三种食源性致病菌同时准确有效检测。主要内容如下：
(1)研究了富含G碱基的DNA与普通DNA电化学行为的差异,以亚甲基蓝(MB)为电化学指示剂,对普通单链、双链DNA(ss-DNA、ds-DNA)、富含G碱基的单、双链DNA(Gss-DNA、 Gds-DNA)四种类型DNA的电化学行为进行了比较研究；为了提高电极响应信号及检测灵敏度,采取电沉积技术制备了纳米金阵列电极；通过简单有效的方法实现对目标DNA的检测,同时实现对碱基类型有显著差异的不同类型DNA的识别。
(2)依据文献及有关数据库,确定大肠杆菌特征基因序列及目标DNA分子,并设计了目标DNA探针,同时通过专业软件进行模拟计算,验证所设计的DNA探针是否符合实验要求；利用DNA生物条形码和纳米金联级信号放大作用检测了大肠杆菌DNA,同时对传统检测方法进行改进,构建了基于DNA生物条形码的两步法检测目标DNA的新方法。
(3)在前期工作基础上,通过查阅文献和专业数据库确定沙门氏菌、志贺氏菌两种食源性致病菌的特征基因序列及目标DNA分子,设计目标DNA探针,并进行模拟计算,验证所设计的DNA探针是否符合实验要求。建立了一种基于DNA生物条形码放大技术的非标记直接电化学检测方法,实现了对大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等多种食源性致病菌特征DNA分子的同时检测。
【关键词】：生物条形码 信号放大技术 DNA检测 食源性致病菌 电化学分析 【学位授予单位】：宁夏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：O657.1;TS207.4
【目录】：
- 摘要3-4
- Abstract4-6
- 第一章 绪论6-14
- 1.1 食源性致病菌与食品安全6-8
- 1.2 DNA检测技术8-11
- 1.3 DNA生物条形码放大技术11-12
- 1.4 本论文研究内容12-14
- 第二章 富G碱基及普通DNA的电化学行为差异研究14-23
- 2.1 引言14
- 2.2 材料与方法14-17
- 2.3 结果与讨论17-21
- 2.4 本章小结21-23
- 第三章 基于生物条形码放大技术的大肠杆菌DNA检测23-31
- 3.1 引言23
- 3.2 材料与方法23-27
- 3.3 结果讨论27-30
- 3.4 本章小结30-31
- 第四章 条形码放大技术用于多种食源性致病菌DNA的同时检测31-37
- 4.1 引言31
- 4.2 材料与方法31-33
- 4.3 结果讨论33-36
- 4.4 本章小结36-37
- 第五章 结论与创新点37-39
- 5.1 结论37
- 5.2 创新点37-39
- 参考文献39-47
- 致谢47-48
- 个人简历48
- 论文发表情况48
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