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《新疆大学》 2002年
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新疆甜瓜组培体系的优化及抗病转基因研究

葛屹松  
【摘要】: 近几年来在新疆甜瓜的生产中,真菌病害已成为影响新疆甜瓜产量和品质的重要因素。作者试图通过植物基因工程方法,利用根癌农杆菌将抗真菌蛋白的几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入新疆甜瓜中,以提高其抗真菌病害的能力。 选用新疆优良甜瓜品种:红蜜脆、皇后、黄醉仙、8601,用未成熟子叶切块作为外植体,经过组织培养获得再生植株。以MS为基本培养基,取3日龄子叶块外植体,选用MS+6-BA0-2.5mg/L诱导丛生芽,最高诱导率可达89%。其中杂交种的芽诱导率高于本地种。由于基因型的差异,不同品种甜瓜诱导不定芽的最适激素浓度不同,而且在整个生长过程中,6-BA的浓度逐渐降低。在生根培养时,用1/2MS+0.5mg/L IBA或 NAA诱导生根率较高。 在建立甜瓜高效再生体系的基础上,用根癌农杆菌介导法将几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入新疆甜瓜中,经卡那霉素的抗性筛选,获得转化的再生植株。用PCR反应、点杂交及SDS-PAGE等手段,进一步研究了再生植株的基因整合与表达情况。经PCR扩增反应和琼脂糖电泳检测,在转化植株中扩增出了特异片段,证明外源基因已整合到甜瓜基因组中。点杂交检测转化植株有阳性反应。SDS-PAGE分析表明,转化植株比对照在35.5KD处有一条明显的蛋白质谱带,其分子量与几丁质酶基因表达产物分子量相符。可初步确定该基因在转化植株内得到正常表达。
【学位授予单位】:新疆大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S652

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
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【二级引证文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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