刺山柑组织培养快速繁殖及RAPD分析
【摘要】：刺山柑(Capparis spinosa L)是一种山柑属植物,是我国传统中草药,主要分布在新疆和西藏。刺山柑中含有挥发油(异硫氰酸酯、麝香草酚、棕榈酸等)、芥子油苷、吲哚类、类黄酮类、谷甾醇类、葡萄糖异硫氰酸盐及一些结构新颖的化合物。刺山柑除具有抗风湿的作用外还具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗高血压、降血糖血酯、利尿、治疗痛风等方面的作用。本文研究了刺山柑组织培养、组培苗和野生苗间的RPAD分析,建立系统的方法,为刺山柑药用价值的开发利用提供了重要的科学依据。主要研究结果如下：
1刺山柑离体快繁
(1)外植体的消毒：以酒精处理10 s,然后用升汞灭菌9 min进行消毒处理最佳,其无菌外植体得率最高为86.7%。
(2)初代培养：初代培养的最佳培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,出芽率为93.3%,芽苗生长快,经过25 d培养,平均苗高3.2 cm。
(3)增殖培养：继代培养的最佳培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,增殖系数为5.6,芽苗生长快,经过30 d培养,平均苗高3.3 cm。
(4)生根培养：最佳生根培养基为MS'+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA,生根率平均为73.3%。
(5)炼苗移栽：炼苗期间,半揭膜1 d-2 d,揭膜2 d-3 d,应及时注意保湿。生根苗移栽到河沙：土(2：1)的基质中成活率最高,为40%。
2愈伤组织培养
茎段容易诱导出愈伤组织；愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L NAA,愈伤组织诱导率高达74.1%,质地松软,生长良好。而MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L适合愈伤组织的继代培养。
3 RAPD分析
组培苗与野生苗相比,在DNA水平上发生了一定程度变异,其变异百分数为3.46%,并且这种变异同时存在组培苗之间,变异百分数为1.50%。
【关键词】：刺山柑 组织培养 快繁 愈伤 RPAD 【学位授予单位】：新疆农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：S567.239
【目录】：
- 摘要3-4
- Abstract4-5
- 缩略词一览表5-7
- 第1章 引言7-23
- 1.1 药用植物生物技术概述7-20
- 1.2 刺山柑及研究进展20-23
- 第2章 刺山柑组织培养快速繁殖23-46
- 2.1 材料及培养条件23
- 2.2 方法23-27
- 2.3 结果与分析27-43
- 2.4 讨论43-46
- 第3章 刺山柑快繁苗与野生苗RAPD的遗传多样性分析46-53
- 3.1 实验材料、试剂与仪器46-47
- 3.2 实验方法47-49
- 3.3 结果和分析49-51
- 3.4 讨论51-53
- 第4章 结论53-54
- 参考文献54-60
- 图版60-62
- 致谢62-63
- 作者简历63
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