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《新疆农业大学》 2010年
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阿魏化学成分对阿魏侧耳菌丝生长及蛋白质表达的研究

白羽嘉  
【摘要】: 野生阿魏菇腐生(或寄生)在伞形科植物阿魏的根茎部,研究以阿魏菇NB-1和准噶尔阿魏为材料,通过活性引导分离阿魏化学成分。研究不同化学组分对阿魏菇菌丝生长、多种保护酶活性,以及蛋白质表达产生的影响,探索阿魏中的化学物质对阿魏菇菌丝生长的生物效应。研究的主要结果如下: (1)准噶尔阿魏肉质根茎,95%乙醇提取。提取物(Extracts)采用不同溶剂萃取,得到石油醚萃取物(Ex.P)、三氯甲烷萃取物(Ex.T)、乙酸乙酯萃取物(Ex.EA)、水相萃余物(R)。活性引导选择三氯甲烷萃取物(Ex.T),采用硅胶柱分离,活性引导选择Ex.Tc,再次硅胶柱分离,活性引导选择Ex.Tc.3进行质谱鉴定,发现Ex.Tc.3有7个主要的化学成分。 (2)Extracts对阿魏菇菌丝生长试验表明,低添加量对菌丝生长的促进作用显著优于CK,高浓度时表现出对菌丝生长促进的抑制作用。Ex.P、Ex.T、Ex.EA、R,均表现出对阿魏菇菌丝生长的促进作用,但以Ex.T效果最好。Ex.T采用柱分离得到的12个组分中,有10个组分表现出对阿魏菇菌丝生长的促进作用,其中以Ex.Tc的效果最好。Ex.Tc柱分离得到6个组分,与CK相比对菌丝生长有明显的促进作用,其中Ex.Tc.3的效果最好。低浓度的Ex.Tc.3对阿魏菇菌丝生长没有明显的促进作用,高浓度时对菌丝的生长产生抑制作用。 (3)与CK相比,Ex.T、Ex.Tc、Ex.Tc.3均能提高阿魏菇菌丝体CAT、POD、SOD活力。随着培养基中Ex.T和Ex.Tc添加量的增加,阿魏菇菌丝体CAT活力呈现逐渐提高的趋势,表现出很强的剂量效应,Ex.Tc.3对菌丝体CAT活力具有双重效应。随着培养基中Ex.T添加量的增加,阿魏菇菌丝体POD活力呈现逐渐提高的趋势,Ex.Tc和Ex.Tc.3对菌丝体POD活力具有双重效应。Ex.T对阿魏菇菌丝体SOD活力具有双重效应,随着培养基中Ex.Tc和Ex.Tc.3添加量的增加阿魏菇菌丝体SOD活力呈逐渐提高的趋势,两者之间具有剂量效应。Ex.T、Ex.Tc、Ex.Tc.3对阿魏菇菌丝体PPO活力的影响均表现出双重作用,低浓度时能提高阿魏菇菌丝体PPO活力,高浓度时对菌丝体PPO活力产生抑制作用。 (4)双向凝胶电泳从CK中能清晰的分离到826个蛋白点,从Ex-P中能清晰的分离到592个蛋白质点,从Ex.T-P中能清晰的分离到697个蛋白质点。CK和Ex-P共有397个蛋白点匹配,匹配率为55.99%,Ex-P中有134个蛋白点较CK发生了明显的上调,有113个蛋白点发生了明显的下调。CK和Ex.T-P共有571个蛋白点匹配,匹配率为74.98%,Ex.T-P中有170个蛋白点较CK发生了明显的上调,有112个蛋白点发生了明显的下调。Ex.T-P和Ex-P共有359个蛋白点匹配,匹配率为55.70%,Ex-P中有113个蛋白点较Ex.T-P发生了明显的上调,有97个蛋白点发生了明显的下调。在培养基中添加Extracts、Ex.T抑制了菌丝体中pI 5.0-pI 8.0蛋白的表达,Extracts能促进菌丝体中pI 4.0-pI 5.0(酸性)蛋白的表达,Ex.T能促进菌丝体中pI 7.0- pI 9.0(偏碱性)蛋白的表达。与CK相比Extracts和Ex.T均能促进阿魏菇菌丝体小分子量蛋白的表达,而对高分子量蛋白的表达却产生了显著地抑制作用,Extracts对阿魏菇菌丝体小分量蛋白的激活表达作用最为明显。 (5)质谱鉴定差异蛋白点Spot 748为假想蛋白MPER_07859,Spot 1180为1,4-苯醌还原酶,Spot 1363为假想蛋白NECHADRAFT_96302,Spot 920为70 kDa热休克蛋白, Spot 933为假想蛋白,Spot 1030为黄素结合单加氧酶,Spot 1347和Spot 484未能在Mascot Search Database中得到检索信息。
【学位授予单位】:新疆农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S646

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【引证文献】
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6 陈晨、樊琴;青河“捻”粗阿魏菇产业链[N];新疆日报(汉);2006年
7 樊琴;青河阿魏菇热销内地市场[N];伊犁日报(汉);2006年
8 通讯员 潘银刚 丁宁;富蕴阿魏菇闯入欧美市场[N];伊犁日报(汉);2007年
9 通讯员 石海黎;六枝“金花”齐开裕民[N];塔城报;2007年
10 李欣刘爱萍;阿魏菇二次出菇栽培技术[N];新疆科技报(汉);2008年
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3 王冬慧;新疆阿魏菇多糖对小鼠宫颈癌U14细胞凋亡影响的研究[D];石河子大学;2011年
4 徐璟煜;白灵菇和阿魏菇交配型A座位结构的初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 白羽嘉;阿魏化学成分对阿魏侧耳菌丝生长及蛋白质表达的研究[D];新疆农业大学;2010年
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9 陈恒雷;低能N~+束诱变选育耐高温阿魏菇研究[D];新疆大学;2006年
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