收藏本站
《新疆农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

苜蓿抗逆基因的cDNA克隆和转基因烟草功能的初步验证

曾光  
【摘要】:逆境胁迫是影响农作物正常生长发育和限制农作物产量的主要因素之一。当植物在高盐环境中生长一段时间后就会积累过量的Na~+,引发离子毒害、渗透胁迫而使植物的新陈代谢紊乱,严重影响植株的生长发育,甚至导致死亡。植物Na~+/H~+逆向转运蛋白主要分布于液泡膜上,负责Na~+跨膜运输,是植物抵御盐胁迫的主要方式之一。在干旱胁迫的环境下,植物通常会在生理、生化代谢途径上发生改变。当植物耗水量大于吸水量时,植物体内就会出现水分亏缺现象,导致细胞生理干旱。脯氨酸通常以游离状态广泛存在与植物体中,一般游离状态的脯氨酸含量很低,当在胁迫条件下脯氨酸的含量就会增加,从而提高对胁迫的抗性。本研究首次从新疆野生黄花苜蓿(Medicago falcata L.)中克隆得到Na~+/H~+逆向转运蛋白基因MfNHX和脯氨酸合成酶基因MfP5CS,MfNHX基因cDNA全长为1626 bp,编码541个氨基酸,Genbank登录号为GU265772;MfP5CS基因cDNA全长2148 bp,编码715个氨基酸,Genbank登录号为GU180149,并且MfNHX和MfP5CS两个基因与同属的紫花苜蓿和新牧一号杂花苜蓿的同源性都很高。生物信息学分析结果表明,黄花苜蓿Na~+/H~+逆向转运蛋白属于跨膜运输蛋白,而黄花苜蓿脯氨酸合成酶不是跨膜蛋白,可能是一种细胞质蛋白。本研究通过农杆菌介导法将新牧一号杂花苜蓿的xmNHX基因和xmP5CS基因转入烟草,获得卡那霉素抗性的转基因植株。利用PCR及PCR-Southern杂交检测转基因烟草T0代植株,均证明外源xmNHX基因和xmP5CS基因已整合到烟草基因组中并正常转录。试验证明,xmNHX基因和xmP5CS基因都能在逆境胁迫下发挥作用,转基因烟草T1代具有一定的抗逆性。在逆境胁迫下,转基因烟草T1代的长势明显好于对照,且xmNHX基因在耐盐方面能够发挥较大的作用,xmP5CS基因则在抗旱方面发挥较大的作用。
【学位授予单位】:新疆农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q943.2;S541.9;S572

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王冬梅;王明;李翠萍;苏承刚;张兴国;姚永宏;;AtICE1和AtCBF1~3基因表达载体的构建与转化烟草研究[J];西南农业学报;2011年03期
2 张帆;常李伟;丁明全;侯佩臣;沈昕;陈少良;;胡杨果糖-1,6-二磷酸醛羧酶基因PeALD的克隆及耐盐性分析[J];基因组学与应用生物学;2011年03期
3 匡文华;张晓茹;成鹰;杜丽;张冬琳;郝永昌;雷明;焦寒伟;刘涛;祁超;王凤阳;;水牛TLR4 cDNA全长的克隆及其生物信息学分析[J];中国畜牧兽医;2011年07期
4 张雨良;熊国如;王健华;张树珍;官梅花;杨文君;刘志昕;;甘蔗黄叶病毒CP蛋白基因ihpRNA表达载体构建及烟草转化[J];植物研究;2011年05期
5 李安明;李德华;邓青云;汪宜宇;;长喙田菁植物螯合肽合成酶基因在烟草中的表达[J];西北植物学报;2011年08期
6 杨大伟;周焘;张锐;罗淑萍;郭三堆;;外源基因在烟草绿色组织中的高效表达研究[J];生物技术通报;2011年06期
7 唐丽霞;;发光的“魔树”[J];青苹果;2009年10期
8 王志新;赵琳;李文滨;;植物诱导型启动子的研究进展[J];大豆科技;2011年03期
9 孙鹏年;李周洲;杜振林;刘智峰;;植物基因工程在环境保护中的应用[J];现代园艺;2011年13期
10 谭家学;;基因工程重难点精析[J];高中生学习(高二版);2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王振东;王艳红;房德纯;上田一郎;;弱毒番茄系TMV-L_(11)A全长cDNA在转基因烟草中的表达[A];“植物保护21世纪展望”——植物保护21世纪展望暨第三届全国青年植物保护科技工作者学术研讨会文集[C];1998年
2 程汉良;姬南京;彭永兴;申欣;吴陈晨;许建和;董志国;;草鱼乙酰辅酶A羧化酶基因全长cDNA克隆[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
3 李西雷;汪桂玲;李家乐;;三角帆蚌GPX基因cDNA全序列克隆及其结构特征[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];2009年
4 李西雷;汪桂玲;李家乐;袁一鸣;;三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其编码蛋白的结构分析[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
5 ;Constructing cDNA Microarray to Isolate Novel Differentially Expressed Genes Related to Human Glioma and Characterizations of Novel Full-length Gene PPIL-3[A];中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会第八届学术会议论文集[C];2011年
6 刘丹丹;李建梅;韩宏晓;王尚尚;曹李琴;许金俊;陶建平;;巨型艾美耳球虫免疫原性相异株间差异表达基因消减cDNA文库的构建与分析[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
7 兰欢;卜友泉;崔涛;汪长东;易发平;刘革力;宋方洲;;肿瘤相关新基因PRR11的全长cDNA克隆及其功能初步解析[A];重庆市生物化学与分子生物学学术会议论文摘要汇编[C];2009年
8 裴宗飞;张文娟;牛钟相;;鸭补体C3d基因cDNA的克隆及鉴定[A];山东畜牧兽医学会禽病学专业委员会第一次学术研讨会论文集[C];2009年
9 郝丽;李和平;严历;;东北梅花鹿鹿茸尖端组织全长cDNA文库的构建[A];2010中国鹿业进展[C];2010年
10 熊梅;穆亚芳;刘家森;原东伟;郭东春;姜骞;林欢;曲连东;;兔肝cDNA文库的构建[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 编译 时焦;转基因烟草可消除环境中的绿藻毒素[N];东方烟草报;2010年
2 ;转基因烟草“长出”狂犬病抗体[N];大众科技报;2003年
3 记者 栾海;大肠杆菌妙用[N];新华每日电讯;2002年
4 ;我国培育出耐盐转基因烟草[N];今日信息报;2004年
5 记者 顾钢;转基因烟草可制抗艾滋病药物[N];科技日报;2009年
6 记者陈超;日公开烟草cDNA盐基测序成果[N];科技日报;2003年
7 袁爱华;转基因植物:为大地疗伤[N];河北日报;2003年
8 陆志城;你方唱罢我登场[N];医药经济报;2002年
9 洪海洋;生物技术的浪潮[N];福建科技报;2000年
10 余志平 译;破译癌症的“黑匣子”[N];医药经济报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 覃川杰;瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)脂肪代谢相关基因cDNA的克隆及表达分析[D];华东师范大学;2010年
2 慎小晶;蝶蛹金小蜂cDNA文库抗菌肽基因筛选及表达研究[D];浙江大学;2010年
3 姜争;基于cDNA微阵列技术Ⅱ、Ⅲ期肠癌转移相关基因的筛选、鉴定及应用研究[D];复旦大学;2010年
4 徐庆刚;大熊猫Leptin、Ghrelin和IL-15基因的克隆表达及胃和脾脏cDNA文库的构建[D];浙江大学;2009年
5 李锋;转录组学、蛋白质组学研究海州香薷Cu吸收与耐性分子机理及其cDNA文库的构建[D];浙江大学;2009年
6 邓清超;具有高传播能力的栗疫菌低毒力病毒CHV1-CN280的基因组序列测定与可侵染性全长cDNA克隆构建[D];南京农业大学;2009年
7 方强;间日疟原虫全长cDNA文库的构建与PvGDH的克隆表达、表位鉴定及单抗研究[D];苏州大学;2010年
8 葛荣朝;小麦耐盐相关基因cDNA的克隆与功能研究[D];河北师范大学;2005年
9 刘媛;三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)cDNA文库构建、EST分析及抗脂多糖因子研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
10 许亮;应用cDNA阵列技术对肝细胞肝癌基因表达谱的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曾光;苜蓿抗逆基因的cDNA克隆和转基因烟草功能的初步验证[D];新疆农业大学;2010年
2 郝言明;柔嫩艾美耳球虫两个抗药株消减cDNA文库的序列分析[D];福建农林大学;2010年
3 王锦玲;龙眼叶片黄酮类化合物合成关键酶基因和DHAR基因cDNA全长的克隆[D];福建农林大学;2011年
4 邓效禹;籽鹅垂体组织全长cDNA文库的构建及部分克隆序列分析[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
5 李付美;莱芜猪心脏组织cDNA文库的构建及部分表达序列标签的分析[D];曲阜师范大学;2010年
6 杜雯林;苹果褐斑病菌钙调素基因的cDNA克隆以及序列分析[D];西北农林科技大学;2010年
7 战晴晴;柴胡全长cDNA文库和遗传图谱的构建及蚕豆病毒属病毒的鉴定[D];东北林业大学;2010年
8 高艳平;蓖麻成熟期胚抑制消减cDNA文库构建及其差异表达基因分析[D];华中农业大学;2009年
9 黄伟;大黄鱼肌肉组织cDNA文库的构建及EST序列分析[D];宁波大学;2009年
10 王金萍;枳根全长cDNA文库的构建及生物信息学研究[D];西南大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026