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鸡传染性支气管炎病毒新疆分离株S1基因分子克隆及其重组鸡痘病毒表达载体的构建

王玮  
【摘要】: 为研究新疆IBV的分子流行病学的背景及遗传背景,发展有效地 新型的疫苗,我们从新疆乌鲁木齐市爆发传染性支管炎的鸡群中分 离出一株病毒,通过电镜观察、动物回归实验及血凝特性研究等实验 确定为鸡传染性支气管炎病毒(IBV-XJ_3)。用RT-PCR扩增出了 IBV-XJ_3的免疫原基因S1,将其克隆到pUC19载体中,经蓝白斑筛选、 酶切鉴定、PCR鉴定筛选出重组阳性质粒。经测序后,用软件 GENERUNNER、CLUSTAL X及TREEVIEW,与GENEBANK 中选出的IBV的8株国外参考株,5株国内分离株的序列进行遗传 变异分析发现:IBV-XJ_3与8株国外参考株的同源性均小于80%, 与国内株JX/99/01的同源性达87%,与国内疫苗株QX同源性达 96%,与其他国内分离株同源性均小于80%,证实IBV-XJ_3为不同 于国外参考株的变异株。在此基础上,我们构建了IBV-XJ_3S1基因 的鸡痘病毒表达载体,为今后基因工程疫苗的研制打下了基础。


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