渗透胁迫下白花柽柳抑制性消减文库的构建及表达序列标签（EST）分析

【摘要】：为了研究渗透胁迫下白花柽柳基因的表达调控,本试验构建了PEG6000 渗透胁迫下白花柽柳的抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization SSH)文库,并对表达序列标签(expressed sequence tag EST)进行了分析研究。 蓝白斑检验结果表明,SSH 文库重组率为95%,PCR 检测表明插入片段的平均长度500bp 左右。随机挑选文库中的克隆进行测序,共获得290 条序列。其中141 个为读序较好的序列,有100 个与已知功能的基因序列相似,41 个与未知功能的基因相似。 对与耐旱相关基因EST 分析结果表明,将100 个独立已知功能基因的EST,按功能分为14 个类,其中转录因子、蛋白合成及信号转导表达丰度最高,分别为9.655%、4.482%和3.44%。这说明这三种过程在柽柳渗透胁迫时起到了重要作用。蛋白代谢、新陈代谢、应激蛋白、跨膜转运和离子平衡及光合作用所包含的表达基因比较多,并且这些基因的表达丰度也较高,分别为3.103%、2.758%、2.758%、1.724%和1.724%,这说明这五种过程在渗透胁迫时也起到了重要作用。此外,渗调物质合成、活性氧清除剂和细胞壁合成类所包含的表达基因种类相对较少,其表达丰度分别为1.379%、1.034%和1.304%。 以上研究说明,柽柳的抗旱过程是一个复杂的多基因协同作用体系,涉及到防御反应、基因调控、信号传导、离子转运、活性氧清除、渗透调节、应激反应等多方面的综合作用,从而为系统阐明柽柳抗旱分子机理研究奠定坚实基础。

【关键词】：白花柽柳 渗透胁迫 抑制性消减文库(SSH) 表达序列标签(EST)
【学位授予单位】：新疆农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：S793.5
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