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《石河子大学》 2011年
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铜绿假单胞菌KatA和KatB基因在烟草中的表达与抗逆分析

喻娜  
【摘要】:过氧化氢酶(EC1.11.1.6)是生物体内主要的抗氧化酶之一,广泛存在于动物,植物和微生物中。过氧化氢酶的生理功能是催化细胞内过氧化氢的分解,起着重要的抗逆的作用;利用已克隆的铜绿假单胞菌(P.Aeruginosa) KatA、SP-KatA、KatB基因,以NC89烟草(N.tabacum)为材料,通过农杆菌介导法获得相应的转基因植株;利用PCR和]RT-PCR对转化烟草进行鉴定,半定量RT-PCR进行表达分析;通过水分胁迫、盐胁迫、过氧化氢胁迫、低温胁迫进行抗逆性分析。通过对KatA烟草植株和SP-KatA烟草植株进行比较。结果表明:与对照相比,KatA烟草植株在水分因胁迫第9d,200mmol/L的Nacl胁迫第9d和0.3 mm/1 H2O2胁迫第23 d,转KatA基因烟草的相对含水量、伤害率、MAD、PSII相对量子产率各种生理指标都显著优于野生型烟草,转KatA基因烟草表现出了一定的抗逆性。 与野生型烟草植株相比,SP-KatA烟草植株在水分胁迫第13d,200 mmol/L的Nacl胁迫第19d和0.3 mm/1 H2O2胁迫第27 d,转SP-KatA基因烟草的相对含水量、伤害率、MAD、PSII相对量子产率各种生理指标都显著优于对照烟草和KatA烟草植株,转SP-KatA基因烟草表现出了较强的抗逆性。 与野生型烟草相比,KatB烟草植株在水分胁迫第13d,200 mmol/L的Nacl胁迫第20 d和0.3 mm/1 H2O2胁迫第33 d,转KatB基因烟草的相对含水量、伤害率、MAD、PSII相对量子产率各种生理指标都显著优于野生型烟草,转KatB基因烟草表现出了较强的抗逆性。说明KatB基因在抗逆基因工程方面具有较好的应用前景。 同时,获得8株转KatA基因番茄苗,2株转SP-KatA番茄苗。在同样条件下,转基因番茄与对照组番茄的生长发育状况没有明显的差异。
【学位授予单位】:石河子大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S572

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