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《石河子大学》 2019年
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寒冷应激对阿勒泰羔羊及杂交种脂质能量代谢通路及免疫功能的影响

高静雯  
【摘要】:正文:冷刺激有损动物的健康和福利,继而给畜牧业带来经济损失,新疆阿勒泰地区冬季严寒且积雪时间长,更是给绵羊养殖带来了很大的困难。目的:为了探究寒冷刺激对阿勒泰羔羊和阿勒泰与萨福克杂交种羔羊机体脂质能量代谢和免疫功能等方面的影响,同时比较研究杂交羊尾部脂肪大量减少后,其抗寒能力的变化,给绵羊抗寒育种工作提供理论依据,开展以下几方面研究:方法:本试验以4月龄的阿勒泰及杂交种公羔为研究对象,选择-20℃~-10℃和-30℃~-20℃为试验条件,分时间段对羔羊进行冷刺激,构建羔羊冷应激模型;采集羔羊样品,通过免疫组化确定TH的分布;ELISA测定血清中激素、IgG和Cortisol含量变化,抗氧化因子的含量;扩增ADRB3、UCP1、HSL基因并测序,分析其与不同物种的同源性,并通过qPCR和Western Blot法测定羔羊不同组织中3种基因转录和翻译水平的变化;用HE和甲苯胺蓝染色,观察羔羊小肠显微结构的变化及其杯状细胞、上皮淋巴细胞和肥大细胞的数量变化;应用qPCR法测定羔羊外周血白细胞和脾脏细胞因子mRNA的表达量变化,观察羔羊免疫功能。结果:1.羔羊小脑和下丘脑室旁核均有TH阳性细胞和纤维分布,且冷应激后阳性表达增加;冷应激后E含量呈上升趋势;阿勒泰羔羊NE含量先上升后下降,而杂交种羔羊NE含量持续上升;羔羊GC含量在弱冷应激后先下降后上升,强冷应激后则先升高后降低;阿勒泰羔羊INS含量先下降后上升,杂交种羔羊相反;羔羊LEP含量均先下降后上升。冷应激后羔羊血清中SOD含量先增加后减少,MDA含量先上升后下降,且高于常温组,GSH-PX的含量波动但呈下降趋势,GR含量增强后减弱;2.ADRB3、UCP1和HSL基因与已有绵羊序列同源性均高于99%;冷刺激后各组织中UCP1和HSL的mRNA及蛋白表达呈动态变化,较常温组有所增加,ADRB3基因mRNA在肩胛间脂肪中表达量低于常温组,在下丘脑中表达量在强、弱冷刺激后不同。3.冷应激后羔羊血清中IgG的含量低于常温组,而皮质醇含量高于常温组,皆有略微波动;观察羔羊小肠的显微结构发现强度、长时间冷刺激后小肠绒毛明显缩短变粗,且小肠中杯状细胞和肥大细胞数量增多,上皮淋巴细胞数量减少;同时,冷应激后外周血白细胞和脾脏中IL-2、IL-4、IL-10、IL-12和IFN-β的mRNA表达量不同时间段较为浮动,但总体高于常温组。结论:综上所述,随着冷刺激时间和强度的增加,会对羔羊造成一定的损伤;同时,杂交后羔羊尾脂沉积变少,可能会对其冷应激时的产热能力、抗氧化能力及免疫功能有一定影响,但并不会使其丧失。说明阿勒泰羔羊内环境较为稳定,但冷应激后可能仍需动态调节相关基因的表达,不断调整能量代谢,去适应温度的变化。该研究结果为新疆绵羊抗寒育种工作奠定一定的理论基础。
【学位授予单位】:石河子大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:S826

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