收藏本站
《石河子大学》 2019年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

NYD-SP27基因对绵羊精液品质及精子信号通路的影响

陈云蕾  
【摘要】:哺乳动物精子生成的过程主要是睾丸生殖细胞经分化过程后形成精原细胞,再通过一系列复杂的生物学变化,最终分化成成熟精子。精子形成过程中受各种因子和细胞间相互作用的调节,其中包括染色体结构变化,一些内源的调节因子和基因的一系列复杂的程序性表达调控。睾丸发育特异性蛋白-27基因(Testis development specific protein gene 27,NYD-SP27)作为磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)的抑制剂,是精子形成的调节剂,对精子的产生具有重要的调控作用。[目的]本研究主要目的是将NYD-SP27基因的上调和下调载体质粒通过睾丸注射后,探究它对绵羊精子活率、畸形率、血清中生殖激素水平以及精子cAMP信号通路中关键酶的表达量等方面的影响,以揭示NYD-SP27基因在精子形成过程中分子机制提供科学依据。[方法](1)本研究以Genbank中的绵羊NYD-SP27基因序列为基础设计引物,克隆羊NYD-SP27基因,将基因连接到真核载体pmcherry-n1中;载体的红色荧光蛋白和目的基因通过猪捷申病毒2 A肽(P2A)连接以实现共表达;(2)将NYD-SP27基因的上调和下调载体质粒通过睾丸注射后,电刺激采精,检测NYD-SP27基因对绵羊精子活率和畸形率的影响;并制作冻精,解冻后检测NYD-SP27基因对精子中肌动蛋白和肌球蛋白的影响;(3)通过ELISA方法检测NYD-SP27基因对精子内cAMP信号通路中相关酶的表达量的影响;(4)将NYD-SP27基因的上调和下调载体质粒通过绵羊睾丸注射后,采集血液,检测血清中生殖激素水平。[结果](1)成功构建了pmcherry-Flag-NYDSP-P2A真核表达重组载体;(2)对照组与FNP组(NYD-SP27基因的上调)精子活率差异不显著(P0.05),对照组与Sh组(NYD-SP27基因的下调)却差异显著(P0.05);对照组与试验组(FNP组和Sh组)精子畸形率差异均不显著(P0.05);对照组与FNP组绵羊精子中肌动蛋白表达量差异不显著(P0.05),对照组与Sh组却差异极显著(P0.01);对照组与试验组精子中肌球蛋白的表达量差异均极显著(P0.01);(3)对照组与Sh组绵羊精子中环磷酸腺苷酸的表达量差异显著(P0.05),对照组与FNP组却差异极显著(P0.01);对照组与Sh组绵羊精子中蛋白激酶的表达量差异不显著(P0.05),对照组与FNP组却差异显著(P0.05);(4)NYD-SP27基因下调(Sh组)对绵羊睾酮水平的分泌具有促进作用。[结论](1)在NYD-SP27基因表达蛋白和红色荧光蛋白翻译过程中猪捷申病毒2A肽片段起到了剪切作用;(2)NYD-SP27基因下调不仅对可以促进绵羊精子活率的提高,并对精子中肌动蛋白亦产生调控作用;(3)NYD-SP27基因下调对精子cAMP信号通路中起关键作用的环磷酸腺苷酸和蛋白激酶的表达产生调控作用;(4)NYD-SP27基因下调对绵羊睾酮水平的分泌产生调节作用。
【学位授予单位】:石河子大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:S826

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨万喜;十足类甲壳动物精子发生过程中细胞器变化及作用研究进展[J];东海海洋;1998年04期
2 胡欧明,钟金城,蔡立,陈智华,江明峰,王正明;犏牛精子发生水平的研究[J];西南民族学院学报(自然科学版);1999年01期
3 孙雪敏;精子特异酶在生殖毒理研究中的应用[J];职业医学;1988年04期
4 周继铭,苏芹;杀精子外用避孕中草药的研究[J];中成药;1988年11期
5 美甘和哉 ,上口勇次郎 ,梅谊;人精子的染色体研究——Ⅱ.自然发生及放射线诱发的精子染色体异常[J];国外医学.遗传学分册;1988年01期
6 钱义;吸烟对精子的影响[J];生殖与避孕;1988年01期
7 林加涵;汪德耀;陈细法;倪子绵;;文昌鱼精子发生过程中高尔基体和线粒体的演变规律电镜观察[J];电子显微学报;1988年03期
8 许孝仪;;有害因素对动物生殖系统的影响[J];上海实验动物科学;1988年01期
9 高惠宝;江鱼;;干扰附睾功能进行男性节育可能性的研究[J];男性学杂志;1988年01期
10 Alexander NJ;Anderson DJ;古伟文;;精液免疫[J];国外医学(计划生育分册);1988年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 桂耀庭;唐爱发;余振东;张立兵;张键荣;李贤新;蔡志明;;精子发生相关基因的筛选和功能研究[A];中国生理学会2007年消化内分泌生殖学术研讨会论文摘要汇编[C];2007年
2 桂耀庭;唐爱发;余振东;郭新;龙云;李贤新;周锦堂;朱辉;叶炯贤;蔡志明;;精子发生相关基因的筛选与鉴定[A];中华医学会第八次全国男科学学术会议论文集[C];2007年
3 桂耀庭;唐爱发;余振东;张立兵;张键荣;李贤新;蔡志明;;精子发生相关基因的筛选和功能研究[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
4 王晖;周作民;徐珉;李建民;沙家豪;;人精子中精子发生相关基因谱系的构建及初步临床应用[A];江苏省遗传学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
5 王晖;徐珉;李建民;肖俊华;许志洋;周作民;沙家豪;;人精子发生相关基因精子表达谱系的建立及初步临床应用[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年
6 贾孟春;;精子发生及其激素调节[A];第二届全国不育症研讨会论文汇编[C];2007年
7 郑梅梅;祝辉;;RNA结合蛋白Tulp2在精子发生中的作用和机制研究[A];中国生理学会生殖科学专业委员会—中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会暨“生殖科学专业委员会第二次学术交流会”和“生殖生物学分会第十六次学术年会”论文集[C];2017年
8 祝辉;周作民;林敏;周亚东;王黎熔;李建民;沙家豪;;人精子发生相关基因NYD-SP6的功能研究[A];江苏省遗传学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
9 袁水桥;;精子发生过程中“无头”精子症的发病机理探讨[A];中国生理学会生殖科学专业委员会—中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会暨“生殖科学专业委员会第二次学术交流会”和“生殖生物学分会第十六次学术年会”论文集[C];2017年
10 陈小章;王琳芳;张永莲;石其贤;;生殖道上皮分泌对精子发生、成熟以及受精能力的调节[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 通讯员 张婷 蔡心轶 记者 程守勤;控制精子发育的“蛋白管家”被发现[N];健康报;2019年
2 ;妻子怀孕前丈夫应注意什么[N];中国医药报;2002年
3 付毅飞;给精子加个开关[N];科技日报;2003年
4 北京大学第三医院男科 唐文豪 姜辉;“小蝌蚪”达标记[N];健康报;2018年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐隆昌;RNF138在精子发生中的功能研究[D];北京协和医学院;2016年
2 吴帅帅;马驴高效扩繁技术研究及应用[D];中国农业大学;2019年
3 徐康;多倍体鲫鲤雄性育性机制研究[D];湖南师范大学;2015年
4 唐亮;CD82在非梗阻性无精症精子发生障碍中的机制研究[D];安徽医科大学;2018年
5 傅洋;乙型肝炎病毒HBx蛋白对人精子功能及胚胎发育影响的研究[D];广州医科大学;2018年
6 张清华;Ppplr36参与精子发生与自噬的研究[D];武汉大学;2016年
7 ASIF MEHFOOZ;芦丁和甲状腺素对束缚应激状态下成年小鼠睾丸精子发生的潜在保护作用研究[D];南京农业大学;2017年
8 刘腾飞;中华鳖(Pelodiscus sinensis)精子发生和精子储存的调控机制[D];南京农业大学;2017年
9 付骏;OY-TES-1的表达及其抗体对精子功能影响的研究[D];广西医科大学;2018年
10 张越;Pnldc1在小鼠精子发生过程中的功能研究[D];南京医科大学;2019年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈云蕾;NYD-SP27基因对绵羊精液品质及精子信号通路的影响[D];石河子大学;2019年
2 解于彬;睾丸特异性表达基因Dpep3对于雄性小鼠生育不是必需的[D];中国科学技术大学;2019年
3 吴琳;三种抗氧化剂对猪精子保存效果的研究[D];西北农林科技大学;2019年
4 李远发;Wip1基因在人精子中的表达及与精子浓度和活力之间的相关性研究[D];广西医科大学;2019年
5 赖云云;精子DNA完整性与辅助生殖技术结局的关联性研究[D];新疆医科大学;2019年
6 朱婉婉;牛精子发生过程中甲基化分析及干细胞向精子诱导分化的研究[D];中国农业科学院;2019年
7 来兄;TSSK6与IZUMO1和IZUMO4在绵羊精子上的共定位[D];内蒙古大学;2019年
8 姜珊;冷冻处理对牛、绵羊、山羊精子形态及受精能力的影响[D];内蒙古大学;2019年
9 申鑫;SPATA1与纤毛内转运蛋白IFT20的相互作用及其在精子发生中的表达和定位[D];武汉科技大学;2019年
10 李富东;左旋肉碱和果糖在重度弱精子症患者精子体外培养的作用研究[D];兰州大学;2019年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026