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《新疆医科大学》 2010年
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真菌松茸提取物在HBV转基因小鼠癌变中化学预防作用的初步评价

曹峻  
【摘要】:目的:在建立稳定的HBV转基因小鼠模型的基础上,应用真菌植物松茸提取物、α-干扰素化学性预防治疗HBV转基因小鼠,初步评价真菌植物松茸提取物与α-干扰素预防HBV转基因小鼠肝脏癌变作用的效果,研究真菌植物松茸提取物等药物可能的对HBV转基因小鼠组织、生化、免疫等方面的影响,进一步说明上述药物抑制HBV转基因小鼠肝脏癌变的作用机制。方法:按照标准随机选择56只HBV转基因小鼠C57BL/6J-TgN,随机分为真菌松茸提取物(AMH)组、α-干扰素(INF-α)组、α-干扰素联合AMH组、阴性对照组。每组14只,根据不同的给药方式预防性治疗12个月,其中,第11月经眼球内眦静脉取血1次,测血清AST。第12月末,每只小鼠称取体重,经摘眼球取血处死动物,待测血清标本。采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10);切除小鼠肝脏,称取肝脏的重量,观察肝脏的形态及有无异常结节性改变,并观察肺、脾、肾和淋巴结有无肿瘤及转移灶,一部分肝脏组织保存于10%福尔马林溶液中,另一部分肝脏组织立即放入冻存管中保存于液态氮中存储。制作标本蜡块和病理切片,光镜下观察不同组肝组织结构变化,包括非癌变组织和癌变组织的变化。确定每组小鼠中发生肝组织癌变的具体数量,计算不同组中转基因小鼠肝组织癌变的百分数。肝组织做成切片进行免疫组化检查,显微镜下观察乙肝表面抗原(HBsAg)、转化生长因子β1(TGF-β1)、转化生长因子β1受体Ⅱ(TβRⅡ)、磷酸化Smad2/3 (P-Smad2/3)、Smad4、Smad7在肝脏组织中的表达。以出现棕黄色为阳性,进行结果分析。选取液态氮中存储的肝脏组织,行实时荧光定量PCR检测(Real-time fluorescent quantitative PCR, RT-PCR)结果:1)肝脏组织形态改变:大体形态肝脏增大、肿胀,肝脏肿瘤结节为灰白色的单个或多个结节。光镜下可见:肝细胞弥漫性肿胀,细胞胞质伊红均染(毛玻璃样变),核内可见嗜酸性小体,肝细胞坏死,伴淋巴细胞浸润,散在单个肝细胞质固缩深染伴核固缩深染。肿瘤内可见明显异常核分裂像,癌细胞向肝组织周围浸润。AMH组预防性用药后,上述表现程度上稍轻,癌变发生的百分数稍低,但不能完全防止全部转基因小鼠肝脏炎性改变及癌变的发生;2)血清学指标:经治疗干预后,AMH组(294±51)、α-干扰素组(231±59)和α-干扰素联合AMH组(215±64)的AST值均低于阴性对照组(322±45)(P0.05)。α-干扰素组、α-干扰素联合AMH组AST值分别低于AMH组(P0.05)。而α-干扰素组和α-干扰素联合AMH组比较,AST值差别无统计学意义(P0.05);α-干扰素加AMH组(58.43±14.42)、AMH组(25.37±8.36)、α-干扰素组(35.84±12.36)与阴性对照组(15.75±8.45)相比,血清IL-2有增高(P0.05);α-干扰素加AMH组与AMH组和α-干扰素组相比IL-2升高(P0.05);a-干扰素加AMH组(12.03±6.54)与阴性对照组(45.97±14.03)、AMH组(21.58±11.20)、α-干扰素组(18.74±9.36)相比,血清TNF-α有明显降低(P0.01);α-干扰素加AMH组(160.25±70.03)、AMH组(289.58±110.20)、α-干扰素组(240.69±95.36)与阴性对照组相比(375.03±120.48),血清IL-10值降低(P0.05);α-干扰素加AMH组与AMH组、α-干扰素组相比,血清IL-10值也有降低(P0.05);α-干扰素加AMH组中血清AST的水平与血清TNF-α水平呈负相关(F值6.529,P0.05);3)免疫组化与RT-PCR指标:经治疗干预后,AMH组(4.92±1.20)、α-干扰素组(4.57±1.09)和α-干扰素联合AMH组(2.86±0.94)肝组织中的TGF-β1的表达均低于阴性对照组(6.53±1.78)(P0.05)。联合AMH组分别与AMH组、α-干扰素组比较,肝组织中TGF-β表达的变化均有统计学意义(P0.05);经治疗后,AMH组(3.51±1.78)、α-干扰素组(4.63±1.44)和α-干扰素联合AMH组(5.72±1.55)肝组织中Smad4的表达均高于阴性对照组(3.06±0.87)(P0.05)。α-干扰素联合AMH组肝组织中Smad4的表达高于AMH组有统计学意义(P0.05);经治疗干预后,AMH组、α-干扰素组和α-干扰素联合AMH组肝组织中P-Smad2/3的表达均高于阴性对照组(P0.05)。α-干扰素联合AMH组肝组织中Smad4的表达分别高于AMH组、α-干扰素组有统计学意义(P0.05);经治疗干预后,AMH组(4.10±0.75)、α-干扰素组(4.57±0.93)和α-干扰素联合AMH组(5.38±1.25)肝组织中TβRⅡ的表达均明显高于阴性对照组(3.36±0.62)(P0.01);经治疗后,AMH组、α-干扰素组和α-干扰素联合AMH组肝组织中P-Smad2/3的表达均低于阴性对照组(P0.05)。阴性对照组(5.38±2.21)、AMH组(5.19±1.91)、α-干扰素组(4.86±1.82)肝组织中Smad7的表达均高于α-干扰素联合AMH组(2.17±1.64)(P0.05)。α-干扰素联合AMH组肝组织中TGF-β1mRNA的表达低于阴性对照组(P0.05)。α-干扰素联合AMH组肝组织中TβRⅡmRNA的表达高于阴性对照组(P0.05)。AMH组、α-干扰素组和α-干扰素联合AMH组肝组织中Smad2mRNA的表达均高于阴性对照组(P0.05)。结论:1)HBV转基因C57BL/6J-TgN小鼠可以从HBV慢性感染状态发展到肝癌形成的过程,可以部分模拟人类的该病转归;2)应用HBV转基因C57BL/6J-TgN小鼠观察不同药物化学预防性治疗后,AMH可以明显改善肝脏功能,降低血清转氨酶水平,减缓癌变的发生;3)AMH可以诱导HBV转基因小鼠Thl类细胞因子作用增强,Th2类细胞因子作用降低,抑制恶性肿瘤的生成;4)AMH可能通过影响TGF-β/Smad信号通路的传导,降低肝癌的发生;5)AMH和α-干扰素的联用在预防肝癌发生中效果可能更强。
【学位授予单位】:新疆医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R285.5

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 贺小琼,陈彦红,熊祥玲;真菌植物松茸提取物体外抑制卷烟焦油致突变作用[J];癌变.畸变.突变;2004年01期
2 贺小琼;普苹;邓艳;段生朝;;真菌植物提取物AMH抑制苯并[a]芘诱发小鼠肿瘤作用[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
3 贺小琼;陈彦红;吴双凤;;10种常用染发剂的致突变作用研究[J];昆明医学院学报;2005年04期
4 宋雅芳,洪嘉禾,徐列明;TGF-β1的ERK通路及其抑制剂与纤维化[J];临床肝胆病杂志;2005年02期
5 崔玉;詹林盛;;乙型肝炎病毒动物模型研究进展[J];生物技术通讯;2007年02期
6 倪正平;张启南;陆建华;黄飞;;慢性乙肝患者补硒后HBV血清标志物动态变化10年追踪[J];微量元素与健康研究;2007年06期
7 和水祥,苌新明,李红霞,刘恩岐,李长顺;补硒治疗慢性肝病患者PBMC功能紊乱的临床价值[J];西安交通大学学报(医学版);2003年06期
8 喻松仁;程绍民;周步高;高书亮;邹富有;;葛根总黄酮对大鼠慢性肝损伤的保护作用[J];江西中医学院学报;2010年01期
9 孙玲;李俊;黄成;代坤坤;凡晓燕;;豹皮樟总黄酮血清对TGF-β_1干预的大鼠肝星状细胞的作用及部分机制[J];安徽医科大学学报;2010年03期
10 和付林;王力;张晓坤;曾锦章;;大黄素诱导癌细胞凋亡和抑制视黄醇X受体的转录激活功能[J];药学学报;2008年04期
【共引文献】
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1 贺小琼;普苹;邓艳;段生朝;;真菌植物提取物AMH抑制苯并[a]芘诱发小鼠肿瘤作用[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
2 贺小琼;李凝诗;李凤;赵燕;武金聪;朱启应;原茵;;真菌提取物AMH的肿瘤化学预防活性组分追踪[J];癌变·畸变·突变;2011年03期
3 吴潇;王毅;马永凯;季秀玲;杨琳琳;魏云林;;卷烟焦油危害研究进展[J];安徽农业科学;2011年05期
4 杨勇;孟翔凌;;FHIT及DCP4的表达与胃癌进展及淋巴转移的关系[J];安徽医药;2011年02期
5 谭秦莉;刘冬;李玉宝;彭代银;;总黄酮化合物药理作用研究进展[J];安徽中医学院学报;2009年03期
6 ;Hepatitis B virus X protein regulates the mEZH2 promoter via the E2F1-binding site in AML12 cells[J];癌症;2011年04期
7 郭燕菊;王文;孙世惠;曾道炳;赵光宇;于虹;郭彦;谭文杰;卢实春;周育森;;免疫抑制剂地塞米松可明显延长乙型肝炎病毒抗原在水动力法转染HBV小鼠模型中的表达[J];病毒学报;2010年01期
8 王果兵;熊光明;罗小平;;30例肝癌合并脾功能亢进超选择性肿瘤动脉栓塞联合部分性脾动脉栓塞治疗报道[J];重庆医学;2008年03期
9 李青;;姬松茸化学成分及药理作用研究现状[J];重庆中草药研究;2007年01期
10 王选举;黄正明;宋建国;;乙型肝炎病毒感染模型的研究进展[J];传染病信息;2009年03期
中国重要会议论文全文数据库 前6条
1 黄国付;杨金梅;;不同针灸方法治疗带状疱疹的循证医学研究及Meta分析[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
2 杨兆弘;;染发剂安全性及其监管议析[A];公共安全中的化学问题研究进展(第二卷)[C];2011年
3 沈丰;袁烨;孙英豪;蔡炜;于志坚;金宝翠;;双栓塞治疗原发性肝癌合并脾功能亢进82例临床观察[A];第一届中国肿瘤微创治疗研讨会暨中国抗癌协会肿瘤微创治疗专业委员会成立大会论文集[C];2005年
4 危北海;;循证医学与中医药学治疗病毒性肝炎的研究[A];2002全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2002年
5 危北海;;循证医学在中西医结合治疗病毒性肝炎研究中的意义[A];第十三次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2004年
6 刘晶晶;张贵君;高晓美;;大黄药材药理作用研究概况[A];中国商品学会第十五届学术论坛论文集[C];2013年
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1 朱小康;大黄素衍生物的合成与生物活性研究[D];西南大学;2011年
2 杨富;慢性乙型肝炎相关肝癌发生、发展过程中的表观遗传学机制研究[D];第二军医大学;2011年
3 张海英;硒处理对桃、枣和草莓生理指标影响的研究[D];北京林业大学;2011年
4 郭敏;化浊解毒中药血清及补骨脂素对肝星状细胞生物活性的影响[D];河北医科大学;2011年
5 高姗;上海市区原发性肝癌的流行病学研究[D];复旦大学;2011年
6 王刚;microRNA-122调控的自杀基因治疗肝癌的研究[D];中国疾病预防控制中心;2011年
7 么焕开;刺楸和独正刚化学成分的研究[D];天津大学;2010年
8 史华新;加味补肝散含药血清对肝细胞损伤线粒体能量代谢的影响[D];湖北中医药大学;2011年
9 关爽;红景天苷的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控[D];吉林大学;2011年
10 王月香;超声造影在脾大脾亢微波定量消融中的应用及治疗对脾亢、脾脏免疫功能的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
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1 黄晓丹;人肝细胞肝癌组织中Smad4、Fascin、Cortactin蛋白的表达及其对临床预后判断价值的研究[D];南京医科大学;2010年
2 路朋;丝毛飞廉种子中总黄酮的提取及对肝损伤保护作用的研究[D];青海师范大学;2010年
3 杨勇;FHIT及DCP4在胃癌中的表达及其临床意义[D];安徽医科大学;2010年
4 朱小宝;结直肠癌组织中Smad4、MMP-9的表达及对微血管生成和肿瘤转移的影响[D];桂林医学院;2010年
5 蔡静;飞天蜈蚣七多糖提取纯化工艺、结构及抗氧化性研究[D];西北大学;2011年
6 卢小玲;ERCC1蛋白在慢性乙型肝炎组织及乙肝后肝硬化组织中的表达及其临床意义[D];广西医科大学;2011年
7 赵亚男;淋巴瘤合并HBV感染的临床研究[D];吉林大学;2011年
8 李冰;小剂量聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林抗病毒治疗失代偿期丙型肝炎肝硬化的疗效探讨[D];吉林大学;2011年
9 张敬敬;输血相关病原体灭活及检测技术的研究[D];华东师范大学;2011年
10 刘辉;生姜醇提物对HepA荷瘤小鼠的保护作用[D];兰州大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈冠敏,林升清,黄宗锈,陈纫雄,何玲,姜瑞钗;香菇多糖胶囊抗突变作用的实验研究[J];癌变.畸变.突变;2000年02期
2 杨胜利,韩绍印,张巧,宋爱云,丁兰萍,宫亚欧,张覃沐;冬凌草甲素抗突变性研究[J];癌变.畸变.突变;2001年01期
3 项华,赵健忠,柏林;海藻多糖的抗突变性研究[J];癌变.畸变.突变;2001年01期
4 夏勇,徐彩菊,傅剑云,郑云燕;仙华胶囊抗突变作用的研究[J];癌变.畸变.突变;2001年02期
5 贺小琼,陈彦红,熊祥玲;真菌植物松茸提取物体外抑制卷烟焦油致突变作用[J];癌变.畸变.突变;2004年01期
6 方向东;肝康灵与干扰素合用治疗慢性乙型肝炎疗效观察[J];浙江中医学院学报;1994年04期
7 陈红,刘友平;川牛膝多糖抗肿瘤作用初探[J];成都中医药大学学报;2001年01期
8 王宝恩;贾继东;尤红;;抗乙型肝炎病毒治疗的近况[J];传染病信息;2000年01期
9 赵亚玲,郝炳华;吸雪茄烟对男性心血管疾病、慢性阻塞性肺病及癌症危险的影响[J];国外医学(医学地理分册);2000年02期
10 蒋黎;人鼠嵌合肝:研究肝脏病学的新工具[J];国外医学(流行病学传染病学分册);2002年04期
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1 邱永祥,阮明,贾凤兰,邱飞婵,李雪婷,尚兰琴,张宝旭;秋水仙碱对小鼠肝脏的损伤作用[J];毒理学杂志;2005年02期
2 李文龙,程萱,谭晓红,张继帅,孙岩松,陈林,杨晓;血管内皮细胞特异表达Cre重组酶转基因小鼠的建立(英文)[J];遗传学报;2005年09期
3 王勇,刘勤,倪勇,魏泓,孙新民,赵永聚;通过双原核显微注射提高转基因小鼠研制效率的实验研究[J];中国实验动物学报;2005年03期
4 时令,王友亮,程萱,候宁,杨晓;表面活性蛋白A启动子指导Cre重组酶在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中表达[J];生物技术通讯;2005年05期
5 何迎春;田道法;卢芳国;毛积芳;;人突变型p53和EB病毒LMP1转基因小鼠的建立[J];第四军医大学学报;2006年01期
6 张雪光;陈香美;吕扬;洪权;田月;师锁柱;尹忠;蔡广研;;人TIMP-1转基因小鼠肾组织内外源基因功能表型的鉴定[J];解放军医学杂志;2006年03期
7 宋敏;唐军;李达兵;徐海伟;白云;;PS1/APP双转基因阿尔茨海默病模型传代小鼠的基因型鉴定及其组织学分析[J];第三军医大学学报;2006年14期
8 王芙蓉;姜永生;肖文伍;张苏明;袁慧;赵浩斌;郑新民;魏庆信;;人bcl-xL基因在转基因小鼠中的整合和表达[J];华中科技大学学报(医学版);2006年04期
9 曾林;孙岩松;杨晓;王冬平;胡仲明;胡成进;孙晓明;;流式细胞术分析p21~(HBsAg/HBsAg)转基因小鼠肝细胞凋亡[J];中国比较医学杂志;2006年09期
10 王晓建;杨旭;宋晓东;张禅那;刘继斌;邸冉;张连峰;惠汝太;;实时荧光定量PCR法检测转基因小鼠拷贝数[J];中国实验动物学报;2007年03期
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1 田金洲;时晶;张雷明;尹军祥;盛树力;任映;王蓬文;王蓉;;金思维提取物预防Aβ42淀粉样蛋白产生及其机制研究[A];中医药优秀论文选(下)[C];2009年
2 董婉维;郑志红;;小鼠睾丸特异基因Fank1基因敲减转基因小鼠模型的建立[A];第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)论文摘要汇编[C];2009年
3 李明明;吴丽颖;张宽;黄欣;熊雷;刘朝晖;朱玲玲;范明;;Luc-ODD转基因小鼠筛选稳定HIF-1α药物及其作用机制研究[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
4 吴丽娟;陈潇;但刚;龚扬彬;曾平;;锌指蛋白A20突变体转基因小鼠脓毒症肺损伤研究[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
5 张冬霞;许小媛;季正剑;邢华;;利用GFP转基因小鼠研究外源NSCs在受体脑内的存活与分化[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
6 黄伟;李超;李敖;薛存彪;杨涛;周平;;IκBαAN-Tg(H-2b)转基因小鼠的培育和鉴定[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
7 卢宇;于梅;程静;李洪波;李征月;刘庄;高建刚;袁慧军;;Smac/Diablo~(S41L)转基因小鼠的建立与鉴定[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
8 李明;严阿勇;姚慧;王宇;安晓荣;陈永福;苟克勉;;利用ICSI技术生产转基因小鼠[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年
9 郑振宇;许兰菊;李春丽;赵卫东;宋根娣;柴保国;;人白细胞介素-10基因在转基因小鼠中遗传和表达的稳定性研究[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
10 徐骏;张志愿;陈万涛;杨文君;王铸钢;王龙;王延安;;转基因小鼠血管瘤动物模型建立[A];2004年口腔颌面肿瘤基础研究学术研讨会会议日程及论文集[C];2004年
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1 ;我国学者成功建立一套转基因小鼠系统[N];中国医药报;2002年
2 于明山;转基因小鼠研制成功为克隆器官提供基础[N];中国高新技术产业导报;2003年
3 记者 张巍巍;高脂食品可加剧早老年痴呆症[N];科技日报;2008年
4 孔琪 张连峰;小动物 大作为[N];健康报;2010年
5 记者 吴苡婷;梦想:让治疗变得简单高效[N];上海科技报;2009年
6 新化;大快朵颐不发胖[N];医药经济报;2003年
7 黄每裕;白老鼠生了一窝“黑小子”[N];中国医药报;2002年
8 王凤梅;上海基因小鼠身世探秘[N];辽宁日报;2003年
9 雷毅;科学殿堂里的人们[N];科技日报;2000年
10 中国科学院遗传与发育生物学研究所 劳为德;哺乳动物的遗传改造[N];科技日报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李政;酵母人工染色体(YAC)介导的含HS2定点突变的人β-珠蛋白基因簇在转基因小鼠中的表达[D];中国协和医科大学;1998年
2 朱化星;mRFP1报告基因表达及Gal4-UAS二元表达系统在小鼠中的应用[D];复旦大学;2005年
3 王波;血红素加氧酶-1活性变化对肿瘤细胞体外抗药性、体内生长影响的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
4 高俊;细菌人工染色体(BAC)介导的人载脂蛋白apoA-Ⅰ C-Ⅲ A-Ⅳ A-Ⅴ基因簇转基因小鼠研究[D];中国协和医科大学;2002年
5 冯东晓;细菌人工染色体(BAC)介导的人α-珠蛋白基因簇转基因小鼠的研究[D];中国协和医科大学;2001年
6 刘庆辉;带红系增强子的人βE-珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达[D];中国协和医科大学;1992年
7 刘亚梅;疏肝健脾补肾方对CHB患者、HBV转基因小鼠的免疫调节作用研究[D];广州中医药大学;2007年
8 韦玉生;BAC介导ApoCⅢ增强子删除的人载脂蛋白apoAⅠ/CⅢ/AⅣ/AⅤ基因簇突变株转基因鼠系的建立以及其与完整基因簇转基因小鼠的比较研究[D];中国协和医科大学;2005年
9 范志强;蚓激酶基因在山羊乳腺中的表达及转基因小鼠的制备[D];中国医科大学;2005年
10 刘光泽;复制型HBV转基因小鼠的建立、生物学特性、应用及无免疫耐受研究[D];第一军医大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李明;利用ICSI技术生产转基因小鼠[D];中国农业大学;2005年
2 李文龙;血管内皮细胞特异表达Cre重组酶转基因小鼠的建立[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3 尚希瑶;人基质金属蛋白酶组织抑制物-1转基因小鼠单侧输尿管梗阻术后肾小管间质炎症改变的意义[D];郑州大学;2005年
4 孙新志;条件性RNAi技术降低FGFR2的表达对小鼠胫骨骨折愈合的影响[D];重庆医科大学;2007年
5 蔡兰兰;基于四环素调控系统的TRE-C-imp13转基因小鼠的构建及表达分析[D];厦门大学;2009年
6 郑逸梅;pBC-rtTA转基因小鼠模型的建立和应用[D];扬州大学;2006年
7 张艳荣;多巴胺D5受体转基因小鼠的建立及其生理学研究[D];中国协和医科大学;2008年
8 竺淑佳;前脑特异性过表达VGLUT1转基因小鼠的构建及初步表型分析[D];华东师范大学;2009年
9 方亮;PTA1/CD226转基因小鼠胸腺细胞的发育研究[D];第四军医大学;2006年
10 岳挺;共刺激分子配体PD-L1、PD-L2的真核表达及其转基因小鼠的制备[D];扬州大学;2005年
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