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天香丹通过Nrf2/ARE信号通路改善冠脉微循环障碍大鼠作用机制的研究

马学宽  
【摘要】:目的:通过研究天香丹对冠脉微循环障碍大鼠Nrf2/ARE信号通路及其下游因子的影响,以探究其改善冠脉微循环障碍的作用机制。方法:(1)将63只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、尼可地尔组、天香丹低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组9只。除空白对照组外,大鼠开胸后左心室内注射月桂酸钠建立冠脉微循环障碍大鼠模型,假手术组为注射生理盐水。各组大鼠分别给予生理盐水、天香丹、尼可地尔灌胃28天。(2)于实验终点检测超声心动图观察心功能变化,HE与马休黄-酸性品红-苯胺蓝染色观察冠脉微血管的形态学变化,透射电镜观察心肌细胞超微结构变化。(3)检测各组大鼠血清中MDA、SOD、GSH-Px含量。(4)RT-qPCR及Western-blot法观察各组大鼠心肌中Nrf2/ARE信号通路mRNA及蛋白的表达变化。结果:(1)尼可地尔组、天香丹中剂量组及天香丹高剂量组大鼠心功能较模型组好转(P0.05)。(2)HE及马休黄-酸性品红-苯胺蓝染色后,模型组大鼠冠脉微血管内弥漫着红色血栓混合物,并可见局部心肌细胞纤维化;尼可地尔组及天香丹低、中、高剂量组微血管内血栓均不同程度减轻。电镜结果显示模型组心肌超微结构较空白对照组损伤明显,线粒体絮状改变;尼可地尔组及天香丹各组线粒体损伤减轻。(3)模型组MDA表达高于空白对照组及假手术组(P0.05);尼可地尔及天香丹干预后各组MDA表达降低(P0.05);尼可地尔组SOD表达升高(P0.05);天香丹中剂量组、天香丹高剂量组SOD、GSH-Px表达均升高(P0.05)。(4)RT-qPCR及Western blot结果显示天香丹干预后Nrf2/ARE信号通路mRNA及蛋白的表达明显高于模型组,且存在剂量递增关系。其中天香丹中剂量组及高剂量组Nrf2、NQO1、CAT、HO-1表达升高明显(P0.05);天香丹低剂量组仅Nrf2、Keap1、CAT、HO-1 mRNA表达有差异(P0.05),Nrf2蛋白的表达升高(P0.05);尼可地尔干预后HO-1 mRNA表达量明显升高(P0.05),但各因子蛋白表达无明显差异(P0.05)。结论:天香丹治疗后能够减轻微血栓及线粒体损伤程度,促进抗氧化因子的释放,其改善冠脉微循环障碍的机制可能与调控Nrf2/ARE信号通路减轻氧化应激有关。


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