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实验性ARDS时肝细胞凋亡动态变化的研究

孔剑琼  
【摘要】: 目的:探讨油酸致ARDS过程中肝细胞凋亡的动态变化。方法:随机取新西兰兔34只,体重1.7—2.2kg,雌雄不拘,其中6只作为对照,另外28只从耳缘静脉缓慢注入油酸(oleic acid,OA)0.1ml/kg,以30min、60min、90min、120min为时限又分为4组作为实验组,检测平均动脉血压(MABP),血气及肝功(ALT、AST、ALP)的动态变化,应用TUNEL法、原位杂交技术及光镜和电镜检测ARDS过程肝组织细胞凋亡及Fas和Bcl-2表达的情况。结果:兔在注射OA后15min即有呼吸加快,30min时更明显,同时心率加快,其后随时间延长,呼吸急促明显。实验组随着氧分压的进行性下降,MABP也进行性下降,两者呈正相关(r=0.88,p<0.01)。反映肝功能的血浆ALT含量在实验组60min后逐渐增加,至120min达高峰(p<0.05-0.01),而血浆AST含量到120min时才有升高(p<0.05),血浆ALP含量从30min即有升高,也到120min达高峰(p<0.05-0.01)。TUNEL法显示阳性结果,注射OA后肝组织细胞凋亡指数均比对照组明显增加(p<0.01),注射OA30min细胞凋亡指数达顶峰,以后逐渐下降。Fas和Bcl-2的表达较对照组均明显上调(p<0.01),且Fas表达的增加与肝组织细胞凋亡指数的增加一致,OA30min组Fas表达最强,而Bcl-2在OA60min时表达最强。形态学结果显示,细胞凋亡主要发生于早期,肝细胞、枯否细胞和中性粒细胞均可发生凋亡,而后期以坏死为主。电镜下见到实验组30min肝细胞体积缩小且皱缩变形,染色质凝结成块并聚集于胞核边缘形成环状。结论:油酸致ARDS过程中早期兔肝细胞发生凋亡,且可能参与早期的肝功能损害。


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