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《青岛大学》 2015年
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慢病毒介导Persephin基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠帕金森模型的作用

阴晓峰  
【摘要】:Persephin(PSPN)是胶质细胞源性神经营养因子中的一员,它能够促进神经组织的存活与分化。目的:本实验的目的是评价PSPN基因修饰的骨髓间充质干细胞Lv-PSPN-MSCs对6-OHDA损伤所致帕金森大鼠模型的潜在治疗作用方法:本实验首先在体外分离骨髓间充质干细胞,然后对其进行扩增及鉴定。免疫荧光方法检测MSCs表面神经蛋白nestin,GFAP and S100等的表达,慢病毒转染MSCs,流式细胞仪检测Persephin对MES23.5的作用,帕金森模型建立及纹状体细胞注射,脑片免疫荧光检测Nestin,GFAP,MAP-2 and connexin 43的表达情况,腹腔注射阿扑吗啡观察大鼠旋转行为的改变,高效液相检测不同组中多巴胺的含量。结果:利用贴壁法得到纯度较高的骨髓间充质干细胞,细胞表面抗原检测显示大部分细胞CD44和CD90阳性,CD34和CD45阴性,进一步的实验显示rMSCs免疫荧光染色GFAP(80±2.6%)、Nestin(10.8±5.9%)、β3-tubulin(89.2±4.5)、NES(65±2.2%)、S100(77.2±4.2%)、IBA-1(80.7±6.4%)阳性。WB和PCR显示慢病毒成功转染MSCs,采用流式细胞仪显示Persephin对MES23.5有一定的保护作用。细胞移植入后,在纹状体内迁移、分化,部分细胞表达Nestin,GFAP,MAP-2和connexin 43,Lv-PSPN-MSCs组表达量较其他组明显增强。不同组细胞移植后,阿扑吗啡诱导的旋转行为显示Lv-PSPN-MSCs组明显降低。高效液相检测纹状体内多巴胺的含量,Lv-PSPN-MSCs组较其他组明显增多。结论:我们的研究结果表明在纹状体移植慢病毒介导的骨髓间充质干细胞对大鼠帕金森病有显著的治疗作用。
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R742.5;R-332

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