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《扬州大学》 2001年
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颗粒细胞、卵泡液对山羊卵泡卵母细胞体外成熟、体外受精的影响

李亚东  
【摘要】: 本文系统研究了颗粒细胞、卵泡液对山羊卵泡卵母细胞体外成熟和体 外受精的影响,主要结果如下: 将卵丘-卵母细胞复合体(COC_s)、机械裸卵(DO)、自然裸卵 (NO)在M199体外成熟液中培养24h后,体外成熟率分别为67.68%、 45.3%、7.3%,各组间差异显著(p<0.05);体外受精24h后,卵裂率分别为 14.1%、2.68%、0,各组间差异显著(p<0.05)。 将部分体外成熟的COC_s进行剥离卵丘细胞处理(试验组)、对照组 不进行剥离处理,然后体外受精,试验组和对照组卵裂率分别为14.32%、 14.1%,差异不显著(P>0.05)。 在体外成熟液中分别添加浓度为0.15×10~6个/ml(Ⅰ组)、1.5×10~6个 /ml(Ⅱ组)、15×l0~6个/ml(Ⅲ组)、150×10~6个/ml(Ⅳ)的卵丘颗粒细 胞和卵泡颗粒细胞悬液,对照组为不添加颗粒细胞的M199液,卵母细胞经 体外成熟培养后,对于添加卵丘细胞悬液组,Ⅰ、Ⅱ组的成熟率(60.0%、 64.37%)与对照组(65.41%)差异不显著(P>0.05);Ⅲ组(50.15%)、 Ⅳ(30.4%)与对照组差异显著(p<0.05);成熟后体外受精,卵裂率分别 为14.2%、14.6%、12.47%、12.56%,对照组为13.4%,各组间差异不显著 (P>0.05)。添加卵泡颗粒细胞结果与卵丘颗粒细胞相类似。 COC_s分别在卵丘颗粒细胞单层、卵丘颗粒细胞条件液和M199培养液 (对照组)中培养,体外成熟率分别为66.10%、44.2%和66.28%,条件液 组成熟率显著低于与对照组(p<0.05),单层组与对照组差异不显著 (P>0.05);体外受精后卵裂率分别为12.7%、13.2%和14.8%,各组间差 异不显著(P>0.05)。 将COC_s放于山羊卵泡液中培养24h后,体外成熟率为8.3%,与对照组 (66.42%)相比,差异显著(p<0.05);用M199培养液代替GFF,继续 扬州大学硕士学位论文 培养 24h后,COCs体外成熟率为 62.34%,虽较对照组(68.5%)低,但差 异不显著(P>0.05);体外受精后卵裂率为14.5%,与对照组门2.49%)相 比,差异不显著(P>0.05)。 分别用取自于大卵泡(5-6rum)、中等卵泡(35nun)、小卵泡(2- 3turn)的不同性周期(卵泡期、早期黄体期、功能黄体期、退化黄体期) 的卵泡液培养 COCS,结果表明:对于同一大小的卵泡,卵泡期u)的卵 泡液对 COCS的成熟抑制作用显著…J.05)低于其它各期,早期黄体期 (11)、退化黄体期(IV)的卵泡液对COCs的抑制作用要低于功能黄体期 (m),且差异显著(p<0.05),但n 组与 W组之间差异不显著 (P>0.05);在卵泡期,来源于大、中、小卵泡的卵泡液对 COCS的成熟 抑制作用依次增强,且组间差异显著(P<0.05),其它同一性周期内,不 同大小卵泡的卵泡液对卵母细胞的体外成熟抑制作用差异不显著 (P>0.05)。 在体外成熟培养液中添加浓度为 0、5%、l肌、15%的卵泡液,体外成熟 培养24h后,成熟率分别为66.4%、64.7%、64.3%、60.6%,各组间差异不 显著(P>0.05);体外受精后,卵裂率为13.57%、14.0%、13.弧、 13.48%,各组间差异不显著(P>0.05)。
【学位授予单位】:扬州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S814.4

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