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《扬州大学》 2001年
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壳聚糖在酶工程中的应用及酶法合成头孢氨苄的研究

王峥  
【摘要】: 疏水作用色谱(Hydrophobic Interaction Chromatography,HIC)是二十世纪七十 年代初发展起来的一种重要的生化分离技术,在生物大分子的分离中应用广泛。HIC 填料常用载体为琼脂糖,以壳聚糖为载体的研究未有报道。本文合成了以壳聚糖 (Chitosan,CTS)为载体、以烷基C_4为疏水配基、以戊二醛交联提高机械强度的新 型HIC填料,对其合成条件的优化进行了研究,考查了其部分性质,并将其初步应 用于α-淀粉酶的分离纯化。 1对填料的合成条件进行了优化: (1)0.1~0.15%戊二醛先交联,可产生适当的机械强度。 (2)壳聚糖合成浓度为0.2~1%(W/V),即2~10g/L时,填料具有较好的应用性。 (3)在CTS浓度为5g/L时,控制丁醛浓度为0.13~0.26%(V/V),即醛氨摩尔比为 0.5∶1~1∶1,填料具有较好的应用性。 (4)希夫氏反应温度40~70℃均可,反应时间随温度升高而缩短。 (5)间歇搅拌为宜。 2对填料性质进行了研究: (1)(NH_4)_2SO_4作为流动相盐类,分离效果优于Na_2SO_4。 (2)选择0.5~1hr进行吸附。吸附时间过短,疏水吸附来不及平衡;吸附时间过长, 易造成生物大分子的变性失活。 (3)吸附温度在5~70℃,吸附温度提高,填料对BSA的吸附容量增加;超过70℃, 吸附容量迅速下降,蛋白质发生变性。α-淀粉酶则在40℃有最大吸附。一般宜选 择20~25℃进行疏水分离。 (4)pH对蛋白质与填料间相互作用的影响较为复杂。 3新型疏水色谱填料在酶分离纯化上的应用: 用优化条件合成的CTS CL-C_4装柱色谱,一步纯化α-淀粉酶,比活提高1.7倍, 总蛋白回收94.67%,酶活收率为72.62%。
【学位授予单位】:扬州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:TQ465

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 王晓丽;香菇C91-3菌丝发酵液有效蛋白的初步分离及作用机制研究[D];大连医科大学;2006年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 王峥,郭敏亮,姜涌明,王云,姜守磊,陈云;新型疏水色谱填料—丁基交联壳聚糖的合成[J];功能高分子学报;2001年01期
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10 边六交,冯文科,耿信笃;疏水相互作用色谱中蛋白质保留值的预测[J];色谱;1991年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 李瑞国;朱秀敏;杨慧;;不同萌发期绿豆芽蛋白质含量的测定及营养价值分析[J];山东农业科学;2011年01期
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6 朱华庆,陈飞,谢惠安,张萍;热击对水稻(O.sativaL.)叶绿素a,b及POR同功酶的效应[J];安徽大学学报(自然科学版);1998年04期
7 叶生梅;多菌联合固态发酵生产酒糟菌体蛋白饲料的实验研究[J];安徽机电学院学报;2001年04期
8 孔小卫;二甲亚砜(DMSO)对大豆萌发及幼苗期生理生化指标的影响[J];安徽机电学院学报;2002年04期
9 叶生梅,王岚岚,欧阳明;一株纤维素酶产生菌的固态发酵初步研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2003年01期
10 刘辉;张庆庆;危勤涛;舒伟刚;;红曲霉发酵米酒工艺条件的研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周亚军;康建波;刘妍菊;苏丹;马龙彪;;混合肉肌原纤维蛋白特性研究[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
2 纪丽丽;戴永海;王中杰;;中草药免疫佐剂的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
3 刘彦文;孟小林;朱应;梁东瑞;;文山松毛虫核型多角体病毒的生物学特性及理化性质研究[A];杀虫微生物[C];1992年
4 褚西宁;罗建颖;程巧梅;;棒束孢霉碱性磷酸酯酶部分理化性质的研究[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第四卷)[C];1996年
5 徐兵;潘晨;蒋晓织;林曼芝;陈敏;林灼;陈怡;陈惠聪;;梯度pH共沉淀法回收人工肝丢弃血浆蛋白[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
6 龚加顺;胡小静;彭春秀;周红杰;;普洱茶及其原料多糖分子组成及光谱学特性研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第二卷)[C];2010年
7 唐章生;;巴西鲷乳酸脱氢酶同工酶的初步研究[A];广西水产研究所论文集(2001—2005)[C];2006年
8 方希修;王冬梅;管军军;乐国伟;;超滤/DEAE离子交换层析法分离纯化IgY的研究[A];2009山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2009年
9 李强;陈明;夏蕊蕊;张玉臻;;生物絮凝剂产生菌M-503的分离鉴定及絮凝特性研究[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];2005年
10 付加雷;宋长征;张更林;;壳聚糖/海藻酸钠微囊对干扰素-tau的控释作用[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈云松;转鲑鱼降钙素基因酵母的发酵条件优化及安全性评价[D];中国海洋大学;2010年
2 徐军;富苯丙氨酸碱性短肽的发现及其对蛋白质等电点和免疫交叉反应的影响[D];华南理工大学;2010年
3 付英杰;阿胶低肽及其制剂的研究[D];山东中医药大学;2010年
4 陈义勇;桦褐孔菌多糖纯化、结构及其抗肿瘤机制研究[D];江南大学;2010年
5 田壮;食品中甾体激素残留免疫分析技术与方法研究[D];江南大学;2010年
6 邵凌健;槐糖脂补料发酵及抗真菌、抗肿瘤活性的研究[D];山东大学;2010年
7 李霞;两亲无规药物聚合物合成及其靶向胶束组装研究[D];浙江大学;2009年
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9 孙红男;苹果渣中多酚类物质的高压脉冲电场处理及其生物活性研究[D];北京林业大学;2011年
10 冯敏毅;壬基酚对雄性花背蟾蜍抱对、精子及早期发育的影响[D];兰州大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周艳华;可溶性鸡蛋壳膜蛋白与多肽的制备及其抗氧化活性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 冷一非;嗜热链球菌抗噬菌体菌株的选育、培养及冻干发酵剂的研究[D];华中农业大学;2010年
3 申君;桃蚜的抗药性监测、杀虫剂的配方筛选及其增效生化机理的研究[D];华中农业大学;2010年
4 杜学敏;蚯蚓纤溶酶的分离纯化及部分组分的性质[D];河北大学;2007年
5 刘辉;红曲霉发酵提高γ-氨基丁酸含量的研究[D];安徽工程大学;2010年
6 洪伟;酪蛋白中血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的研究[D];安徽工程大学;2010年
7 张星刚;双水相萃取光度法测定铬(Ⅵ)、镍(Ⅱ)、锌(Ⅱ)的研究与应用[D];山东科技大学;2010年
8 张虹;高表达PGA的枯草芽孢杆菌蛋白质组学研究[D];浙江理工大学;2010年
9 王美花;里氏木霉swollenin在米曲霉中的表达和纯化[D];浙江理工大学;2010年
10 张伟;分子光谱法研究蛋白质与小分子的相互作用及其分析方法研究[D];郑州大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 施建军,丁明,高建峰,皇甫立霞,康玲,徐基安;壳聚糖羧甲基化改性的制备研究[J];安徽化工;1998年04期
2 唐粉芳,金宗濂,王磊,张文清,赵红,李静绮;香菇发酵液对小鼠抗衰老及增强免疫功能的评价[J];北京联合大学学报;1994年01期
3 戴德舜,王义明,罗国安;高速逆流色谱研究进展[J];分析化学;2001年05期
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5 林红卫,梁宏;钝顶螺旋藻中藻胆蛋白体的分离纯化[J];广西化工;2002年01期
6 胡洪波,林东强,叶子坚,梅乐和,姚善泾,朱自强;膨胀床的膨胀特征和流体混合性能[J];高校化学工程学报;2000年02期
7 李红,王炜军,徐凤彩;壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶填充床反应器的试制研究[J];华南农业大学学报;2000年03期
8 胡建兵,邬洪梁,管丽莉;香菇多糖(天地欣)对胃癌化疗患者红细胞免疫功能的影响[J];湖南中医药导报;2003年03期
9 杨冬梅,缪进康,黄明智;天然生物材料——甲壳素和壳聚糖的开发及应用[J];化学工业与工程;1999年06期
10 周卫东,刘如林,邢邦华,刘克明;深层发酵香菇水溶性胞外多糖的生物学活性[J];菌物系统;1997年03期
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李靖;灵芝白灵菇酸奶的研制及发酵液组分对酸奶品质的影响[D];山东农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 丁向东,何秀娟,涂光忠,王萍,褚爱平,赵睿,刘国诠,黄熙怀;以可控孔径玻璃为基质的疏水作用固定相的研制[J];分析化学;1993年04期
2 郭立安,梁国栋,孙瑛,常建华;使用疏水作用色谱研究蛋白质的构象变化[J];分析化学;1993年07期
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4 史永昶,姜涌明,隋德新,吴燕;枯草芽孢杆菌86315α-淀粉酶的研究(Ⅰ)——热稳定性研究[J];高等学校化学学报;1991年05期
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8 苏天升;邓强;李世贵;;非多孔高聚物树脂的高效疏水性相互作用色谱填料[J];化学通报;1993年03期
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10 姜守磊,郭敏亮,姜涌明,赵国骏,王云;新型壳聚糖疏水色谱填料的制备及应用初步研究[J];江苏农业研究;2000年03期
【相似文献】
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4 张柏青;酶法生产薯类酒精[J];食品科技;1984年02期
5 黄汉生;;酶法生产农药活性体[J];精细与专用化学品;1992年01期
6 肖云霞;朱佐卫;;酶法生产喉骨效果好[J];肉类工业;1993年01期
7 贺福元;邓凯文;刘文龙;石继连;戴儒文;唐昱;邹欢;邱云;陈锋;黄胜;;葡萄糖应用生产现状及碎(大)米酶法制成注射用葡萄糖的巨大优势[J];湖南中医药大学学报;2010年12期
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9 方同军;;双酶法制糖稀技术[J];农业知识;1994年05期
10 毛麒瑞;酶法生产三氮唑核苷通过鉴定[J];精细与专用化学品;1997年11期
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1 郑斌;翁雪清;吴伟斌;刘建明;;高质量甲壳素的酶法生产[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
2 李伦波;宋克凤;张丽娜;;酶的裂解批次与成本的数学模型的建立与求解[A];2008年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集[C];2008年
3 史芫芫;罗晖;于慧敏;林海;沈忠耀;;国产GL-7-ACA酰化酶重组菌的培养研究[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(上)[C];2006年
4 周航;于慧敏;侯洁;罗晖;李强;沈忠耀;;λ噬菌体裂解基因在GL-7-ACA酰化酶分离中的应用[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
5 程显好;袁建国;侯永勤;贺连智;张友军;刘鹏;夏艳艳;;酶法生产低聚木糖[A];山东营养学会营养与疾病学术研讨会论文汇编[C];2006年
6 刘德华;杜伟;刘宏娟;孙燕;程可可;郝健;林日辉;;生物法联产生物柴油和1,3-丙二醇及其产业化前景[A];第三届全国化学工程与生物化工年会邀请报告[C];2006年
7 杨顺楷;;对我国L-苯丙氨酸产业化发展的一些看法[A];第九届西南三省一市生物化学与分子生物学学术交流会论文集[C];2008年
8 宋文斯;罗晖;史芫芜;于慧敏;沈忠耀;;重组GL-7-ACA酰化酶的固定化及催化工艺研究[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(上)[C];2006年
9 黄日波;韦宇拓;王青艳;卢福燊;蒙健宗;朱绮霞;卢运昆;黄鲲;;海藻糖合成酶的改性研究:分子进化与半理性设计[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
10 李霜;张宏志;林涛;何冰芳;;天冬氨酸转氨酶在大肠杆菌中的分泌表达[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 郭伟;国内首家10万吨生物酶法生产生物柴油项目落户港城[N];河北日报;2007年
2 总院;酶法生产低聚木糖[N];中国化工报;2002年
3 记者 闫芝莉;国内首家酶法生产生物柴油项目在我省启动[N];河北科技报;2007年
4 通讯员 黄逸斌;打造低能量健康食物品牌[N];中国经济导报;2008年
5 魏公铭;酶法生产低聚木糖开发成功[N];粮油市场报;2001年
6 黄佩;健康元:通过增发引入战略投资者[N];中国医药报;2007年
7 何国庆 张灏;在酶制剂生产中的应用(下)[N];中国食品报;2009年
8 李林;酶法生物柴油生产厂将在沪诞生[N];中国工业报;2006年
9 魏小刚;健康元:业绩骄人 再展宏图[N];中国医药报;2008年
10 仁际宇;健康元7-ACA产品或成新增长点[N];证券时报;2007年
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2 杨天奎;酶法生产人乳脂替代品的研究[D];中国农业大学;2002年
3 郑华宝;7-氨基头孢烷酸酶法生产的研究[D];浙江大学;2007年
4 岳振峰;固定化酶法生产低聚异麦芽糖及其纯化研究[D];华南理工大学;2001年
5 张振乾;脂肪酶产生菌的筛选及固定化脂肪酶在生产生物柴油中的应用研究[D];湖南农业大学;2009年
6 徐桂转;脂肪酶催化植物油制取生物柴油的研究[D];河南农业大学;2007年
7 房耀维;Proteus Vulgaris T6脂肪酶分子定向进化研究[D];南京农业大学;2007年
8 艾志录;橄榄绿链霉菌E-86木聚糖酶的固定化及低聚木糖制备研究[D];中国农业大学;2004年
9 安广杰;以水解明胶和蛋氨酸月桂酯为基质的类蛋白反应的研究[D];江南大学;2005年
10 王挥;黑曲霉产单宁酶与固定化酶制备没食子酸及其丙酯的研究[D];中南林业科技大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐正军;酶法生产5’-核苷酸上游工艺的研究[D];南京工业大学;2003年
2 姚海峰;微生物转化合成瓜氨酸的研究[D];北京化工大学;2008年
3 傅锦坚;微生物酶法生产茶氨酸的研究[D];广东药学院;2009年
4 徐焘;微生物酶法生产L-鸟氨酸的研究[D];北京化工大学;2009年
5 甄达文;酶法催化高酸价油脂脱酸的研究[D];华南理工大学;2011年
6 郭夏丽;酶法生产低聚木糖的研究[D];河南农业大学;2001年
7 崔哲峰;化学合成联酶法生产D-对羟基苯甘氨酸的研究[D];天津大学;2003年
8 游清徽;壳聚糖酶的研制及酶法生产壳寡糖[D];江西师范大学;2006年
9 周海燕;酶法生产魔芋葡甘低聚糖研究[D];湖南农业大学;2004年
10 黎金旭;酶法生产脂肪酸甲酯并提取植物甾醇[D];昆明理工大学;2007年
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