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《扬州大学》 2003年
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拮抗细菌诱导番茄植株抗灰霉病及其机理研究

郭桂萍  
【摘要】: 本文研究了地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)W10、多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)W3、Y2及其去菌液诱导番茄植株对灰霉病的抗性,并探讨了诱导抗性产生的机理。结果表明,拮抗菌及其去菌液诱导处理番茄叶片,都能诱导其产生对灰霉病的系统抗性。3株菌中以多粘类芽孢杆菌W3及其去菌液的诱导效果最大,分别达64.5%和53.1%。W3及其去菌液诱导处理后3d即己产生诱抗效果,5d时诱抗效果达高峰值,后逐渐下降,12d时诱导抗性仍存在。不同浓度拮抗菌诱导效果有显著差异。在一定范围内,诱导效果随菌浓度增加而增强。当菌浓度达10~8cfu/ml时,诱抗效果最大。拮抗细菌及其去菌液诱导处理后,番茄不同叶位叶片均能产生诱导抗性,但不同叶位叶片之间诱抗效果没有显著差异。 拮抗细菌及其去菌液诱导处理后,番茄植株体内的抗性酶类活性产生变化,主要表现在过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性增加。其中,POD、PPO的活性在处理后1d逐渐增加,第3d时达最大值,分别比对照高51.4%和78.7%;3d后逐渐下降,第6d时仍比对照高20%和47.4%。SOD活性在诱导处理后1d增加,第2d时酶活性达高峰,比对照高52.42酶活单位;后酶活性逐渐下降,第6d时酶活性与对照相近。PAL活性在诱导处理后,第1d时达最大值,为对照的3.9倍;后逐渐下降,但第6d时酶活性仍为对照的2.5倍。虽然灰霉病菌接种番茄也能引起植株抗性酶活性增加,但是拮抗菌及其去菌液诱导处理植株的酶活性增加速度快,增加幅度大,且下降较缓慢。此外,拮抗菌和病原菌同时处理时,植株体内抗性酶活性的变化趋势与拮抗菌单独诱导处理相一致。 拮抗细菌及其去菌液诱导处理后,番茄叶片中活性氧(AOS)产生速率第1d时上升,比对照高89%,比病原菌接种的高155.6%;2d后急剧下降,第6d时比病原菌接种的低111.8%,与对照相近。拮抗细菌和病原菌同时接种的植株,活性氧产生速率的变化趋势与拮抗菌单独诱导处理时相似。 扬州大学硕士学位论文 拮抗细菌诱导处理可显著提高番茄植株叶片中水杨酸(SA)含量。处理叶sA 含量24h后大量增加,达2.25ng/g;48h后下降,但仍比对照同一叶位叶片高80.5%。 处理叶上一叶位叶片中的SA含量24h后也增加;48h时达到最大值,浓度为 1.64ng/g,比对照株相同叶位叶片高59.2%;96h后SA含量下降,但仍比对照株相 同叶位叶片高10%。 综上所述,拮抗细菌及其去菌液诱导番茄植株对灰霉病的抗性增加趋势与植 株体内抗性酶类活性变化间存在着密切关系。其中PAL和SOD酶活性高峰先于诱 导效果最大值出现的时间(第3d),PPO和POD酶活性高峰值与最佳诱导效果同时 出现,这说明在拮抗细菌及其去菌液诱导的系统抗性中,不同抗性酶类可能起着 不同的作用。从活性氧产生速率变化和诱导接种症状表现可以看出,这一诱导抗 性不属于过敏性坏死反应。拮抗细菌及其去菌液诱导处理后,植株活性氧产生速 率短暂上升,可能引起信号物质的传导,激活植株体内的防卫反应。SA含量变化 规律表明,在拮抗细菌诱导的植株系统获得抗性中,SA可能参与了抗病性信号传 导和调控。
【关键词】:拮抗细菌 灰霉病菌 诱导抗性 过氧化物酶 多酚氧化酶 苯丙氨酸解氨酶 超氧化歧化酶 活性氧 水杨酸
【学位授予单位】:扬州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S436.41
【目录】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-10
  • 前言10-21
  • 一、 灰霉病生物防治10-13
  • (一) 生物防治的概念及重要性10
  • (二) 生防微生物的种类10-13
  • 1 、 细菌及其代谢物10-12
  • 2 、 真菌及其代谢物12-13
  • 3 、 链霉菌及其代谢物13
  • 二、 诱导抗病性13-19
  • (一) 诱导抗病性的概念13-14
  • (二) 诱导抗病性的研究进展14-15
  • (三) 诱导抗病性的诱导因子15-17
  • 1 、 生物因子15-16
  • 2 、 非生物因子16-17
  • (四) 诱导抗病性机理17-19
  • 1 、 水杨酸(SA)在诱导抗性中的作用17-18
  • 2 、 寄主防御酶在诱导抗性中的作用18
  • 3 、 活性氧及膜脂过氧化在诱导抗性中的作用18-19
  • 4 、 病程相关蛋白(PR)在诱导抗性中的作用19
  • 5 、 木质素和富羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)在诱导抗性中的作用19
  • 三、 论文研究目的和意义19-21
  • 材料与方法21-28
  • 一、 供试菌株21
  • (一) 拮抗细菌21
  • (二) 病原真菌21
  • 二、 培养基21
  • (一) 马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA)21
  • (二) 肉汁胨培养液(BP)21
  • 三、 供试植物21
  • 四、 拮抗细菌及其去菌液诱导番茄植株的抗病性测定21-23
  • (一) 不同诱导物的诱导抗性测定21-22
  • 1 、 诱导物制备21-22
  • 2 、 病原菌制备22
  • 3 、 诱导处理方法22
  • (二) 诱导抗性持续时间测定22-23
  • (三) 不同浓度拮抗细菌的诱导抗性测定23
  • (四) 拮抗细菌及其去菌液对不同叶位叶片的诱导抗性测定23
  • 五、 拮抗细菌及其去菌液诱导番茄植株抗病性产生的机理研究23-28
  • (一) 抗性酶类的活性测定23-25
  • 1 、 过氧物酶(POD)的测定23-24
  • 2 、 多酚氧化酶(PPO)的测定24
  • 3 、 苯丙氨酸解氨酶(PAL)的测定24-25
  • 4 、 超氧化歧化酶(SOD)的测定25
  • (二) 活性氧(AOS)产生速率的测定25-27
  • (三) 水杨酸(SA)含量的测定27-28
  • 结果与分析28-36
  • 一、 拮抗细菌诱导番茄植株对灰霉病的抗性28-30
  • (一) 不同诱导物处理的诱抗效果28-29
  • (二) 不同浓度拮抗细菌的诱抗效果29
  • (三) 拮抗细菌及其去菌液诱抗效果的持续时间29-30
  • (四) 拮抗细菌及其去菌液对不同叶位叶片的诱抗效果30
  • 二、 拮抗细菌及其去菌液诱导番茄植株对灰霉病的抗性机理30-36
  • (一) 抗性酶类活性变化30-34
  • 1 、 过氧化物酶(POD)活性变化30-31
  • 2 、 多酚氧化酶(PPO)活性变化31-32
  • 3 、 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化32-33
  • 4 、 超氧化歧化酶(SOD)活性变化33-34
  • (二) 活性氧(AOS)产生速率变化34
  • (三) 水杨酸(SA)含量变化34-36
  • 讨论36-39
  • (一) 拮抗细菌及其去菌液诱导番茄植株对灰霉病的抗性36
  • (二) 抗性酶类活性与诱导抗性的关系36-37
  • (三) 活性氧产生速率变化与诱导抗性的关系37-38
  • (四) 水杨酸在诱导抗病性中的作用38
  • (五) 诱导抗病性是拮抗细菌防治灰霉病的一个重要机制38-39
  • 参考文献39-48
  • 致谢48-49
  • 附录49-51

【引证文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李斌;一品红叶斑病病原学及其拮抗细菌的研究[D];浙江大学;2005年
2 陈卫良;抗水稻白叶枯病细菌拮抗物质的研究[D];浙江大学;2001年
3 张昕;植物病原拮抗细菌的发酵条件作用机制及定殖规律的研究[D];浙江大学;2005年
4 罗远婵;农田中洋葱伯克氏菌基因型及其与医院同类致病菌的比较研究[D];浙江大学;2006年
5 罗金燕;水稻细菌性谷枯病菌的风险分析、鉴定检测及其拮抗细菌的研究[D];浙江大学;2007年
6 张亚;稻田养鸭抑制水稻纹枯病机制及拮抗细菌A168筛选鉴定研究[D];湖南农业大学;2010年
7 郝晓娟;作物枯萎病生防细菌的研究[D];浙江大学;2006年
8 伏建峰;2’,5,6’,7-四羟基二氢黄酮醇的定向分离及其拮抗细菌脓毒症的生物学活性评价[D];第三军医大学;2008年
9 薛梦林;拮抗菌对冬枣采后病害的生物防治[D];西北农林科技大学;2006年
10 方敦煌;防治烟草赤星病根际芽孢杆菌的筛选及其抗菌物质研究[D];福建农林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曲春鹤;辣椒根腐病拮抗细菌的筛选鉴定及其作用效果的初步研究[D];东北农业大学;2011年
2 施建飞;西洋参主要病原菌拮抗细菌筛选研究[D];吉林农业大学;2013年
3 张芬;水稻稻瘟病和白叶枯病拮抗细菌的筛选及防治作用研究[D];南京农业大学;2011年
4 孙杨;番茄叶霉病菌拮抗细菌的筛选、鉴定及其发酵液活性的研究[D];吉林农业大学;2012年
5 谢宗华;水稻纹枯菌拮抗细菌的筛选及其活性代谢产物的分离与鉴定[D];湖南科技大学;2012年
6 冯金龙;马铃薯病原真菌拮抗细菌鉴定及其生物学功能研究[D];甘肃农业大学;2013年
7 任飞娥;玉米大斑病菌拮抗细菌筛选鉴定及发酵条件的研究[D];吉林大学;2012年
8 牛明杨;番茄早疫病拮抗细菌的筛选及其拮抗作用研究[D];西北大学;2012年
9 路宗岩;杉木炭疽病拮抗细菌的筛选及其菌剂研制[D];中南林业科技大学;2013年
10 陈思宇;水稻纹枯病菌拮抗细菌的筛选与防治作用研究[D];南京农业大学;2013年
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