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《扬州大学》 2005年
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共表达NDV F 基因与H9亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力

徐忠林  
【摘要】:利用鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)表达载体pP12LS构建了能够同时表达NDV ZJ1株融合蛋白(Fusion protein,F)基因和H9亚型AIV血凝素(Hemagglutinin,HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV-12LSFH9A,并对其免疫效力进行了评估。 1.表达NDV F基因和H9亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒的构建 首先从质粒pUCEF中切下F基因及与之相连的鸡痘病毒启动子P_(E/L),将其插入到质粒pP12LS的FPV基因组复制非必需区片段,重组质粒命名为pP12LSF;然后将质粒pFG11SH5H9中H9亚型AIV HA基因和启动子P_S切下并插入到pP12LSF,使分别调控F基因和HA基因转录的启动子P_(E/L)和P_S以反向方式连接,获得转移载体pP12LSFH9A。用该转移载体转染经预先感染FPV(282E4株、大空斑)的鸡胚成纤维细胞(CEF)。通过在含有X-Gal的营养琼脂上挑选蓝色病毒蚀斑和多次蚀斑克隆纯化后,获得稳定生长的重组鸡痘病毒(rFPV-12LSFH9A)。PCR检测证实了F基因和HA基因已成功插入到FPV的基因组;间接免疫荧光试验结果表明重组病毒能够同时正确表达F和HA蛋白。 2.共表达NDV F基因和H9亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒rFPV-12LSFH9A的免疫效力试验 2.1 试验鸡接种rFPV-12LSFH9A后抵抗NDV强毒攻击的免疫保护作用 7日龄SPF雏鸡随机分为9组,每组8只,其中7组分别于颈部皮下接种rFPV_(LP)-12LSFH9A、rFPV_(282E4)-12LSFH9A、rFPV-FH9A、rFPV_(LP)-12LSF、rFPV_(282E4)-12LSF、FPV_(LP)、FPV_(282E4),剂量皆为10~4PFU/羽,再用PBS以0.2ml/羽的量接种1组,另一组通过肌肉接种ND油苗(0.2ml/羽)。免疫后14~21天,除FPV、PBS组外,各种疫苗均可诱生针对NDV F蛋白的间接ELISA抗体,至免
【学位授予单位】:扬州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S852.65

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 徐利军;共表达AIV HA(H5)和NDV HN或NDV F和HN的两种重组鸡痘病毒的构建与免疫效力[D];扬州大学;2008年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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10 程晶;荫硕焱;盖新娜;郭鑫;杨汉春;;2006—2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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10 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
2 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
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7 邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
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9 何孟莲;不同动物TF活性比较及乌骨鸡TF对IBD疫苗造成免疫抑制防治的研究[D];山东农业大学;2009年
10 张舟;HIV-1 DNA疫苗及免疫途径优化[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 孙惠玲;王云峰;苗得园;张培君;智海东;徐灵龙;王玫;童光志;汪明;;表达鸡新城疫病毒F、HN基因和传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒的构建及其特性研究[J];生物工程学报;2006年06期
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 吴艳涛;新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因和表达该基因的重组鸡痘病毒[D];扬州大学;2000年
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 陈平;高效表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及免疫效力试验[D];扬州大学;2003年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 甘军纪;刘武杰;彭大新;吴艳涛;刘秀梵;;表达NDVHN基因的重组鸡痘病毒的部分生物学特性研究[J];畜牧与兽医;2011年06期
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 甘军纪;表达鸡新城疫病毒HN基因重组鸡痘病毒活疫苗的临床前研究[D];扬州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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3 智海东,王云峰,张晶,王玫,王凤雪,童光志;传染性喉气管炎新城疫鸡痘重组病毒免疫效力的研究[J];畜牧兽医学报;2005年08期
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 孟春春;仇旭升;徐丹;陈鸿军;于圣青;丁铲;;两株ClassⅠ新城疫病毒的全基因组序列测定及分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
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6 孙英杰;陈鸿军;詹媛;仇旭升;于洋;宋翠萍;于圣青;丁铲;;新城疫病毒CLASSI强毒株磷蛋白的表达及细胞内定位[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
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9 钱凤芹;;新城疫基因工程疫苗最新研究进展[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
10 胡静涛;杨文涛;肖冲;王泽;丁壮;王春凤;;GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
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2 吕纪增;鹧鸪新城疫的防治[N];中国畜牧兽医报;2006年
3 张艺兵 黄丛平;山东局推广RT-PCR检测方法[N];中国国门时报;2004年
4 河北省辛集市畜禽科技服务中心 肖亚彬 任灵霞 梁剑峰;蛋鸡传喉和新城疫混合感染[N];江苏农业科技报;2006年
5 郑安明;美国研制成功新一代新城疫疫苗[N];中国国门时报;2006年
6 中国科学技术信息研究所;墨西哥育出新城疫疫苗玉米[N];农资导报;2006年
7 清苑职教中心 张俊杰;当前流行鸡病好难治[N];河北农民报;2006年
8 记者 彭溢;哈兽研抗击禽流感再出“杀手锏”[N];黑龙江日报;2008年
9 山东省农科院 张秀美;近期鸡新城疫流行特点与原因分析[N];中国畜牧兽医报;2006年
10 邢台市兽医院 邢兰君;治蛋鸡新城疫和肾传支混合感染中西医结合疗效好[N];河北农民报;2007年
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2 孙蕾;外源基因插入不同复制非必需区影响重组鸡痘病毒抵抗母源抗体干扰的能力[D];扬州大学;2005年
3 王云峰;表达多种外源基因的鸡痘病毒载体疫苗构建及免疫学评价[D];中国农业科学院;2005年
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1 徐忠林;共表达NDV F 基因与H9亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力[D];扬州大学;2005年
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4 曲鲁江;新城疫病毒单克隆抗体的建立及其遗传变异分析研究[D];新疆农业大学;2001年
5 巩艳艳;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的变异[D];山东农业大学;2010年
6 孙委委;两株新城疫病毒分离株全基因组序列的测定及在CEF和鸡胚传代的含量变化分析[D];中国农业科学院;2010年
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