收藏本站
《扬州大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

鸽痘病毒分离株鉴定、致弱及免疫效力研究

佘晓彬  
【摘要】: 鸽痘是由鸽痘病毒(Pigeonpox virus, PPV)引起的一种接触性的常发传染病。PPV为痘病毒科禽痘病毒属,是体积最大的一类DNA病毒。鸽痘通常分为皮肤型和黏膜型两种,前者以体表无羽毛部位出现散在的、结节状的增生性皮肤病灶;后者以上呼吸道、口腔和食管部黏膜出现纤维素性坏死和增生性病灶。从南京市及周边肉鸽饲养场疑似患鸽痘的皮肤中分离到两株病毒,命名为NJ-18和ZJ。通过对其进行病毒分离、负染透射电镜、包涵体检查、理化特性、血清特异性、4b核心蛋白序列和动物致病性各项指标测定。结果表明:电镜下病毒粒子椭圆形,具有囊膜,大小240~330nm,表面呈桑椹样,为典型痘病毒科病毒结构特征;细胞浆中有包涵体,红色、圆形或椭圆形;两株病毒均对乙醚、氯仿、pH3.0、pH11.0均敏感、56℃30min病毒均丧失活力;血凝效价为1:16和1:32; NJ-18 EID50为10-6.67 /0.2mL,ZJ EID50为10-7.32/0.2mL;鸽痘血清对NJ-18和ZJ中和效价都为1:126,鸡痘血清对NJ-18和ZJ中和效价分别为1:4和1:8;4b核心蛋白核苷酸序列同源性比较中,NJ-18 4b核心蛋白序列与ZJ同源性为93.4%,与India株同源性最高为99.6%,与CVL950株同源性最低为71.5%。NJ-18、ZJ 4b核心蛋白序列与已公开发表的其他禽痘病毒4b核心蛋白比较发现:NJ-18与FPV Diftosec CT同源性最高为90.9%,与CPV V同源性最低为66.8%。ZJ与FPV Diftosec CT同源性最高为90.9%,与CPVGB724-01-02同源性最低为66.9%。两株病毒都能引起1月龄鸽全身性痘疹,雏鸡致局部轻微痘疹,对金丝雀完全没有致病性;攻毒用毒株ZJ最小发痘量为50 EID50。以上结果综合证明两株病毒为鸽痘病毒。 采用鸡胚连续传代方法,使PPVNJ-18分离株致弱,获得了一株具有良好免疫原性、安全且纯净的鸽痘弱毒株,命名为PPVNJ-18F1-E1。结果表明:PPVNJ-18经过连传16代,CAM出现水肿和痘斑典型的鸽痘病变,且对1月龄鸽丧失致病性,说明毒力减弱;在F16代的基础上连续传E16代,鸡胚绒毛尿囊膜病变和EID50均稳定; E1、E5、E10和E16代病毒,经鸽体传5代,其毒力稳定,不返强;E1、E5、E10和E16代病毒接种鸽后,均于接种部位出现轻微痘肿,为典型免疫接种反应;对30、45、60日龄鸽保护率为100%;病毒纯净,无细菌和外源病毒污染。 利用PPVNJ-18F1-E1致弱株研制鸽痘病毒弱毒冻干疫苗。该疫苗最小免疫剂量为0.5×10~(3.54)EID_(50);无细菌和霉菌污染;一次单剂量接种、单剂量重复接、一次大剂量接种对鸽均安全;对30、45、60日龄的鸽子,免疫保护率为100%,且免疫期长达7个月以上。
【学位授予单位】:扬州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S852.5

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄爱芳,王林川;鸽痘病毒TK基因的扩增、克隆及序列分析[J];动物医学进展;2004年05期
2 杨佩琼;欧守杼;陈善如;;鸽痘病毒鸡胚化致弱研究再报[J];广东农业科学;1989年01期
3 徐春厚,吴凌,邵红,程葛,王伟臣;琼脂扩散试验法检测鸡痘病毒抗原及血清抗体[J];黑龙江畜牧兽医;1997年01期
4 王慧杰,宁豫昌;鸡痘病毒河南株的分离与鉴定[J];河南畜牧兽医;2005年09期
5 赵振芬,任敏,李文兴,李明学;近年来禽痘发生特点及其防制进展[J];郑州牧业工程高等专科学校学报;1996年04期
6 肖履中;鸡痘病毒HQ98株超微结构观察[J];青海畜牧兽医杂志;2000年03期
7 刘伟,郑文杰,刘辉;鸽痘病毒在鸡胚上的增殖和纯化研究[J];动物科学与动物医学;2002年10期
8 郑文杰,刘伟,赵祥平;鸽痘病毒DNA限制性内切酶分析[J];动物科学与动物医学;2003年02期
9 杨连楷,郭予强,凌育燊,徐耀基,江锦城;鸽痘疫苗的研究[J];畜牧兽医学报;1993年03期
10 王雪鹏,李建亮,常维山,刘悦竹,张春兰;用间接ELISA法检测鸡痘病毒抗体的研究[J];中国兽医科技;2003年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;Cloning,Sequencing of F and HN Genes and Molecular Characteristics of Goose Paramyxovirus BZ02 Isolate[J];Animal Husbandry and Feed Science;2009年Z2期
2 邹励丹;彭远义;彭涛;;鸡葡萄球菌病诊治一例[J];安徽农学通报;2007年17期
3 王天有;赵恒章;;家兔附红细胞体病的诊断与治疗[J];安徽农业科学;2005年11期
4 王天有;秦操;;羊快疫的诊断与防制[J];安徽农业科学;2005年12期
5 王天有;赵恒章;;附红细胞体病病原学诊断方法的研究[J];安徽农业科学;2006年01期
6 王天有;尚伟杰;黄秋玲;王相如;;猪附红细胞体病继发猪瘟的诊断与治疗[J];安徽农业科学;2006年10期
7 王相如;尚伟杰;游鸿垒;;猪附红细胞体病继发猪肺疫的诊断与防治[J];安徽农业科学;2006年14期
8 李军民;靳二辉;时红攀;;犬瘟热的诊治[J];安徽农业科学;2006年15期
9 李红飞;崔贞亮;靳亚平;;间接ELISA法检测促卵泡素抗体方法的建立[J];安徽农业科学;2006年17期
10 钟华;王天有;倪国保;;猪附红细胞体感染继发链球菌病的诊断与防治[J];安徽农业科学;2006年18期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郭延军;;猪附红细胞体病合并猪瘟的诊治与体[A];濮阳市首届学术年会论文选编[C];2006年
2 郭延军;王宏伟;;一野兔饲养场野兔死亡的诊治报告[A];濮阳市首届学术年会论文选编[C];2006年
3 陈金山;陈俊杰;吴玉苹;张智勇;;河南省猪附红细胞体病流行病学调查[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
4 徐耀辉;将增海;王岩;卢建洲;;肉鸭传染性浆膜炎的诊断和防治[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
5 顾玉芳;赵振华;谢磊;;猪支原体肺炎的临床病例分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
6 么宏强;马学恩;于立新;张淑琴;郑秉武;;绵羊肺腺瘤病毒人工感染羔羊后淋巴细胞的变化[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
7 金宁一;刘毅;郭志儒;方厚华;古长庆;罗坤;夏志平;;IBDV VP2/VP0基因在重组鸡痘病毒中的表达及实验免疫研究[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
8 刘秀清;;猪链球菌病的诊断与防治[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
9 尹仁福;刘新鑫;丁壮;刘美;王昌庆;李少丽;吴昊;邱蜜蜜;;RNAi靶向新城疫病毒M和P基因在CEF细胞中抑制新城疫病毒复制的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
10 刘海林;马健;卢晓辉;;简易区分ND La Sota株疫苗优劣的方法[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孔娜;mChIL-18基因与IBDV VP2基因或AIV HA1基因在pFastBac~(TM) Dual中的共表达及其免疫原性研究[D];山东农业大学;2011年
2 余飞;鸡传染性法氏囊病病毒VP1蛋白影响病毒复制及致病性机制的研究[D];中国农业科学院;2011年
3 张丽;传统发酵牦牛奶中益生乳杆菌筛选及其免疫调节功能研究[D];甘肃农业大学;2011年
4 周斌;假型猪瘟病毒体系构建及衣壳蛋白靶向灭活策略抗猪瘟病毒感染研究[D];南京农业大学;2010年
5 吴艳涛;新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因和表达该基因的重组鸡痘病毒[D];扬州大学;2000年
6 张绍杰;表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力的研究[D];中国农业科学院;2000年
7 乔传玲;表达禽流感病毒HA-NA、HA-NP及NP基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究[D];中国农业科学院;2001年
8 李建荣;传染性法氏囊病病毒基因免疫的研究[D];浙江大学;2002年
9 贺秀媛;鸡传染性支气管炎病毒LX4株主要结构基因的研究[D];西北农林科技大学;2002年
10 智海东;表达新城疫病毒F基因和传染性喉气管炎病毒gB基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究[D];中国农业科学院;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
2 段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
3 贾清;鸡新城疫抗体检测试纸条的研制及初步应用[D];华中农业大学;2010年
4 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
5 巩艳艳;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的变异[D];山东农业大学;2010年
6 孙寅剑;IBDV-VP2多表位串联基因的原核表达及表达产物免疫原性分析[D];山东农业大学;2010年
7 王景艳;影响鸡的免疫效果的三个因素的分析[D];山东农业大学;2010年
8 张玮;安徽省部分猪场生猪沙门氏菌带菌情况与耐药性研究[D];安徽农业大学;2010年
9 李强;张家口市鸡传染性法氏囊病毒VP2基因高变区变异性的研究[D];中国农业科学院;2010年
10 陈胜男;犬细小病毒VP2基因的克隆、表达及其重组蛋白的抗原性研究[D];新疆农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张礼璧;ELISA法应用于诊断病毒学的进展[J];病毒学报;1988年01期
2 杨佩琼;欧守杼;陈善如;;鸽痘病毒鸡胚化致弱研究再报[J];广东农业科学;1989年01期
3 徐春厚,吴凌,邵红,程葛,王伟臣;琼脂扩散试验法检测鸡痘病毒抗原及血清抗体[J];黑龙江畜牧兽医;1997年01期
4 李树珩;金丝雀饲养要领[J];农村实用技术与信息;1997年03期
5 常维山,孙淑红,王雪鹏,王增福,丁宝君,郭燕;实验鸡群暴发鸡痘并发细菌感染的诊断报告[J];中国禽业导刊;2003年24期
6 杨连楷,郭予强,凌育燊,徐耀基,江锦城;鸽痘疫苗的研究[J];畜牧兽医学报;1993年03期
7 周济如;禽痘(POX)[J];四川畜禽;1996年02期
8 丘振芳;禽痘的诊治[J];养禽与禽病防治;2000年01期
9 齐俊良;新型鸡痘临床病例诊断报告[J];中国动物检疫;2003年10期
10 郑孝林;谢三星;;八十年代禽痘的研究动态和进展[J];中国家禽;1990年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 刘伟,王东卫,唐蔚东,史光华,佘锐萍;鸽痘病毒的分离鉴定[J];中国兽医杂志;2000年04期
2 郑文杰,刘伟,赵祥平;鸽痘病毒DNA限制性内切酶分析[J];动物科学与动物医学;2003年02期
3 佘晓彬;邵冬冬;戴鼎震;;鸽痘病毒的分离与鉴定[J];中国家禽;2009年07期
4 刘伟,郑文杰,刘辉;鸽痘病毒在鸡胚上的增殖和纯化研究[J];动物科学与动物医学;2002年10期
5 黄爱芳,王林川,黄毓茂;鸽痘病毒插入载体的构建[J];动物医学进展;2005年10期
6 杨佩琼;欧守杼;陈善如;;鸽痘病毒鸡胚化致弱研究再报[J];广东农业科学;1989年01期
7 黄爱芳,王林川;鸽痘病毒TK基因的扩增、克隆及序列分析[J];动物医学进展;2004年05期
8 沈文正;张曼;席爱利;黄晓玲;;鸽新城疫病毒及鸽痘病毒血凝特性及HA试验技术参数研究[J];西北农业学报;2006年01期
9 单林;;一起鸡痘的诊治报告[J];畜牧兽医科技信息;2014年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 黄爱芳;王林川;黄毓茂;;鸽痘病毒插入载体的构建[A];中国畜牧兽医学会2003年学术年会论文集[C];2003年
2 黄爱芳;王林川;;鸽痘病毒TK基因的扩增、克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 佘晓彬;鸽痘病毒分离株鉴定、致弱及免疫效力研究[D];扬州大学;2007年
中国知网广告投放
相关机构
>扬州大学
相关作者
>佘晓彬
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026