鸡钙代谢调节物质基因真核表达质粒应用效果的研究

【摘要】： 在蛋鸡体内表达同种外源钙代谢调节物质基因可弥补蛋鸡体内相应物质合成和分泌的不足,人工短期调节蛋鸡钙营养的代谢,为基因增强疗法治疗营养代谢病提供基础。首先,酶切鉴定并且大量制备鸡钙代谢调节物质基因真核表达质粒pCEP4-CT、pCEP4-PTH和pCEP4-CaBP-D28k。然后,进行两期试验,分别进行血清CT和PTH浓度、产蛋性能和蛋壳质量、骨骼质量以及代谢试验和体重等项目的测定,测定在不同规模下鸡钙代谢调节物质基因真核表达质粒的效果。 1.小试血清CT浓度在2 wk时CaBP组显著高于空质粒组(P0.05);在3 wk时PTH组极显著高于空白组(P0.01),显著高于空质粒组(P0.05),CaBP组显著高于空白组(P0.05);在4 wk时试验组极显著高于空白组(P0.01),CT组显著高于空质粒组(P0.05)。血清PTH浓度在2 wk时CaBP组极显著高于空白组(P0.01);在6 wk时CT组和CaBP组显著高于空白组(P0.05)。 2.小试产蛋率在3 wk时CT组显著高于空白组(P0.05),极显著高于空质粒组(P0.01);在4 wk时CT组和CaBP组显著高于空质粒组(P0.05)。蛋重和蛋形指数同组各周之间差异均不显著(P0.05)。中试产蛋率在2 wk时CT组显著高于空白组(P0.05);在3 wk时CT组极显著高于空白组(P0.01)。蛋重试验组相比各对照差异均不显著(P0.05);蛋形指数PTH组和CaBP组显著高于空白组(P0.05),试验组相比0 wk差异均不显著(P0.05)。 3.小试蛋壳强度同组各周之间差异均不显著(P0.05)。蛋壳相对重量同组各周之间变化总体呈现大幅震荡走势。蛋壳厚度试验组各周之间变化总体呈现震荡上行走势。中试蛋壳强度CaBP组高于各对照(P0.05)。蛋壳相对重量PTH组和CaBP组极显著高于空白组(P0.01),CT组显著高于空白组(P0.05),试验组极显著高于0 wk(P0.01)。蛋壳厚度CaBP组显著高于各对照(P0.05)。 4.小试相同骨骼指标各组之间差异均不显著(P0.05)。中试PTH组BMD显著高于CaBP组(P0.05);各组之间Ash差异均不显著(P0.05);CaBP组Ca显著高于空白组(P0.05);各组之间P差异均不显著(P0.05)。 5.小试GE的代谢率CT组和CaBP组显著高于空白组(P0.05);试验组极显著高于空质粒组(P0.01)。CP的代谢率CT组显著高于空白组(P0.05)。Ash的代谢率CT组和CaBP组极显著高于对照组(P0.01);PTH组显著高于空白组(P0.05),极显著高于空质粒组(P0.01)。Ca的代谢率CaBP组显著高于空质粒组(P0.05)。P的代谢率CT组和PTH组显著高于空白组(P0.05),极显著高于空质粒组(P0.01);CaBP组显著高于空质粒组(P0.05)。 6.小试同周各组之间体重差异均不显著(P0.05)。中试体重CaBP组极显著高于空白组(P0.01),显著高于0 wk(P0.05);CT组极显著高于空白组(P0.01),PTH组显著高于空白组(P0.05)。 注射质粒之后,从血液指标来看,血清CT和PTH浓度均有明显变化说明三种质粒已经成功表达。从鸡蛋指标来看,三种质粒能够有效减缓或者逆转产蛋率和蛋壳质量的降低。从骨骼指标来看,三种质粒能够明显提高骨矿含量。从代谢指标来看,三种质粒能够有效提高蛋鸡对饲料营养物质的利用率,增加体贮,减缓或者逆转体重的下降。