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《仲恺农业工程学院》 2016年
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广州地区丽赤壳属真菌的种类鉴定

殷瑜  
【摘要】:丽赤壳属(Calonectria)真菌是一类重要的植物病原菌,其分布范围广,可为害林木及农作物等,造成严重的经济损失。广东地处南亚热带季风气候区,气候温暖潮湿,丽赤壳属真菌所致病害严重。为明确丽赤壳属种类,为广州市丽赤壳属真菌病害防控提供理论依据,本论文对广州及周边地区的丽赤壳属真菌进行了调查采样和分离,通过形态学和分子生物学方法对分离获得的菌株进行了种类鉴定,并分析其系统发育关系,主要研究结果如下:从广州地区的植物上共采集分离得到16个丽赤壳属真菌菌株。在观察标准培养条件下形态学特征的基础上,结合肌动蛋白(ACT)、钙调蛋白(CAL)、组蛋白H3(HIS3)、翻译延伸因子(TEF-1α)和β-微管蛋白(TUB2)共5个基因序列的系统发育分析,将16个菌株鉴定为5个复合群中11个种:Calonectria cylindrospora复合群中的天南星生丽赤壳Ca.spathiphyllicola、红千层丽赤壳Ca.callistemonii、天南星丽赤壳Ca.spathiphylli、霍奇斯丽赤壳Ca.hodgesii;Ca.brassicae复合群中的东方丽赤壳Ca.orientalis;Ca.reteaudii复合群中的野牡丹丽赤壳Ca.tibouchinae、五隔大无性孢丽赤壳Ca.pentaseptata、小无性孢丽赤壳Ca.microconidialis;Ca.colhounii复合群中的克儒斯丽赤壳Ca.crousiana;Ca.kyotensis复合群中的香港丽赤壳Ca.hongkongensis、冬青丽赤壳Ca.ilicicola。其中,Ca.spathiphyllicola、Ca.callistemonii、Ca.tibouchinae为新种,Ca.orientalis和Ca.hodgesii为中国新记录种。签名树(Clusia rosea)、野牡丹(Melastoma sp.)为丽赤壳属真菌新寄主,蔷薇(Rosa sp.)为Ca.hodgesii新寄主,红千层(Callistemon rigidus)为Ca.pentaseptata、Ca.crousiana新寄主,千层金(Melaleuca bracteata)为Ca.pentaseptata新寄主,鹤望兰(Strelitzia reginae)为Ca.microconidialis新寄主,番荔枝(Annona squamosa)和凤梨(Ananas sp.)为Ca.ilicicola新寄主。所鉴定菌株均附有菌落特征、显微形态图和形态特征描述。研究发现,16个丽赤壳属菌株形态存在丰富的多样性,仅依靠形态特征难以正确区分其种类。本研究通过形态学结合ACT、HIS3、TEF-1α、CAL和TUB2等5个基因联合序列系统发育树分析,能有效地将16个菌株鉴定到种的水平。5个基因中,ACT基因对丽赤壳属真菌物种的鉴别能力最弱,而TEF-1α基因对复合群中相似种的划分最有效。
【关键词】:丽赤壳属 帚梗柱孢霉 分类鉴定 系统发育分析
【学位授予单位】:仲恺农业工程学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S432.44
【目录】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 第一章 前言8-14
  • 1.1 丽赤壳属真菌的经济重要性8-9
  • 1.2 丽赤壳属真菌的分类鉴定研究进展9-12
  • 1.2.1 丽赤壳属真菌的形态学研究9-10
  • 1.2.2 分子生物学技术在丽赤壳属真菌分类鉴定中的应用10-12
  • 1.2.3 丽赤壳属真菌物种多样性的研究进展12
  • 1.3 我国关于丽赤壳属真菌的研究概况12-13
  • 1.4 本研究的目的意义13-14
  • 第二章 材料与方法14-23
  • 2.1 病害样本14
  • 2.2 供试培养基及其配制14
  • 2.3 主要试剂、用具及仪器设备14-16
  • 2.3.1 试剂及其配制14-15
  • 2.3.2 PCR引物15
  • 2.3.3 工具15
  • 2.3.4 仪器和设备15-16
  • 2.4 病原菌分离纯化与保存16
  • 2.5 丽赤壳属真菌的鉴定16-21
  • 2.5.1 形态学鉴定16-17
  • 2.5.2 分子鉴定17-21
  • 2.6 致病性测定21-23
  • 2.6.1 叶片接种21-22
  • 2.6.2 茎干接种22
  • 2.6.3 根茎接种22
  • 2.6.4 病原菌的再分离22-23
  • 第三章 结果与分析23-55
  • 3.1 样本的采集与菌株的分离情况23
  • 3.2 丽赤壳属真菌种类鉴定结果23-55
  • 3.2.1 天南星生丽赤壳24-27
  • 3.2.2 红千层丽赤壳27-30
  • 3.2.3 天南星丽赤壳30-32
  • 3.2.4 霍奇斯丽赤壳32-34
  • 3.2.5 东方丽赤壳34-36
  • 3.2.6 野牡丹丽赤壳36-40
  • 3.2.7 五隔大无性孢丽赤壳40-43
  • 3.2.8 小无性孢丽赤壳43-45
  • 3.2.9 克儒斯氏丽赤壳45-48
  • 3.2.10 香港丽赤壳48-51
  • 3.2.11 冬青丽赤壳51-55
  • 第四章 讨论55-57
  • 4.1 广州地区丽赤壳属真菌的种类与为害55-56
  • 4.2 形态特征在丽赤壳属真菌鉴定中的重要性56
  • 4.3 广州地区丽赤壳属真菌的系统发育分析56-57
  • 致谢57-58
  • 参考文献58-63
  • 附图63-65
  • 答辩委员会对论文的评定意见65-66

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1 殷瑜;广州地区丽赤壳属真菌的种类鉴定[D];仲恺农业工程学院;2016年
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