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《仲恺农业工程学院》 2019年
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2型猪链球菌血清杀菌试验的建立及其与ELISA的相关性分析

林玲  
【摘要】:猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是革兰氏阳性菌,能引起人兽共患病。导致肺炎、败血症、脑膜炎、关节炎和心内膜炎等严重症状,该病可在全球广泛流行,并导致严重疫情。血清型2是毒力最强的猪链球菌。猪链球菌致病过程包括黏附、侵袭、经血液传播、突破血脑屏障等。在血液扩散过程能够引发菌血症。目前,可以通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测猪链球菌抗体,此检测方法只能检测与抗原特异性结合的免疫球蛋白,而血清杀菌试验(Serum bactericidal assay,SBA)是测量杀伤各种细菌的功能性抗体滴度的方法,可以直接检测抗体的杀菌活性,进而更准确的评价免疫的保护效果。在本研究中,在病猪的心脏中分离了一株可疑的菌株。经细菌培养观察,革兰氏染色并显微镜观察,生化试验,聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR),鉴定了该分离菌株是2型猪链球。通过梯度试验,以2型猪链球菌全菌疫苗免疫的藏猪血清作为阳性血清进行实验,此外,以阴性血清进行补体对照试验,建立了2型猪链球菌的血清杀菌试验,并证实了该方法的特异性和重复性良好。用商品ELISA试剂盒和血清杀菌试验测定了80日龄的未携带2型猪链球菌的藏猪免疫全菌疫苗后的一免血清和二免血清的抗体,36份免疫血清样本的两种方法测定的结果符合显著线性相关关系,相关性较好(r=0.841,P0.001)。
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