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《宁波大学》 2012年
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小球藻的诱变及盐度、Fe~(3+)对相关代谢酶的影响

杜宇  
【摘要】:小球藻(Chlorella)是一类重要的经济微藻,在水产养殖、食品、医药化工、环境生态等方面都具有广泛的应用。本文以蛋白核小球藻(C. pyrenoidosa)F-9为实验对象,对其进行紫外诱变筛选出生长速率较快、油脂含量较高的诱变株Z-3。并比较了不同盐度和Fe~(3+)浓度培养下Z-3的生理生化和两种代谢酶—超氧化物歧化酶(SOD)和硝酸还原酶(NR)的活性及转录表达差异。旨在筛选出适合大规模培养的小球藻藻种和培养条件,为小球藻的应用研究奠定基础。 首先确定的紫外诱变条件为20W紫外灯管,照射距离10cm,照射时间为10min。比较生长速度较快的5株诱变小球藻(Z-2、Z-3、Z-5、Z-10和Z-18)的蛋白、叶绿素和总脂含量,结果显示5株诱变藻的叶绿素含量均高于出发株,可溶性蛋白的含量与出发株比差别不大,总脂含量均高于出发株。 以诱变藻株Z-3作为实验材料,进行了4种不同NaCl浓度(0、0.15、0.30和0.45mol L-1)实验。结果表明在0-0.30mol L-1NaCl浓度范围内,小球藻生长较快;Z-3的叶绿素含量和蛋白含量在不同盐浓度处理时均下降;油脂含量随着培养基中盐浓度增加而呈现递增趋势,在0.45mol L-1NaCl时最高。不同盐浓度培养小球藻Z-3SOD活性变化缓慢;0.15-0.30mol L-1NaCl组Z-3的NR活性较高,而高盐度(0.45mol L-1NaCl)NR酶活性受抑制。0.15mol L-1NaCl浓度组小球藻nr基因表达量最高(为不加NaCl组的6.75倍),而0.45mol L-1NaCl浓度组小球藻nr基因表达量最低,为0盐度组的0.68倍。 以诱变藻株Z-3作为实验材料,进行了5种不同Fe~(3+)浓度(0、0.015、0.03、0.06和0.12mmol L-1)实验。结果表明在0.03和0.06mmol L-1Fe~(3+)浓度培养小球藻生长较快,而高铁浓度组(0.12mmol L-1)其生长受抑制;0.015和0.06mmol L-1Fe~(3+)浓度组叶绿素含量增加最大;不同Fe~(3+)浓度组Z-3的蛋白含量均低于0.06mmol L-1组。不同Fe~(3+)浓度下小球藻Z-3油脂含量均在实验第3天最高,高铁浓度组油脂含量明显高于其它组。光合放氧量均在第72个小时时达最大。SOD酶活性实验组大于对照组。在0.03和0.06mmol L-1Fe~(3+)浓度组小球藻Z-3NR酶活性和基因表达量较高,而缺铁组nr基因表达量最高。 因此适合该小球藻Z-3生长的最适盐度范围是0-0.30mol L-1NaCl和0.03-0.06mmol L-1的Fe~(3+)浓度。
【学位授予单位】:宁波大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S917.3

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【参考文献】
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